猪高尔基蛋白73,GP-73,ELISA酶免试剂盒说明书
The pig golgi protein 73, GP - 73, ELISA enzyme kit instructions
猪高尔基蛋白73,GP-73,ELISA酶免试剂盒说明书
用说明书
本试剂盒仅供研究使用
检测范围:0.156 IU/ml - 10 IU/ml 最低检测限:0.039 IU/ml
特异性:本试剂盒可同时检测自然或重组的人GP-73,且与其他相关蛋白无交叉反应。 有效期:6个月
预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中GP-73含量。 说明
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。 2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。 3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。 实验原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗GP-73抗体的微孔中依次加进标本或标准品、生物素化的抗GP-73抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终极的黄色。颜色的深浅和样品中的GP-73呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。 2. 标准品(Standard):1瓶(冻干品)。 3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 辣根过氧化物酶标记抗体稀释液(HRP-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 5. 辣根过氧化物酶标记抗体(HRP-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 6. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
7. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 8. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
猪高尔基蛋白73说明:
1. 在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
2. 小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且,洗涤不充分将影响试验结果。 3. 试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,具体以标签上的标示为准。
4. 浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
5. 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。 6. 中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。 83. 所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
猪高尔基蛋白73原理及自备设备:
ELISA技术原理是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本与固相载体表面
的抗原或抗体起反应。
自备设备有,蒸馏水,加样器,振荡器及磁力搅拌器,酶标仪,量筒,烧杯,吸水纸,坐标纸,温育箱,洗瓶,一次性试剂管,微移液及其吸嘴等。
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