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Trizol试剂提取RNA

来源:华拓网
Trizol试剂提取RNA

用Invitrogen公司的Trizol试剂提取水稻组织的RNA。 1、

取各实验材料在液氮中研磨成粉末,取大约100mg组织粉

末到液氮预冷的1.5ml离心管中,加入1ml Trizol试剂,在涡旋器上充分震荡。加入200ul 氯仿,涡旋器上充分震荡。 2、 3、

12000rpm,4℃,离心15min.

小心吸取上清液大约600ul到另一个无RNase的1.5ml离

心管,加入500ul异丙醇,混匀,室温放置10min,12000rpm,4℃,离心10min. 4、 5、

弃去上清液,保留沉淀,用75%的乙醇清洗1次。 倒除乙醇,晾至无乙醇味时,加入适量无RNase的水溶解。

30-50ul

1.2%琼脂糖凝胶电泳(0.5×TBE)检测完整性。

用的是promega的DNase,可以查说明书。 RNA: 24ul,

DNase RQ1: 3ul(3U), DNase RQ1 buffer(10x): 3ul 37度,反应15-30min; 加入3ul终止buffer.

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