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TSK-GEL色谱柱选择指南

来源:华拓网


TSK-GEL SW型与PW型选择时要注意的主要有:样品水溶性、PH范围、样品的分子量范围等。

TSK-GEL SW型

填料以球性硅胶为基质,在其表面键合亲水化合物而成,使用pH值范围是2.5-7.5,可使用与水完全互溶的乙腈、甲醇、乙醇或丙酮等有机溶剂作流动相。适合于分析分离蛋白质和多肽类样品。

TSK-GEL SW型色谱柱选择指南

未知分子量的样品:

*TSK-GEL G3000SWXL是理想的摸索条件的色谱柱。

*如果感兴趣的蛋白质的锡砣接近排阻体积,下一步应该尝试G4000SWXL。相反,如果感兴趣的蛋白质接近色谱末端,尝试使用G2000SWXL。

蛋白质(一般情况):

*通过校正曲线或者评估蛋白质的分子量选择恰当的孔尺寸,继而可以选择出TSK-GEL SWXL系列色谱柱中的一款使用。

多肽:

*TSK-GEL G2000SWXL是多肽分析的首选。

*样品量有限或者低浓度时,可以使用TSK-GEL SuperSW2000。

常用TSK-GEL SW型色谱柱性能和分离范围

填料 G2000SW

部件号

描述

可分析样品的分子量

球蛋白

5,000-100,000

葡萄糖

聚乙二醇

05788 30cm*7.5mm ID,10μ,125A 05102 60cm*7.5mm ID,10μ,125A 057 30cm*7.5mm ID,10μ,250A 05103 60cm*7.5mm ID,10μ,250A 05790 30cm*7.5mm ID,13μ,450A 05104 60cm*7.5mm ID,13μ,450A

1,000-30,000 500-15,000 1,000-30,000 500-15,000 2,000-70,000 1,000-35,000 2,000-70,000 1,000-35,000 4,000-500,000 2,000-250,000

G2000SWxl 080 30cm*7.8mm ID,5μ,125A 5,000-150,000 G3000SW

10,000-500,000

G3000SWxl 05841 30cm*7.8mm ID,5μ,250A 10,000-500,000 G4000SW

20,000-700,000

G4000SWxl 082 30cm*7.8mm ID,8μ,450A 20,000-10,000,000 4,000-500,000 2,000-250,000

TSK-GEL PW型

填料是亲水、刚性、化学和机械性能很好的球型多孔高聚物。使用PH值范围是2-12,可以使用含有50%的混合有机溶剂为流动相。用于分离蛋白质、多肽、多糖、寡糖、DNA、RNA、水溶性的有机聚合物和其他水溶性大分子样品等。

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常用TSK-GEL PW型色谱柱性能和分离范围

填料

部件号

描述

可分析样品的分子量

球蛋白

葡萄糖 ------- -------

聚乙二醇 可达3,000 可达3,000 可达50,000 可达50,000 2,000-300,000 2,000-300,000

G2500PWxl 08020 30cm*7.8mm ID,6μ,<200A <8,000 30cm*7.5mm ID,10μ,<200A

G2500PW 08028 08029 <8,000

60cm*7.5mm ID,10μ,<200A

G3000PWxl 08021 30cm*7.8mm ID,6μ,200A 5,000-800,000 可达60,000 30cm*7.5mm ID,10μ,200A

G3000PW 05762 05106 5,000-800,000 可达60,000

60cm*7.5mm ID,10μ,200A G4000PWxl 08022 30cm*7.8mm ID,13μ,500A 10,000-1,500,000 1,000-700,000 30cm*7.5mm ID,17μ,500A G4000PW 05763 05107 10,000-1,500,000 3,000-700,000

60cm*7.5mm ID,17μ,450A G5000PWxl 08023 30cm*7.8mm ID,10μ,1000A <10,000,000 30cm*7.5mm ID,17μ,1000A

G5000PW 057 05108 <10,000,000

60cm*7.5mm ID,17μ,1000A G6000PWxl 08024 30cm*7.8mm ID,13μ,>1000A< 200,000,000 30cm*7.5mm ID,13μ,>1000A G6000PW 05765 05109 <200,000,000

60cm*7.5mm ID,13μ,>1000A

50,000-7,000,000 4,000-1,000,000 50,000-7,000,000 4,000-1,000,000 500,000-50,000,000 40,000-8,000,000 50,000-50,000,000 40,000-8,000,000

TSK-GEL色谱柱使用指导

以TSK-GEL SW(XL)为例:

TSK-GEL SW(XL)色谱柱应用在水相的GFC(凝胶过滤色谱),样品包括蛋白质、酶、核酸等多种亲水性大分子。

一、安装说明 1、 流向

安装使用时注意色谱柱上标明的流向箭头,安装反了会降低色谱柱柱效。 2、 去处气泡

从仪器上安装和拆卸色谱柱时一定要注意不要让气泡进入,安装时要去除管路中的气泡。 3、 安装

当进样端螺母拧下,有溶剂从接口溢出,可将色谱柱小心的与仪器连接,这样做可以保证没有气泡进入柱子。如果没有党课从接处流出,将柱子反接,用低于0.5ml/min的低流速走柱,赶走气体。确定当脱气的溶剂从色谱柱进样口流出后,按流向箭头所示接柱。 4、 正确使用

柱子安装完成后,进行工作时要注意避免高压力和大流速,同时压力的快速变化也要避免。

二、保存说明 1、 日常使用

如果柱子每天都使用,不需要将它从仪器上取下,流动相可在柱子中保留过夜。 2、 短期保存

将色谱柱从仪器上取下,封紧保护螺帽。保存4-30温度度,不得低于4度。

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3、 长期保存

用水深液或含0.05%的叠氮化钠缓冲液保存。保存温度4-30度,不得低于4度。不能受阳光直射。

三、溶剂 1、替换溶剂

色谱柱中原厂保存的溶剂是0.1M的磷酸缓冲液含0.05%的叠氮化钠和0.1M的硫酸钠。若流动相要改变,可用低于0.5ml/min的流速走柱。若要用有机溶剂替换,先用蒸馏水过渡,再用有机溶剂走柱,注意浓度梯度,有机溶剂浓度的快速变化会使柱效降低。 2、PH范围

SW型的溶剂PH范围在2.5-7.5。 3、溶剂范围

SW系列所用的溶剂除了水溶液和缓冲液,还可以使用亲水性的有机溶剂,包括甲醇,乙腈以及它们的水溶液。

四、流速 推荐流速

SW色谱柱的推荐流速在0.5-1.0ml/min,最大流速是1.2 ml/min,柱子流速不能超过最大流速。

北京吉瑞森科技有限责任公司 技术部整理

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