维普资讯 http://www.cqvip.com 中国组织工程研究与临床康复舅１／卷舅４５躬２００７—１１—１１出版 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＲｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｖｅ ＴｉｓｓｕｅＥｎｇｉｎｅｅｎｎｇＲｅｓｅａｒｃｈ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ１１，２００７ Ｖｏ１．１１，Ｎｏ ４５ 基础医学 动脉粥样硬化模型大鼠接受有氧运动后的组织学变化 张海平’，吴翊馨 Ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｍｏｄｅｌ ｒａｔｓ ａｆｔｅｒ ａｅｒｏｂｉｃ ｅｘｅｒｃｉｓｅ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ Ｓｈａｎｇｈａｉ ｏｆ Ｓｐｏｒｔ． ２０Ｏ４３８． ２Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ Ｈｕｍａｎ ｏｆ Ｅｘｅｒｃｉｓｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｃｈｉｎａ： ＡＩＭ：Ｔｏ ｓｅｔ ｕｐ ｔｈｅ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ（ＡＴＳ）ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｒａｔｓ ｕｓｉｎｇ ｈｉｇｈ－ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｄｉｅｔ，ａｎｄ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ａｏｒｔａ ａｆｔｅｒ ａｅｒｏｂｉｃ ｅｘｅｒｃｉｓｅ． Ｍ＿ＥＴＨ０ＤＳ：Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ ｉｎ ｔｈｅ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ． Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｓｈｅｎｙａｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ｏｆ Ｓｐｏｒｔｓ Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ．Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ＴｒａｄｉｔｉｏｎａＩ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｆｒ０ｍ Ｊｕｎｅ ｔｏ Ｏｃｔｏｂｅｒ ｉｎ ２００６． Ｏｎｅ ｈｕｎｄｒｅｄ ｐｕｒｅｂｒｅｄ ｍａｌｅ Ｗｉｓｔａｒ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｉｎｔｏ ｆｉｖｅ ｇｒｏｕｐｓ ｅｑｕａｌｌｙ（ｎ＝２Ｏ）： ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（ＮＣ），ｈｉｇｈ－ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｄｉｅｔ ｆｏｒ ＡＴＳ ｇｒｏｕｐ，ａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃ ｄｉｅｔ ｗｉｔｈ １－ｈｏｕｒ ｓｗｉｍｍｉｎｇ（Ｓ１），ａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃ ｄｉｅｔ ｗｉｔｈ １．５－ｈｏｕｒ ｓｗｉｍｍｉｎｇ（Ｓ１．５），ａｎｄ ａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃ ｄｉｅｔ ｗｉｔｈ ２－ｈｏｕｒ ｓｗｉｍｍｉｎｇ（Ｓ２）．②ＮＣ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｆｅｄ ｗｉ价ｎｏｒｍａｌ ｆｏｏｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｔｓ ｏｆ ｏｔｈｅｒ ｆｏｕｒ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｆｅｄ ｗｉｔｈ Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ３（７００ ０００ ＩＵ／ｋｇ）ｔｈｒｅｅ ｄａｙｓ ｂｅｆｏｒｅ ａｅｒｏｂｉｃ ｅｘｅｒｃｉｓｅ ａｎｄ ｔｈｅｎ ｗｉｔｈ １５ ｇ ａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃ ｄｉｅｔ ｄａｉｌｙ，ｔｏｔａｌｌｙ ｆｏｒ ８ ｗｅｅｋｓ．Ｓ１，Ｓ１．５ ａｎｄ Ｓ２ ｇｒｏｕｐｓ ｓｗａｍ ｆｉｖｅ ｄａｙｓ ｅｖｅｒｖ ｗｅｅｋ ｆｒ０ｍ １ ０ ｍｉｎｕｔｅｓ ｐｅｒ ｄａｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｂｙ １ ０ ｍｉｎ／ｄａｙ ｔｏ ６０ ｍｉｎ／ｄａｙ，９Ｏ ｍｉｎ／ｄａｙ ａｎｄ １ ２Ｏ ｍｉｎ／ｄａｙ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｅｉｇｈｔ ｗｅｅｋｓ Ｉａｔｅｒ，ａｌＩ ｔｈｅ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｆａｓｔｅｄ ｆｏｒ １２—１８ ｈｏｕｒｓ．（３）Ａ¨ｔｈｅ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ａｎｅｓｔｈｅｔｉｚｅｄ ｔｏ ｄｅａｔｈ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｂｌｏｏｄ ｓａｍｐｌｉｎｇ ｆｒ０ｍ ｒａｔ ａｏｒｔａ．Ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ａｏｒｔａ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｗｉｔｈ ｌｉｇｈｔ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ． ＲＥＳＵＬＴＳ：Ｉｎ ｈｉｇｈ－ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｄｉｅｔ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｏｂｖｉｏｕｓ ｆａｔｔｙ ｓｔｒｅａｋ（ＡＴＳ Ｉ ｓｔａｇｅ），ｆｉｂｒｏｕｓ ｐｌａｑｕｅ（ＡＴＳⅡｓｔａｇｅ），ｔｙｐｉｃａｌ ｍａｔｕｒｅ ａｔｈｅｒｏｍａｔｏｕｓ ｐｌａｑｕｅｓ（ＡＴＳⅢｓｔａｇｅ）ａｎｄ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ａｆｆｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＳ ＩＶ ｓｔａｇｅ）ｆｏｒｍｅｄ ｉｎ ｒａｔ ａｏｒｔａ．Ａｆｔｅｒ ８．ｗｅｅｋ ａｅｒｏｂｉｃ ｅｘｅｒｃｉｓｅ，ｔｈｅ ｒａｔ ａｏｒｔａ ｉｎ Ｓ１， Ｓ１．５ ａｎｄ Ｓ２ ｇｒｏｕｐｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ａｒｔｅｒｉａＩ ｃａｎａ１ ｗａｌ１ ｗａｓ ｃｌｅａｒ， ｉｎｔｉｍａＩ ｃｅｌｌｓ ｂｅｃａｍｅ ｓｍｏｏｔｈ，ｔｕｎｉｃａ ｍｅｄｉａ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｅｌａｓｔｉｃ ｐｌａｔｅ ｗｅｒｅ ｗｅｌ１．ａｒｒａｎｇｅｄ，ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ．ｎｏ ＡＴＳ ａｆｆｅｃｔｉｏｎ ａｐｐｅａｒｅｄ． Ｃ０ＮＣＬＵＳ１０Ｎ：Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｍｏｄｅＩ ｏｆ ＡＴＳ ｉｎ ｒａｔｓ ｍａｙ ｂｅ ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔｌｙ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ ｂｅｉｎｇ ｆｅｄ ｗｉｔｈ Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ， ａｎｄ ｈｉｇｈ－ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｄｉｅｔ．Ａｅｒｏｂｉｃ ｅｘｅｒｃｉｓｅ ｃａｎ ｐｒｅｖｅｎｔ ａｎｄ ｉｍｐｅｄｅ ｔｈｅ ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｏｆ ＡＴＳ． Ｚｈａｎｇ ＨＰ，Ｗｕ ＹＸ Ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｍｏｄｅｌ ｒａｔｓ ａｆｔｅｒ ａｅｒｏｂｉｃ ｅｘｅｒｃｉｓｅ．Ｚｈｏｎｇｇｕｏ Ｚｕｚｈｉ Ｇｏｎｇｃｈｅｎｇ Ｙａｎｊｉｕ ｙｕ Ｌｉｎｃｈｕａｎｇ Ｋａｎｇｆｕ ２００７；１ １（４５）：９０５１—９０５５（Ｃｈｉｎａ） 【 ｚｇｌｃｋｆ ｃｏｍ／ｚｇｌｃｋｆｌｅｊｏｕｒｎａｌ／ｕｐｆｉｌｅｓ／０７－４５／４５ｋ－９０５１（ｐｓ）．ｐｄｆ］ 摘要 目的：以高脂饮食建立大鼠动脉粥样硬化动物模型，观察有氧运动对其组织学变化的影响。 方法：实验于２００６—０６／１０在沈阳体育学院实验中心重点实验室和辽宁中医药大学生理实验室完成。 实验分组：将１ＯＯ只健 康纯种雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为５组：正常对照组、高脂组、运动１ ｈ组、运动１ ５ ｈ组、运动２ ｈ组，每组２Ｏ只。②实验方法： 正常对照组喂普通饲料。在实验开始时，高脂组、运动１ ｈ组、运动１．５ ｈ组、运动２ ｈ组以维生素Ｄ３ ７Ｏ万ＩＵ／ｋｇ的剂量分３ ｄ 灌喂，然后喂高脂饲料１５ ｇ／ｄ，共８周。运动１ ｈ组、运动１．５ ｈ组、运动２ ｈ组从实验日起每周进行５ ｄ游泳训ｌ练，从１０ ｍｉｎ／ｄ 起，每天递增１０ ｍｉｎ直至１ ｈｉｄ、１．５ ｈｉｄ、２ ｈｉｄ，持续８周。实验结束当日停止喂养，空腹１２￣１８ ｈ。⑧实验评估：全部大鼠主动 脉采血后麻醉下处死，迅速取出心脏连同主动脉，光镜下观察各组大鼠主动脉组织形态学改变。 结果：高脂组大鼠主动脉可见明显脂纹（动脉粥样硬化Ｉ期）、纤维斑块（动脉粥样硬化Ⅱ期）、典型的成熟粥样斑块（动脉粥样硬 化Ⅲ期）以及复合病变（动脉粥样硬化Ⅳ期）；经过８周有氧运动后运动１ ｈ组、运动１．５ ｈ组、运动２ ｈ组组织切片均发现主动脉 管壁层次清楚，内膜细胞完整，中膜平滑肌细胞、弹力板排列规整，未见动脉粥样硬化Ｉ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期病灶。 结论：维生素Ｄ。灌喂与高脂饲料诱导相结合，易在短时间内建立动脉粥样硬化大鼠模型，而有氧运动能有效预防和阻碍动脉 粥样硬化的发生和发展。 关键词：大鼠；动脉粥样硬化模型；有氧运动；组织学研究 张海平，吴翊馨．动脉粥样硬化模型大鼠接受有氧运动后的组织学变化【Ｊ］．中国组织工程研究与临床康复，２００７，１１（４５）：９０５１—９０５５ ［ｗｗｗ ｚｇｌｃｋｆ ｃｏｍ／ｚｇｌｃｋｆ／ｅｊｏｕｍａｌ／ｕｐｆｌｌｅｓ／０７－４５／４５ｋ－９０５１（ｐｓ） ｐｄｆ］ 渐进的过程，从脂纹、纤维斑块、粥样斑块到最 ０ 引言 后的复合病变，每个阶段都有特定的形态和病 理特征。寻求一种与人类的发病过程，病理特 随着人们生活水平的提高，高胆固醇和高 征相似的动物模型是研究有氧运动对动脉粥 脂肪过量摄入已成为非常普遍的问题，由此引 样硬化影响的前提条件，而建立合适的动脉粥 发高胆固醇血症、动脉粥样硬化等心血管发 样硬化动物模型是研究其发病机制及探讨治 病，严重危害着人体健康。近年来，运动医学界 疗措施的关键。 许多学者提出有氧运动能够改善心血管疾病 本实验以高脂饮食大鼠建立动脉粥样硬 的血脂代谢紊乱，但有氧运动对动脉粥样硬化 化的动物模型，采用８周渐进性有氧运动，通 脂代谢影响的组织形态学及其机制等方面尚 过动脉组织形态学变化来判断动脉粥样硬化 不清楚。动脉粥样硬化的形成是一个长期的、 模型的建立以及有氧运动对其组织形态学的 沈阳１２００邮政信箱１１０００４ ｋｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ ｗｗｗｚｇｌｃｋｆｃｏｍ Ｓｃｉｅｎｃｅ． Ｓｈｅｎｙａｎｇ ｌｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ．Ｓｈｅｎｙａｎａ １ １０１０２．Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ Ｃｈｉｎａ Ｚｈａｎｇ Ｈａｉ—ｐｉｎｇ☆． Ｓｔｕｄｙｉｒｌａ ｆｏｒ ｄｏｃｔｏｒａ【ｅ Ａｓｓｏｃｉａｔｅ ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ ｏｆ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｓｐｏｒｔｓ Ｓｃｉｅｎｃｅ． Ｓｈｅｎｙａｎｇ ｌｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ， Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｅｘｅｒｃｉｓｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ． Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｐｏｒｔ． Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０Ｏ４３８．Ｃｈｉｎａ Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ： Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒａｍ ｏｆ Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ Ｂｕｒｅａｕ， ＮＯ ２００５４１０ Ｒｅｃｅｉｖｅｄ：２００７．０５－１５ Ａｃｃｅｐｔｅｄ：２００７—０６－２１ ’上海体育学院运动 科学学院，上海市 ２０Ｏ４３８； 沈阳体育 学院运动人体科学 系．辽宁省沈阳市 １１０１０２ 张海平☆，男．１９６４ 年生．山西省太原市 人，汉族，上海体育 学院在读博士，沈阳 体育学院运动人体 科学系副教授．主要 从事运动解剖学研 究＝ ｚｈｐｉｎｇ２０００＠１２６ ｅｃｍ 辽宁省教育厅高校 科学研究项目（计划 编号２００５４１０） 中图分类号：Ｒ５４１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３－８２２５ ｆ２００７）４５－０９０５１－０５ 收稿日期：２００７－０５－１５ 修回日期：２００７—０昏２１ （０７－５０－－５２８１４／Ｍ、Ｙ） ９０５１ 维普资讯 http://www.cqvip.com ＩＳＳＮ １６７３．８２２５ ＣＮ ２１．１５３９／Ｒ 张海平，等动脉粥样硬化模型大鼠接受有氧运动后的组织学变化 ｚｇｌｃｋｆｃｏｍ ｋｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ，ｃｏｍ 课题背景：近年 来，运动医学界许 多学者进行了有 氧运动对动脉粥 样硬化脂代谢组 织形态学改变及 产生机制等方面 影响的研究，并寻 求一种与人类发 病过程及病理特 征相似的动物模 影响，为有氧运动在控制动脉粥样硬化的发生 血后，用输液器针头从心尖部插入左心室，快 方面提供理论依据和实验基础。 １材料和方法 速滴注肝素化的生理盐水（５００ ｍＬ生理盐水 注入肝素２ ｍＬ），迅速剪断后腔静脉，调整角 度，胶布固定灌注针头。待流出的液体成为清 凉无色液体后，换４％多聚甲醛灌注，大鼠四肢 肌肉完全僵硬后再维持灌注多聚甲醛，整个灌 主动脉至骼动脉分支，全程分离主动脉，取出 设计：随机对照动物实验。 体育学院运动人体科学系。 型，可为有氧运动 控制动脉粥样硬 化的发生方面提 供理论依据和实 验基础 单位：上海体育学院运动科学学院，沈阳 注时间约需３０ ｍｉｎ。在体视觉显微镜下，自升 材料：实验于２００６—０６／１０在沈阳体育学 置４％多聚甲醛中固定，常规脱水、透明、浸蜡， 院实验中心重点实验室和辽宁中医药大学生 石蜡包埋，用于病理切片制作。 理实验室完成。雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠１ＯＯ只，８周 主要观察指标：主动脉内膜、中膜、外膜的 龄，体质量２００ ｇ左右，由中国医科大学实验 分界、管腔面内皮细胞的覆盖及细胞的完整、 动物研究中心提供（合格证号：ＳＣＸＫ（辽） 中膜平滑肌细胞、弹力纤维的分界与排列、粥 ２００５－００１２）。常规分笼饲养，自然光照，定时通 样斑块期病灶、纤维组织增生伴片状或点状钙 风，环境清洁，温室１９￣２３℃，相对湿度为 化、炎性细胞浸润等情况。 ７Ｏ％～８Ｏ％，自由进食标准饲料由中国医科大 学实验动物研究中心提供。 ２ 结果 胆固醇（分析纯）购于上海新兴化学试剂公 司，胆酸纳购于德国Ｓｅｒｖａ公司，丙基硫氧嘧 ２．１ 实验动物数量分析 参加实验的大鼠 啶为上海复兴制药有限公司原料药（质量标准 １ＯＯ只，实验过程有１７只大鼠死亡，其中 符合Ｃ．Ｐ．２０００版药典），维生素Ｄ３注射液购 高脂组死亡２只，运动１ ｈ、１．５ ｈ、２ ｈ组各死 于上海第九制药厂。 亡７只、３只、５只，正常对照组无死亡。死亡原 设计、实施、评估者：设计、资料收集和评 因主要是个别大鼠对游泳训练不适所致，但不 估为所有作者，均经过培训。 影响各组的样本数及分析结果，实际用于结果 方法：所有动物适应性饲养１周后，随机 分析的共８３只。 分成５组：正常对照组，高脂组，运动１ ｈ组， ２＿２ 各组动物主动脉经苏木精一伊红染色在 运动１．５ ｈ组，运动２ ｈ组，每组２Ｏ只。 显微镜下观察结果 正常对照组内膜、中膜、 正常对照组喂基础饲料。高脂组，运动１ ｈ 外膜分界清晰，管腔面由单层内皮细胞覆盖， 组，运动１、５ ｈ组，运动２ ｈ组大鼠先按维生素 细胞完整；中膜平滑肌细胞、弹力纤维分界清 Ｄｓ ７Ｏ万ＩＵ／ｋｇ的总剂量进行灌喂，分３ ｄ完 晰，排列规整（见图１，２）。 成，之后饲喂高脂饲料１５ ｇ／ｄ，共８周。高脂饲 料配方【 ：２％胆固醇，Ｏ．５％胆酸纳，３％猪油， Ｏ．２％丙基硫氧嘧啶和９４．３％的基础饲料。 运动方案：运动１ ｈ组，运动１．５ ｈ组，运 动２ ｈ组大鼠采用无负重游泳，从实验日起进 行５ ｄ游泳训练，周六、日休息，每次运动时间 从最初的１０ ｍｉｎ／ｄ，每天递增１０ ｍｉｎ，直至 １ ｈ，１．５ ｈ，２ ｈ，共训练８周。游泳器具为３个 １００ ｃｍｘ６０ ｃｍｘ７０ ｃｍ的玻璃鱼缸，水温 图１ 正常对照组内膜、中膜、外膜分界清晰，管腔面由单 层内皮细胞覆盖，细胞完整；中膜平滑肌细胞、弹力纤维分 一 一 界清晰，排列规整（苏木精一伊红染色，ｘｌＯ０） （３０＿＋２）℃，水深５０ ｃｍ，每只大鼠游泳面积＞ ３００ ｃｍ ，在大鼠游泳过程中用木棒驱赶不游 泳大鼠，以防漂浮水面。 主动脉石蜡切片标本制作：每组随机取６ 只大鼠，按４０ ｍｇ／ｋｇ体质量的用量，用１ ｍＬ 注射器取Ｏ．４％戊巴比妥钠Ｏ．３ ｍＬ腹腔麻醉 后，仰卧固定于手术台，开胸暴露心脏，心脏取 ９０５２ 图２正常对照组内膜完整，管腔面由单层内皮细胞覆 盖．中膜主要见梭型平滑肌细胞，弹力板清晰，排列规整 （苏木精一伊红染色，ｘ４００） Ｐ Ｏ．Ｂｏｘ １２００．Ｓｈｅｎｙａｎｇ １ １０００４ ｋｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ ｗｗｗ．ｚｇｌｃｋｆ ｃｏｍ 维普资讯 http://www.cqvip.com 维普资讯 http://www.cqvip.com ＩＳＳＮ １６７３．８２２５ ＣＮ ２１．１５３９／Ｒ 张海平，等．动脉粥样硬化模型大鼠接受有氧运动后的组织学变化 ｗｗｗｚｇｌｃｋｆｃｏｍ ｋｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ，ｃｏｒｎ 中等负荷时表现为间歇性跳跃跑，当运动强度增加至 图１１ 运动２ ｈ组动脉壁厚薄不均，中膜平滑肌细胞增生明显且排 列紊乱，部分弹力板纤维破坏（苏木精一伊红染色，ｘ１００） 一 大强度时才出现持续奔跑，并造成血乳酸堆积，不能形 成有氧运动。谷食性动物鸡可产生自发性动脉粥样硬 化，但主要形成脂质条纹，且它的局部解剖学与人不 同，加之购买和饲养费用的昂贵，也难以作为模型使 用。鼠类虽具有抗动脉粥样硬化特性，但是由于应用的 广泛性，易获得，易饲养，价钱低廉，抵抗力强，体积小， 易于实验操作，生理解剖与人类相似【６】，所以经常被应 用于运动与动脉粥样硬化的实验中。本实验考虑到有 氧运动的可控性、动物饲养的难易、实验操作的简易程 度、动脉粥样硬化模型建立的可行性等，采用大鼠造 模。 ３．１ 大鼠动脉粥样硬化模型的建立 动脉粥样硬化 模型是否成功建立主要依据动脉组织的形态学观察。 动脉粥样硬化病灶形成是一个连续的过程，包括脂质 以上结果提示经过高脂膳食喂养后，高脂组大鼠 条纹，纤维斑块，粥样斑块，有并发病变的病灶［７－１１】。苏 主动脉可见明显脂纹（动脉粥样硬化Ｉ期）、纤维斑块 丹染色能显示脂质的存在与否，但不能很好反映病变 （动脉粥样硬化Ⅱ期）、典型的成熟粥样斑块（动脉粥 程度，观察范围也很小。而本实验能较全面地了解病变 样硬化Ⅲ期）以及复合病变（动脉粥样硬化Ⅳ期），表明 的范围，分布特点和病变程度，实验结果显示：高脂组 已经形成了成熟的动脉粥样硬化大鼠模型。经过８周 大鼠苏木精一伊红染色发现主动脉可见明显脂纹（动脉 有氧运动后运动１ ｈ组、运动１．５ ｈ组、运动２ ｈ组组 粥样硬化Ｉ期）、纤维斑块（动脉粥样硬化Ⅱ期）、典型 织切片比较发现，运动１．５ ｈ组主动脉大动脉管壁层次 的成熟粥样斑块（动脉粥样硬化Ⅲ期）以及复合病变 清楚，内膜细胞完整，中膜平滑肌细胞、弹力板排列规 （动脉粥样硬化Ⅳ期），表明已经形成了成熟的动脉粥 整，而运动１ ｈ组、运动２ ｈ组部分管壁出现薄厚不 样硬化大鼠模型【住】。 均，平滑肌紊乱，弹力板断裂。上述３组均未见动脉粥 样硬化Ｉ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期病灶。 ３讨论 有实验证明大鼠喂食胆固醇可引起高脂血症，损 伤血管内皮。单纯高脂饲料却并没有形成典型动脉粥 样硬化病变，可能与大鼠本身内在的抗动脉粥样硬化 因素有关。据报道，不同种的动物主动脉胆固醇脂酶活 性不同，大鼠＞豚鼠＞狗＞兔＞猪，这个顺序显然与 研究动脉粥样硬化时可以选择造模动物很多【２＿引， 抗动脉粥样硬化的种属特异性颇为一致【１ 。由于大鼠 而在研究运动对动脉粥样硬化影响的动物实验中，既 无胆囊，对胆固醇等脂质吸收少，单纯的高脂饲料很难 要考虑建立动脉粥样硬化模型的动物品系，又要考虑 诱导大鼠动脉粥样硬化的形成。吴开云等【’０］采用大剂 选择的动物是否适合建立有氧运动模型，还要考虑动 量维生素Ｄ一次性腹腔注射后，建立了一种快速诱导 物的运动学指标，代谢指标（如安静，运动时心率，血 大鼠主动脉动脉粥样硬化病变的方法。但由于一次性 压，每搏输出量）的变化和人体是否拟合。 注射，难以形成冠状动脉等器官进一步动脉粥样硬化 自发产生粥样斑块的动物如猴、猪被认为是研究 病变，其胸主动脉平滑肌细胞增殖以及泡沫细胞浸润， 运动时脂代谢、心血管疾病的良好模型。猴与猪的系统 但还不是成熟的动脉粥样硬化斑块，这也了该模 发育和饮食结构类似与人，可产生自发性的动脉粥样 型的广泛应用。本研究采用口服维生素Ｄ。与高脂饲料 硬化，似乎是研究动脉粥样硬化的理想实验动物，但价 诱导相结合的方法，成功建立了动脉粥样硬化大鼠的 格和饲养了它的广泛使用，其在心肌梗死、心肌缺 模型，并导致冠状动脉等器官性血管病变，为动脉粥样 血尤其是在心外科模型中应用较多。草食性动物家兔 硬化导致的器官性病变研究提供了可靠的病理模型。 不易自发性产生动脉粥样硬化，但它对高脂饮食特别 为保证模型的成功建立，本实验在大鼠高脂饲料 敏感，故有人将它作为动脉粥样硬化模型【５］，但它产生 配方中，增加了胆酸钠和丙基硫氧嘧啶。饲料中添加了 的损害更类似黄瘤病，而不象人的动脉粥样硬化。另 胆酸纳，其能显著增加大鼠小肠对胆固醇的吸收量，同 外，家兔运动行为特殊，并不能作为有氧运动的运动方 时添加丙基硫氧嘧啶抑制甲状腺功能，减少对胆固醇 式被采用。资料表明：家兔在跑台实验中当运动强度为 的代谢，保证了血清胆固醇的含量的升高。高糖饮食是 ９０５４ Ｐ ０ Ｂｏｘ １２００．Ｓｈｅｎｙａｎｇ １ １０００４￣２３３８５０８３一＠ｓｉｎａ ｃｏｒｎ ｗｗｗ ｚｇｌｃｋｆ．６０ｍ 维普资讯 http://www.cqvip.com ＩＳＳＮ １６７３．８２２５ ＣＮ ２１．１５３９／Ｒ ｗｗ￣ｚｇ／ｃｋＬｃｏｍ ｋｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ 张海平，等动脉粥样硬化模型大鼠接受有氧运动后的组织学变化 另一个动脉粥样硬化的诱导因素，本实验在饲料中添 本实验组织形态学观察发现，动脉粥样硬化组主 加少量糖分，不仅能促进血糖的升高，同时由于糖分的 动脉可见典型的成熟动脉粥样硬化斑块。动脉内膜细 黏合作用，使得高脂饲料易于压制成颗粒，便于大鼠的 胞完全脱落，内膜被粥样硬化斑块、纤维帽覆盖的纤维 食用。先前已有报道，维生素Ｄ。能显著促进动脉粥样 斑块、大量泡沫细胞形成的黏液性病变所代替，中膜平 硬化的发生。有学者认为维生素Ｄ。能损伤血管内皮， 滑肌细胞紊乱，弹力板完全短裂，有的动脉壁中膜已完 血钙浓度快速出现显著升高，破坏动脉管壁内皮的完 全破损、破溃，有的动脉壁深层可见片状或团状胆固醇 整性，在及时给予高脂饲料后，能升高大鼠血液中的脂 结晶体。运动１．５ ｈ组主动脉大动脉管壁层次清楚，内 质含量，使动脉粥样硬化大鼠血浆胆固醇和低密度脂 膜细胞完整，中膜平滑肌细胞、弹力板排列规整，光镜 蛋白胆固醇增高，高密度脂蛋白胆固醇降低，最终使得 下显示与正常对照组无明显差异。而运动１ ｈ、运动２ ｈ 脂质易于沉积于血管壁，加速动脉粥样硬化的形成。有 组只有少部分管壁出现薄厚不均，平滑肌紊乱，弹力板 关维生素Ｄ。诱发动脉粥样硬化的机制目前仍有争议， 断裂，但上述３组均未见动脉粥样硬化Ｉ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期 有学者认为维生素Ｄ。诱发动脉粥样硬化是由于它能 病灶。因此，可以看出有氧运动，尤其是中等强度有氧 使血浆胆固醇升高，也有人报道是与维生素Ｄ导致的 运动能有效预防和抑制动脉粥样硬化的发生、发展，而 血钙升高有关。可能的机制是维生素Ｄ。可以导致血钙 且有氧运动对动脉粥样硬化影响与脂代谢有关，通过 升高，破坏动脉管壁内皮的完整性，有利于血浆脂质对 调整脂代谢能有效预防和阻碍动脉粥样硬化的发生、 管壁侵入和损伤，从而形成动脉粥样硬化㈣；维生素 发展 ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ Ｄ。导致血钙升高，可促使钙盐在主动脉中膜沉积，使平 滑肌细胞变性或钙化【１４】。Ｋｒａｍｓｃｈ等【１５】发现在动脉粥 ４参考文献 样硬化形成过程中，平滑肌细胞的迁移和增殖，以及分 泌细胞外基质都需要钙离子作为第二信使，Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ Ｊｏｈｎｓｏｎ ＳＥ， Ａｌｉｅｎ ＲＥ Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｋｅｌｅｔａｌ ｍｕｓｃｌｅ ｓａｔｅＩｌｉｔｅ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ Ｅｘｐ Ｃｅｌｌ ＩＲｅｓ １ ９９５；２１ ９（２）： 等【１ ６】发现动脉粥样硬化动物模型中，钙离子拮抗剂可 ４４９－４５３ 抑制动脉粥样硬化病变的进展，也都从侧面说明了钙 郭延松，杨军珂．吴宗贵．鼠动脉粥样硬化模型的建立【Ｊ］中国动脉硬化杂志． ２００３，１１（１）：８４—８６ 离子在动脉粥样硬化形成过程中的重要性。本实验中 胡琴，张运，基因工程小鼠动脉粥样硬化模型的研究进展［Ｊ］中国动脉硬化杂 志，２００６，１４（８）：７２５－７２７ 动脉粥样硬化组织形态学检查发现可见血管内皮细胞 郭延松，吴宗贵．杨军柯，等．三种大鼠动脉粥样硬化模型复制方法的比较［Ｊ］． 中国动脉硬化杂志，２００３，１１（５）：４６５－４６９ 脱落，内膜不完整，管壁内弹力板断裂，可见增生的片 张磊，陈国荣．郑荣远，等，高脂饲料加空气干燥术建立兔颈动脉粥样硬化模 状钙化点，充分证实了上述理论。因此，本实验１３服维 型【Ｊ］中国动脉硬化杂志，２００１，９（２）：１５５－１５８ 杨小毅，万载阳，谭健苗，等．一种纯系小鼠动脉粥样硬化模型的建立【Ｊ］．中国 生素Ｄ。与高脂饲料相结合喂养大鼠的组织形态学观 动脉硬化杂志，１９９５，３（２）：１８２ 马骁，黎莉，张薇，等．实验性高胆固醇血症与家兔腹主动脉粥样硬化的关系 察结果表明该模型的成功建立，同时说明了在较短时 研究【Ｊ］．中国心血管杂志，２００２，７（５）：３１１＿３１２，３１４ 李瑞，刘善云．陈家琦．运动对高胆固醇饮食小鼠主动脉脂质沉积影响的透 间内建立较成熟的动脉粥样硬化斑块模型是可行的。 射电镜察【Ｊ］．天津体育学院学报，２００２，１７（３）：８—１０ ３．２有氧运动对大鼠粥样硬化性动脉组织结构的影 陈近利，陈吉棣．有氧运动和膳食脂肪对ＡｐｏＥ基因缺陷小鼠动脉粥样硬化 斑块形成的影响［Ｊ］，中国运动医学杂志，２００１，２０（１）：５＿１５ 响 大量实验证实，规则的、周期性的、中小运动强度 吴开云，高摄渊，袁融，等维生索Ｄ诱发大鼠动脉粥样硬化的实验研究【Ｊ］． 解剖学报，１９９６，２７（２）：１３３－１３５ 的有氧运动有益于健康【１７ 。在动物实验中，动物运动 杨天仑．动脉粥样硬化的分子病理学改变【Ｊ］．国外医学：生理、病理科学与医 量和运动强度的把握成为能否得到合理的实验结果的 学分册，１９９１，（３）：１６０－１６２ 袁凌燕，陆爱云，张胜年，等．有氧运动影响动脉粥样硬化的动物模型实验研 制约因素。有证据表现：运动对心血管疾病的有益效应 究［Ｊ］．上海体育学院学报，２００６，３０（４）：４５－４９ Ｇｒｏｅｎｅｒ ＪＥ，Ｂａｘ Ｗ，Ｓｔｕａｎｉ Ｃ，ｅｔ ａ１．Ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ ｉｎ ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ｓｐｅｃｉｉｆｃｉｔｙ 源于运动对动物的血液动力学作用，大鼠安静心率比 ｂｅｔｗｅｅｎ ｈｕｍａｎ ａｎｄ ｍｏｕｓｅ ｌｙｓｏｓｏｍａｌ ａｃｉｄ ｌｉｐａｓｅ：ｌｏｗ ａｆｆｉｎｉｔｙ ｆｏｒ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｙｌ ｅｓｔｅｒ ｉｎ ｍｏｕｓｅ ｌｙｓｏｓｏｍａｌ ａｃｉｄ ｌｉｐａｓｅ．Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ 大型动物高很多，大鼠的高心率和小的动脉压对动脉 ２０００；１４８７（２—３）：１５５－１６２ Ｂｅｎｎａｎｉ—Ｋａｂｃｈｉ Ｎ， Ｋｅｈｅｌ Ｌ， Ｅｌ Ｂｏｕａｙａｄｉ Ｆ， ｅｔ ａ１．Ｎｅｗ ｍｏｄｅｌ ｏｆ 壁产生明显不同于其他类型动物的压力以及血管切应 ａｔｈｅｒＯｓｃｌｅｒＯｓｉｓ ｉｎ ｉｎｓｕｌｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｓａｎｄ ｒａｔｓ：ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ 力【２０】。本实验分别采用１，１．５，２ ｈ的渐进性有氧训练方 ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ Ｄ２ ｖｉｔａｍｉｎ Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ２０００；１ ５０（１）：５５．６１ Ｋｒａｍｓｃｈ ＤＭ．Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ／ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ：ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ 案，不仅符合训练的一般原则，而且从大鼠的生长状态 ｖｅｓｓｅｌ ｗａｌｌ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ．Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ １９９５；１ １８ Ｓｕｐｐｌ：Ｓ２９－Ｓ３６ Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ ＤＢ，Ｈｅｉｄｅｒ ＪＧ Ａｎｔｉａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｃａｌｃｉｕｍ 看，采用的靶强度（自由游泳）和训练时间（１，１．５，２ ｈ）， ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ．Ａｍ Ｊ Ｃａｒｄｉｏｌ １ ９８７；５９（３）：１ ６３Ｂ－１ ７２Ｂ 大鼠易耐受，精神状态良好、活跃，体积、体质量稳步增 柏建清，张云丽，李海军．有氧运动和饮食对脂蛋白代谢及动脉粥样硬化的 影响［Ｊ］．辽宁体育科技，２００３ ２５（１）：２６－２８ 长，饮食量所有组别均无统计学差异。均说明上述３组 侯立军，丁怡，岳军弟，等．运动和抗脂新对动脉粥样硬化的治疗作用［Ｊ］，现代 康复，２００１，５（１７）：１ １０ 运动量适中，大鼠可以耐受。但是，哪种负荷的运动强 胡江亭 张蕴琨．有氧运动对高脂饮食大鼠动脉粥样硬化形成的影响——血 清ｈｓ．ＣＲＰ和脂代谢的变化［Ｊ］．中国运动医学杂志，２００６，２５（５）：５３０—５３３ 度对心血管疾病有益还需要其他检测指标来证明。而 唐植辉，汪南平，钱煦血流剪切力在动脉粥样硬化形成中的作用书【Ｊ］．生理 实验中运动组体质量低于安静对照组，可能是采用的 科学进展，２００７，３８（１）：３７－４１ 运动量增加了能量消耗，减少能量堆积的结果。 沈阳１２００邮政信箱１１０００４ ｋｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ ｃｏｍ ｗｗｗ．ｚｇｌｃｋｆ．ｃｏｍ ９０５５ ¨
