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一种重组磷脂酶D的生产方法

来源：华拓网

（19）中华人民共和国国家知识产权局

（12）发明专利申请

（21）申请号 CN2012105253.8 （22）申请日 2012.12.17

（71）申请人宁夏乙征生物工程有限公司

地址 755000 宁夏回族自治区中卫市沙坡头区中卫工业园区

（10）申请公布号 CN103013947A

（43）申请公布日 2013.04.03

（72）发明人陈龙;王双平;成小飞（74）专利代理机构宁夏专利服务中心

代理人赵明辉

（51）Int.CI

权利要求说明书说明书幅图

（）发明名称

一种重组磷脂酶D的生产方法

（57）摘要

本发明涉及利用基因工程菌发酵生产磷脂

酶D的方法，尤其是一种重组磷脂酶D的生产方法。其特点是，包括如下步骤：（1）构建重组基因工程菌；（2）配制摇瓶种子培养基和发酵培养基；（3）将构建的重组基因工程菌在平板上活化16~20小时，再接种至装有摇瓶种子培养基的摇瓶中，得到种子液；（4）接入发酵培养基中进行发酵；添加诱导剂至其在发酵液中的终体积浓度为1%~5%；继续发酵32~48小时；（5）从发酵液

的培养物中获得磷脂酶D即可。本发明的生产方法与现有技术相比具有以下有益效果：采用慢速利用碳源糊精作为碳源，一方面增加了细胞的培养密度，实现了高密度发酵，另一方面减缓了PLD的表达速度减少了包涵体的生成。

法律状态

法律状态公告日

2013-04-03 2013-04-03 2013-04-03 2013-04-03 2013-04-03 2013-04-03 2013-04-03 2013-05-01 2013-05-01 2013-05-01 2013-05-01 2013-05-01 2013-05-01 2013-05-01 2014-12-17 2014-12-17 2014-12-17 2014-12-17 2014-12-17 2014-12-17 2014-12-17 2017-01-04 2017-01-04 2017-01-04 2017-01-04 2017-01-04

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权利要求说明书

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说明书

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