幽门螺杆菌检测方法及其评价
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182 专题笔谈-幽门螺杆菌诊治 幽门螺杆菌检测方法及其评价 成虹 文章编号:1005—2194(2013)03—0182—03 中图分类号:R573.6 文献标志码:A 摘要:幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染与多种上胃肠道疾病及某些胃肠道外疾病密切相关,有多种方法可 以用于Hp感染的检测,准确地检测和诊断及细菌耐药性检测有利于Hp感染相关疾病的诊治。本文主要介绍了 Hp感染的诊断标准和根除判断标准、各种检测方法的特点及其在临床应用中应注意的问题。 关键词:螺杆菌,幽门;耐药;胃黏膜组织快速尿素酶试验;尿素呼气试验 Significance and appraisal for detection of helicobacter pylori. CHENG Hong.Peking University First Hospital,Bei- j g 100034,China Abstract:Helicobacter pylori(Hp)infection is mostly associated with multiple upper gastrointestinal diseases and certain diseases of miscellaneous systems.There have been approaches available for detection of Hp infection.The accurate assay and diagnosis and antibiotic susceptibility test may facilitate the treatment of Hp infection—associated diseases.In this re— view,the criteria orf diagnosis and judgment of eradication of Hp were delineated,and the characteristics of various methods or Hp detectifon and the issues that should be highlighted during clinical application were addressed. Keywords:helicobacter pylori,pylorus;drug resistance;gastic mucosa tirssue rapid urease test;c—urea breath test 成虹,北京大学第一医院消化内科 副主任医师、副教授、硕士生导师。兼 在根除治疗结束至少4周后进行,首选UBT。符合 下述3项之一者可判断为Hp根除:① C或 C 任中华医学会消化病学分会幽门螺杆 菌学组副组长。在国内外期刊发表论 UBT阴性;②HpSA检测阴性;③基于胃窦、胃体两 个部位取材的RUT均阴性。 本文将就各种检测方法的特点、新进展以及临 床检测中应注意的问题进行介绍。 1侵入性检查方法 文40余篇,参与《幽门螺杆菌感染的基 础与临床》、《幽门螺杆菌感染诊疗指 南》、《临床思维指南一消化系统疾病 典型病例分析》等著作的编写。 2012年关于幽门螺杆菌(Hp)感染的井冈山共 识正式发表,共识中关于Hp感染的诊断和根除标 准如下:(1)Hp感染的诊断:符合下述3项之一者 可判断为Hp现症感染:①胃黏膜组织快速尿素酶 试验(RUT)、组织切片染色或培养3项中任一项阳 1.1 内镜放大窄波长内镜(NBI)和共聚焦激光 显微内镜的发展,使其可以被用于内镜下观察胃黏 膜的Hp感染的直接或者间接征象,从而实现对Hp 感染的在体诊断…。在临床应用中应当注意,内镜 检查主要用于对上胃肠道各种病变的诊断,在患者 接受内镜检查的同时,如果可以同时进行Hp感染 性;②”C或 c尿素呼气试验(UBT)阳性;③Hp粪 便抗原检测(HpSA检测)(经过临床验证的单克隆 抗体法)阳性。血清Hp抗体检测(经临床验证、准 确性高的试剂)阳性提示曾经感染,从未治疗者可 视为现症感染。(2)Hp感染根除治疗后的判断:应 征象的观察,有助于提高对疾病诊断的准确性,但该 方法并不适合用于Hp感染的常规检测。 1.2 RUT RUT是临床内镜检查中最常用的检测 方法,具有简便、快速、准确、普遍、价廉的特点,其检 测结果受试剂pH值、取材部位、取材组织大小、取 材组织中菌量、反应时间、环境温度等因素影响。注 意当标本中有10 个以上菌量时RUT试验才显示 阳性;检测结果存在假阴性或假阳性的可能;不同检 作者单位:北京大学第一医院,北京100034 电子信箱:chenghong@medmail.con.cn 2013年3月第33卷第3期 中国实用内科杂志 183 测试剂在不同时间内读取结果的敏感性和特异性存 在差异 ;同时采取2块组织进行检测(胃窦和胃 法多用于科研或者服务于个体化医疗。 2非侵入性检测方法 体),可以提高检测的敏感性 J。当患者因病情需 要接受胃镜检查时,建议常规进行RUT试验,检测 2.1尿素呼气试验UBT是检测Hp感染最好的 结果呈阳性时,可以直接对患者进行根除治疗。 在临床应用中,可能会出现先接受胃镜检查的 患者RUT试验的观察结果时间比较长,后接受胃镜 检查患者RUT试验的观察结果时间短,从而导致后 接受胃镜检查患者RUT试验的假阴性率增加,如果 方法,准确性高,易于操作 J。可反映全胃Hp感染 状况,可克服细菌“灶性”分布的差异,一定程度上 避免了以RUT活检取材的点的局限性。应注意 UBT检测值靠近临界值附近时不可靠 ,检测结果 可能为假阴性或者假阳性,需择期再次检测或采用 注意对每一例标本的观察时间都能够达到1 h,则可 以明显减少RUT试验假阴性的发生率。肠化黏膜 不适宜Hp定植,当活检标本取自于肠化黏膜时,可 能会导致RUT试验假阴性。如患者胃镜检查前接 受过Hp根除治疗或者服用过较长时间抑酸剂等影 响检测的药物,Hp可能从胃窦移位到胃体,从而导 致胃窦黏膜活检标本RUT试验假阴性,如果同时从 胃体取活检标本进行RUT试验检测,可以降低检测 结果的假阴性率。此外,活动性出血时、胆汁反流性 胃炎,由于胃内细菌量减少,也会导致检测结果假阴 性。 1.3组织学检测在用于Hp感染检测的同时,还 可以对胃黏膜的病变进行诊断。不同染色方法的敏 感性不同,免疫组化染色敏感性最高,但费用高 ; 荧光原位杂交(FISH)在检测Hp感染的同时还可以 检测其对克拉霉素的耐药性 j。特殊染色中以 Warthin—Starry银染阳性检出率最高,全片只要有少 数几个典型的Hp即可诊断(包括“C”型或“s”型); 改良Giemsa染色因方法更为简便、易操作而被病理 科广泛采用。对炎症明显,尤其是伴有活动性而 HE染色切片未找见Hp的,要作特殊染色仔细寻 找,可以用较简便的Giemsa染色,也可采用各病理 室惯用的染色方法。一些药物可致Hp变形(球样 改变),当组织学检查发现有中性粒细胞浸润时,大 多数这种球样菌是Hp。Hp抗体检测可以明确证实 是否感染Hp。肠化黏膜表面通常无Hp定植,宜在 非肠化处寻找。取自溃疡底部(苔)、肿瘤的组织亦 无Hp定植 。注意当镜下观察到Hp样的微生物, 而没有进行Hp抗体染色检测时,这一微生物有可 能不是Hp,但95%以上是Hp。 1.4细菌培养 细菌培养是Hp感染诊断的金标 准,但方法复杂、耗时,需要有一定实验室条件,组织 标本转送比较困难,需要专门的转送液并保持低温, 不适宜在基层医院推广;其可为抗原制备、药敏试 验、细菌分型和致病性等研究提供研究材料。该方 其他方法检测。胃动力异常可能导致检测结果不准 确,尿素试剂经尿素酶分解产生的HCO[需在胃肠 道吸收,胃动力较强者UBT的峰值提前,胃动力减 弱者UBT的峰值延迟(如存在幽门梗阻及胃轻瘫), 从而出现假阴性的结果;当胃内Hp明显减少时,亦 可出现假阴性。 2.2粪便抗原检测 经过验证的单克隆抗体检测 试剂具有较好的敏感性和特异性 ;可以检测 Hp现症感染,可用于Hp治疗前的诊断和治疗后的 复查;操作安全、简便、快速;不需要口服任何试剂, 适用于所有年龄和类型的患者。目前国际上认为该 方法的准确性与呼气试验相当,欧洲新共识中重点 推荐这项检测方法 ¨,但国内目前还缺乏经过验证 的准确性高的单克隆抗体检测的试剂。 2.3血清抗体检测 可以反映一段时间内Hp感 染情况;是惟一不受近期用药和胃内局部病变影响 的检测方法;部分血清试剂盒可在判断Hp感染的 同时检测CagA和VacA抗体。不同试剂盒检测的 准确性差异较大 ;Hp根除后抗体,尤其是CagA 抗体可以维持几个月或者几年¨ ,抗体滴度数年持 续不降者常提示体内Hp感染存留;血清抗体定性 检测不能用于治疗后的复查。另外,血清抗体检测 可能与其他细菌抗原有交叉反应,对于患病率低的 地区血清抗体检测阴性预测值高,患病率高的地区 检测阳性预测值高。血清学在如下情况下可作为现 症感染的诊断手段:消化性溃疡活动出血、胃黏膜相 关淋巴组织(MALT)淋巴瘤、严重的萎缩性胃炎。 当患者因病情不能停用影响检测的药物(如质子泵 抑制剂),而临床又需要明确是否有Hp感染时,可 以采用血清抗体检测方法进行检测,如血清抗体检 测结果阳性且患者需要接受Hp根除治疗,宜在择 期应用其他现症感染检测方法检测阳性时,对患者 进行根除治疗。’ 2.4 口腔Hp检测 口腔Hp感染问题是一个具有 争议的问题。目前临床上已经有唾液Hp检测的试 Chinese Journal of Practical Internal Medicine 剂应用,其采用胶体金层析式双抗体夹心法技术,采 用尿素酶单克隆抗体,定性检测唾液中相应的Hp 产生的尿素酶。临床应用中应当注意,口腔Hp检 测不能作为诊断Hp感染的方法和依据,对于反复 治疗失败或者口腔有异味的患者,口腔Hp检测阳 [2 J Vaira D,Gatta L,Ricci c,et a1.A comparison amongst three rapid urease tests to diagnose Helicobacter pylori infection in 375 consec— utive dyspeptic[J].Intern Emerg Med,2010,5(1):41—47. 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