化学工程师 Chemical Engineer 2008年l0月 文章编号:1002—1124(2008)1O一0021—03 分 析 测 博落回提取物中血根碱和白屈菜 试 红碱的含量测定 欧阳文,满意 (长沙环境保护职业技术学院环境监测系。湖南长沙410004) 摘要:博落回是一种常用药用植物,有解毒、消肿、杀虫、抗肿瘤等作用,有很高的开发价值,其活性 成份的提取、纯化是医药、化工行业的研究热点之一,本文采用高效液相色谱法测定了某公司博落回提取 物中主要有效成分血根碱和白屈菜红碱的含量,平均回收率分别为104.0%和97.2%,相对标准偏差分别 为0.53%、1.09%,满足博落回提取物中主要有效成分的测定,方法简便、快速、准确。 关键词:博落回提取物;高效液相色谱法;血根碱;白屈菜红碱 中图分类号:0657.7 文献标识码:A Determination of sanguinarine and chelerythrine in Macleaya crocarpa extracts by HPLC OU Yang—wen,MAN Yi (Department of Environmental Monitoring,Changsha Environment Protection Technology Vocational College,Changsha 410004,China) Abstract:Macleaya crocarpa is a kind of medicinal plant that has very high exploitation value.Extracting and purifying the effective ingredients from Macleaya crocarpa is becoming a research heat in medical treatment and chemical engineering.We determined the contents of sanguinarine and chelerythrine in Macleaya extracts by HPLC,the average recoveries of sanguinarine and chelerythrine were 104.0%,97.2%,the relative standard deviation were 0.53%.1.09%respectively.The method is simple.rapid and accurate. Key words:Macleaya cordata extract;HPLC;sanguinarine;ehelerythrine 博落回系罂粟科博落回属多年生植物,博落回 中的生物碱具有驱虫、抗菌、消肿、止咳、平喘、镇 1 实验部分 痛、抗肿瘤等功效¨I6 J。近代药理研究表明,博落回 主要有效成分为血根碱(sanguinarine)和白屈菜红 1.1仪器与试剂 碱(chelerythrine)等 。从博落回中提取、分离出有 大连伊利特高效液相色谱仪;EC2000色谱工作 效生物碱已成为研究热点,博落回提取物国内外已 站;1/10000电子分析天平;超声波发生器。 开发为药品、生物农药、兽药等产品,尤其是作为植 血根碱及白屈菜红碱盐酸盐标准品均购自 物源农药,博落回活性有效成分使用后易降解,对 SIGMA公司;液相色谱用乙腈为(色谱纯);其余试 环境污染小,其成分多元化,作用机理独特,病虫害 剂均为分析纯;水为二次蒸馏水。 对其不产生抗性 ,是一种环保型的化工原料,其 1.2色谱条件 价格比黄金高出一倍,有“植物黄金”之称,市场前 色谱柱:Hyper ODS2 Cl8柱;检测波长270nm; 景巨大。笔者采用高效液相色谱法测定了某公司 流动相:乙腈一0.1%磷酸水溶液(40:60);流速:1. 博落回叶提取物中主要有效成分血根碱和白屈菜 0mL・min~;柱温:室温;进样量:5IxL。 红碱的含量,方法简便、快速、准确,可用于博落回 1.3实验样品的来源 提取物生产的质量控制。 某生物公司博落回叶盐酸提取物。 1.4供试品溶液的制备及分析 准确称取取博落回盐酸盐样品20.0mg于 250mL容量瓶中,加约200mL 0.1%磷酸水溶液超 收稿日期:2008—08—25 声处理30rain,冷却至室温,用0.1%磷酸水溶液稀 作者简介:欧阳文(1968一),女,本科,湖南益阳人,讲师,工程师,从事 释至刻度,摇匀,得供试样品溶液。在上述色谱条 分析化学的教学和科研工作。 件下上机测定,各生物碱分离很好,主要成份血根 欧阳文等:博落回提取物中血根碱和白屈菜红碱的含量测定 2oo8年第1O期 碱和白屈菜红碱的保留时间分别为4.10min和5. 26min。采用色谱峰面积外标法定量。 2结果与讨论 2.1 血根碱和白屈菜红碱混合标准溶液色 谱图 O.0O l_00 2.00 3.00 4.00 5.oo 6.00 7.00 t/rain 1.血根碱2.白屈莱红碱 图1 血根碱和白屈菜红碱混合标准溶液色谱图 2.2线性范围和检出限 准确称取血根碱、白屈菜红碱标准品各25.0mg 于250mL容量瓶中,用0.1%磷酸水溶液定容,配制 成混合标准品储备液。并稀释成0.010、0.020、0. 030、0.040、0.050mg・mL。。系列标准溶液。 将上述系列标准品溶液分别取5 注入高效 液相色谱仪,以峰面积为横坐标,浓度为纵坐标作 图,峰面积与浓度之间呈良好的线性关系,血根碱 的回归方程为:Y=29240X一9.281,相关系数为0. 9995,线性范围为0.07~60 g・mL~,检出限(S/N =3)为:0.020 ̄g・mL~;白屈菜红碱的回归方程 为:Y=37986X一4.5938相关系数为0.9997,线性 范围为0.04—5O g・mL~,检出限(S/N=3)为: 0.014 ̄g・mL~。 2.3样品的测定和回收率试验 按1.4进行供试样品的测定,数据见表l。 表1供试样品的测定 取同一批博落回盐酸提取物样品,精确称取3 份,分别加入适量血根碱、白屈菜红碱标准溶液,按 前述方法进行测定,计算出血根碱、白屈菜红碱平 均回收率,结果见表2。 表2加标回收率实验 2.4测量的精密度 准确称取同一样品6份,按试验方法测定其中 血根碱和白屈菜红碱的含量,血根碱测定的相对标 准偏差为0.53%,白屈菜红碱测定的相对标准偏差 为1.09%。 3 结论 博落回中含有大量的异喹啉衍生物碱,在抗 菌、改善肝脏功能、增强免疫力、抗肿瘤、杀虫等方 面的独特作用已受到高度重视,博落回野生资源丰 富,在我国分布广泛且易于栽培。国内外已利用其 提取物开发出不少商品,博落回提取物也将广泛应 用于医药、兽药、天然抗菌剂与生物农药等方面。 本文建立的反相高效液相色谱法测定博落回提取 物中主要有效成分血根碱和白屈菜红碱的含量的 方法简便、快速、准确,选择性高,可用于博落回提 取物的生产中产品的质量控制。 参考文献 [1]郁建平,赵东亮,孟祥斌.博落回生物碱对八种真菌的抑菌作 用研究[J].贵州大学学报,2oo6,23(2):78—8O. [2]郁建生.博落回制剂对禽霍乱、仔猪白痢的对比治疗试验[J]. 黑龙江畜牧兽医,20o7,(2):91—93. [3]郭小清,唐莉苹.中药博落回的研究进展[J].兽药研发,20o6, (5):11—12. [4] 樊淑莲,焦峰,张同,等.博落回总生物碱对动物移植性肿瘤的 作用研究[J].陕西肿瘤医学,20【x】,8(3):174—9. [5] 庞建新,马仁强,刘兰梅,等.博落回总碱对肝癌细胞的毒性作 用和体内抗肿瘤作用[J].第一军医大学学报,2005,25(3): 325—328. [6]吴茂旺,朱建华.博落回药理研究与应用概况[J].基层中药 杂志,2002,16(3):46—48. [7] 曾建园,张胜,候团章,等.不同生长期博落回果实中血根碱与 自屈菜红碱的含量[J].中药材,1999,22(5):229. [8] 张胜菊,柯治国,南玉生.博落回抽提物对黄守瓜、菜青虫的 田间药效评价_J].华中农业大学学报,2oo3,22(5):450— 451.