硕士论文--胡颓子叶化学成分及药理活性研究

胡颓子叶化学成分及药理活性研究

姓名：付义成申请学位级别：硕士专业：药物化学指导教师：王晓静

20080501

四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四胡颓子叶化学成分及药理活性研究专业：研究生：导师：药物化学付义成王晓静研究员中文摘要胡颓子叶为胡颓子属（ＥｌａｅａｇｎｕｓＬ．）植物胡颓子（ＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓＴｈｕｎｂ．）的干燥叶，据资料记载，胡颓子叶味酸、性平，具有敛肺、平喘、止咳的功能。胡颓子为常绿灌木，长江以南各省均有分布。果熟时味甜可食，根、叶、果实均供药用。现代药理研究表明胡颓子属植物具有降血糖、抗脂质过氧化、抗炎镇痛、促进肌肉松弛、抑制溃疡等多种药理活性。目前国内外对该属植物化学成分研究不是很多，对该种植物的研究更少。本论文对胡颓子叶进行了系统的化学成分研究和生物活性研究，为阐明其有效成分提供依据。从胡颓子叶９５％乙醇提取物中，经溶剂分步萃取，应用硅胶柱层析、碳十八烷基硅胶柱层析等技术，从胡颓子叶中分离纯化得到１８种化学成分，根据其理化性质并运用ＩＲ、ＥＳＩ－ＭＳ、１Ｄ－ＮＭＲ，２Ｄ—ＮＭＲ等波谱方法，参考文献报道的数据，鉴定了其中１６种化合物的结构，分别为正三十一烷（Ｉ），Ｂ．谷甾醇（ＩＩ），羽扇豆醇（ＩＩＩ），豆甾一４－烯．３，６－二酮（Ⅳ），水杨酸（Ｖ），没食子酸（ＶＩ），香草酸（ＶＩＩ），山柰酚（ＶＩＩＩ），山柰酚一３·Ｏ－Ｂ－Ｄ一６—０一（对羟基桂皮酰基）－吡喃葡萄糖苷（Ⅸ），甲基肌醇（Ｘ），胡萝卜苷ⅨＩ），槲皮素（ＸＩＩ），３’．甲氧基槲皮素（ＸＩＩＩ），葛花苷（ｘＩＶ），３７．Ｏ－甲基鞣花酸．４．Ｏ－ａ．Ｌ．鼠李糖苷（ＸＶ），山柰酚一７一Ｏ－１３一Ｄ一吡喃葡萄糖苷（ＸＶＩ）。其中，化合物Ⅳ，Ｖ，ＶＩ，ＶＩＩ，ＶＩＩＩ，ＩＸ，ＸＩ，ＸＩＩ，ＸＩＩＩ，ＸＩＶ，ＸＶ，ＸＶＩ为首次从胡颓子叶中分得，化合物Ｘ＇ＶＩＩ，ＸＶＩＩＩ的结构正在鉴定中。从胡颓子叶中提取挥发油进行ＧＣ－ＭＳ分析，共分离得到４６个峰，鉴定出其中国山东省医学科学院研究生毕业论文幽的３０种纯学成分，占总挥发油成分的８７．１５％。对胡颓子叶提取物进行了祛痰作用的生物活性筛选，结果表明其能够增加气管、支气管粘膜的分泌功能，使痰液粘度下降，易于咳躜，从两舆有祛痰作用。对从胡颓子叶得到的几个主要化合物进行体外肿瘤传代细胞株细胞毒作用的试验观察，结果表襄有凡个化合物有一定的细胞毒作用。关键词：胡颓子叶；化学成分；挥发油；生物活性；细胞毒作晨四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓａｎｄＢｉｏａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｌｅａｖｅｓｏｆＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓＭａｊｏｒＭ．Ｓ．ＣａｎｄｉｄａｔｅＴｕｔｏｒＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙＦｕ，ＹｉｃｈｅｎｇＰｒｏｆｅｓｓｏｒＷａｎｇ，Ｘｉａｏ—ｊｉｎｇＥｎｇｌｉｓｈＡｂｓｔｒａｃｔＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓ，ｗｈｉｃｈｉｓｗｉｄｅｌｙｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄｉｎｓｏｕｔｈｏｆＹａｎｇｔｚｅＲｉｖｅｒ，ｉｓａｖｅｒｙｆａｍｏｕｓＣｈｉｎｅｓｅｆｏｌｋｍｅｄｉｃｉｎｅｕｓｅｄｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｒｅｓｔｒａｉｎｌｕｎｇ，ｒｅｌｉｅｖｉｎｇｃｏｕｇｈ，ｄｒａｗｉｎｇａｓｔｈｍａ，ｅｔｃ．Ｔｈｅｒｉｐｅｆｒｕｉｔｉｓｓｗｅｅｔａｎｄｅｄｉｂｌｅ．Ｔｈｅｒｏｏｔ，ｔｈｅｌｅａｆａｎｄｔｈｅｆｒｕｉｔｃａｎｓｕｐｐｌｙｆｏｒｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｕｒｐｏｓｅｓ．ＴｈｅｍｏｄｅｍｐａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｓｔｕｄｉｅｓｉｎｄｉｃａｔｅｔｈａｔｔｈｅｐｌａｎｔｓｏｆＥｌａｅａｇｎｕｓＬ．ｈａｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｌｏｗｅｒｉｎｇｓｅｒｕｍｌｉｐｉｄ，ｇｌｕｃｏｓｅｔｈｅａｎｄａｎｔｉ—ｌｉｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ，ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙａｎｄａｎａｌｇｅｓｉｃ，ａｓｗｅｌｌａｓｐｒｏｍｏｔｉｎｇｍｕｓｃｌｅｔｏｒｅｌａｘａｎｄｔｈｅｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎｕｌｃｅｒ，ｅｔｃ．ＴｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓａｎｄｔｈｅｉｒｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｉｎｔｈｅｌｅａｖｅｓｏｆＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄ．Ｆｒｏｍｔｈｅ９５％ｅｔｈａｎｏｌｏｆＴＬＣｅｘｔｒａｃｔｏｆｌｅａｖｅｓｏｆＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓ，ｂｙｕｓｉｎｇａｎｄｓｉｌｉｃａｇｅｌｃｏｌｕｍｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｏｆｔｈｅｉｒｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｐｈｙｓｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓａｓａｎｄａｓｐｕｒｉｆｉｅｄ．ＯｎｔｈｅｂａｓｉｓｓｐｅｃｔｒａｄａｔａｏｆｗｅｌｌｔｈｅＩＲ，ＥＳＩ－ＭＳ，ＥＩ－ＭＳ，１Ｄ－ＮＭＲ，２Ｄ－ＮＭＲ，ｅｔｃ，ｃｏｍｐａｒｅｄ埘ｔｈｄａｔａｔｈｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｅｉｇｈｔ－ｒｅｐｏｒｔｅｄｉｎｌｉｔｅｒａｔｕｒｅｓ，ｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｅｅｎｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｌｅａｖｅｓｏｆＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓ．ＳｉｘｔｅｅｎａｌｅｏｆｔｈｅｍｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｗｈｉｃｈＨｅｎｔｒｉａｎｔａｎｅ（Ｉ），１３－ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ（ＩＩ），Ｌｕｐｅｏｌ（ＩＩＩ），ｅｎｅｄｉｏｎｅ（ＩＶ），ｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ（Ｖ），ｇａｌｌｉｃａｃｉｄ（ＶＩ），ｖａｎｉｌｌｉｃａｃｉｄ（ＶＩＩ），ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ（ＶＩＩＩ），ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ…３Ｏ９－０－６－Ｏ－ｐ—ｈｙｄｒｏｘｙｃｉｎｎａｍｏｙｌ）－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ（ＩＸ），ｂｏｍｅｓｉｔ－ｏｌ（Ｘ），ｄａｕｃｏｓｔｅｒｏｌ（ＸＩ），ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ（ＸＩＩ），３＂－０－ｍｅｔｈｙｌｑｕｅｒｃｅｔｉｎＱＸＩＩＩ），ｋａｋｋａｌｉｄｅ（ＸＩＶ），３’－０－ｍｅｔｈｙｌ－ｅｌｌａｇｉｃａｃｉｄ…４Ｏａ—Ｌ—ｒｈａｍｎｉｃｏｓｉｄｅａｖ），ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ一７一Ｏ邛－Ｄ—ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ（ＸＶＩ）．ＣｏｍｐｏｕｎｄｓＩＶ，Ｖ＇ＶＩ，ＶＩＩ，ＶＩＩＩ，ＩＸ，ＸＩ，ＸＩＩ，ＸＩＩＩ，ＸＩＶ，ＸＶ，ＸＶＩａｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｆｉｒｓｔｌｅａｖｅｓｏｆＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓｆｏｒｔｈｅｔｉｍｅ．ＴｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄｓＸＶＩＩａｎｄＸＶＩＩＩａｒｅｂｅｉｎｇｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．－３．函山东省医学科学院研究生毕业论文幽ＴｈｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌｆｒｏｍｔｈｅｌｅａｖｅｓｏｆＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｂｙｔｈｅＧＣ－ＭＳａｎｄ４６ｐｅａｋｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄ．３０ｏｆｔｈｅｍｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｗｈｉｃｈｃｏｕｎｔｆｏｒ８７．１５％ｏｆｔｈｅｔｏｔａｌｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ．ｏｎＴｈｅｅｘｐｅｃｔｏｒａｎｔｉｎｇａｃｔｉｏｎｓｅｌｅｃｔｉｏｎｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｏｆｔｈｅｌｅａｖｅｓｏｆＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｉｔｃｏｕｌｄｉｎｃｒｅａｓｅｓｅｃｒｅｔｉｎｇｏｆｔｈｅｔｒａｃｈｅａａｎｄｂｒｏｎｃｈｕｓ．ＴｈｅｍａｉｎｃｏｍｐｏｕｎｄｓｓｅｐｒａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｌｅａｖｅｓｏｆＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓｈａｖｅｔｈｅｃｙｔｏｔｏｘｉｃａｃｔｉｖｉｔｙｔｏｓｏｍｅｅｘｔｅｎｔｉｎｔｈｅｐａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．ＫＥＹＷＯＲＤＳ：ｌｅａｖｅｓｏｆＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓ；ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ；ｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌ；ｂｉｏａｃｔｉｖｉ锣；ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉ锣．４－四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四符号说明１３Ｃ－ＮＭＲＣａｒｂｏｎｉｃｎｕｃｌｅａｒｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅ１Ｈ－ＮＭＲＨｙｄｒｏｇｅｎｏｕｓｎｕｃｌｅａｒｍａｇｎｅｔｉＣｒｅｓｏｎａｎｃｅＥＳＩ－ＭＳＥ１ｅｃｔｒｏｓｐｒａｙｉｏｎｉｚａｔｉｏｎｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｕｍＩＲＩｎｆｒａｒｅｄａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｓｐｅｃｔｒｕｍＴＬＣＴｈｉｎ—ｌａｙｅｒｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ１１１．Ｐ．Ｍｅｌｔｉｎｇｐｏｉｎｔ－５．核磁共振碳谱核磁共振氢谱电喷雾电离质谱红外光谱薄层层析熔点学位论文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下本人完成的研究成果。文中引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人己用于其他学位申请的论文或成果。学位论文知识产权权属声明本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属山东省医学科学院。山东省医学科学院享有以任何方式发表、复制、公开阅览、借阅以及申请专利等权利。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为山东省医学科学院。论文作者签名：日期：五盒＆年Ｉ＿阜月—华日导师签名：日期：鲤亟：年＿支月名一研究生导师和课题指导小组介绍研究生指导老师：王晓静，研究员，硕士生导师，天然药化室主任。主要从事天然药物的研究与开发，为首或为主承担省科委课题３项，省自然基金和国际合作项目２项，省医科院课题８项；为主研制４种新药，３项获卫生部颁发的新药证书，另１项已报国家药品监督管理局待批；获国家发明专利３项。在《中草药》等专业期刊上发表论文２０余篇。（Ⅲ）人才建设工程。课题指导小组成员：王元书男，１９５２年１２月生，研究员，山东省医学科学院药物研究所所长，硕士生导师，从事药理学研究。丁杏苞女，１９４２年５月生，研究员，享受特贴。从事天然药物化学的研究与开发。２００１年１２月入选山东省医科院首批１２６高层次杜成林男，１９７４年４月生，助理研究员，从事天然药物化学的研究与开发。孙敏耀男，１９６３年６月生，副研究员，从事天然药物化学的研究与开发。函山东省医学科学院研究生毕业论文四嚣鞋舀在创新药物方面，走化学研究的路予是越来越艰难，而从自然界中发掘天然药物却相对容易一些。目前我们使用的很多药物都直接或间接来源于天然产物，天然产物形成了当今食晶、药品、化妆品开发的广泛的物质基础，近年来在抗癌、抗感染、心血管系统和免疫系统药物领域中开发出或正在开发的有重大治疗价值的药晶充分证实了这一点。当今世界不少大型制药企业都将目光集中到天然产物这一领域，即从天然产物中寻找生理活性成分，经广泛的药理筛选和研究开发成新药，可以大大缩短新药开发周期，降低成本，克服了合成上设计的盲目性和毒副作用较大这些缺点。植物药是我国医药学的重要组成部分，在我国数千年的发展过程中，我们的祖先在同疾病的斗争中，积累了宝贵的和极其丰富的用植物药防病治病的经验。我国的药用植物资源是世界上最丰富的国家之一，这些对药物研发相对薄弱的我们来说应该是～笔宝贵的财富。近年来我们国家也在充分利用我们的传统中药这一优势来加快发展天然药物，并取得了很好的成果。胡颓子科植物有两个属，其中胡颓子属在我国有５５种，该属植物生物活性比较多，目前，我国有关胡颓子属植物的文献报道还比较少，而胡颓子属植物的药用价值多数仅停留在中医中药的传统经验阶段，其化学成分分析、药理实验等工作较为薄弱。虽然人们对胡颓子属植物的化学成分和药理等方面的研究取得了一定的进展，但是对该属植物有效成分和药理活性的化学成分和生物活性的具体作用机制还不是很清楚，尤其是化学与药理方面有机结合起来的工作还有待于进一步深入研究。因此，如何充分利髑我国丰富的胡颓子属植物资源，特别是将其开发成有临床应用价值的药物，还有很多工作需要做。本研究拟对胡颓子叶进行一系列下面的研究：胡颓子（ＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓＴｈｕｎｂ．）叶的提取与分离：采用各种色谱分离技术对胡颓子叶乙醇提取物进行系统分离，得到其成分。胡颓子（Ｅ］ａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓＴｈｕｎｂ．）叶有效成分的结构鉴定：对分离得到的化合物，采用ＥＳＩ－ＭＳ、ＲＰ一１８、１Ｄ－ＮＭＲ、２Ｄ－ＮＭＲ等波谱方法对化合物的结构进行鉴定。初步的药理活性筛选，弄清其生物活性的物质基础。国胡颓子叶化学成分及药理活性研究∞第一章胡颓子属植物研究概况胡颓子属（Ｅ］ａｅａｇｎｕｓＬ．）属于胡颓子科（￡ｌａｅａｇｎａｅｅａｅ），全世界约有８０余种，主要分布于亚洲东南地区和亚洲其它地区，欧洲和北美洲也有分布。胡颓子属植物在我囡有５Ｓ种，是胡颓子科中种类最多，分布最广的属，其５５种植物遍布全图各地，尤以长江流域及以南地区更为普遍ｎ１。与同科沙棘属植物相比，胡颓子属植物资源更加丰富，其中有许多黑种具有药食两用价值、观赏价值和环保价值。隧前针对胡颓子属植物资源，国内主要围绕其分类学、生药学和果树资源等方面进行研究，国外则侧重于与其共生的根瘤菌和分子生物学的研究瞄一。。近年来对胡颓子属植物的次生代谢产物的研究在国外有一定进展疆３，丽冒内却少有人问津，尤其是对胡颓予属植物资源，除了少量关于挥发油及微量元素成分的分析研究之外强≯。，化学成分的研究报道是少之更少。在我国民间，入们常用胡颓子属植物作为药物治疗各种疾病，如肝炎、风湿性关节炎、肠炎、脑血栓、毒蛇咬伤等瘸症。为进一步推动我国胡颓子属植物资源的更深层次利用和开发，本文对我国所拥有的胡颓子属植物在药用价值、化学成分和药理活性研究方面作一综述，为今后能更好地综合利用胡颓子属植物资源提供参考。１．１胡颓子属植物的药用价值胡颓子属植物中有许多种为珍贵的药食两用植物，其果实常被加工成食品。常用的包括牛奶子（ＥｕｍｂｅｌｌａｔｅＴｈｕｎｂ）、胡颓子（ＥｐｕｎｇｅｎｓＴｈｕｎｂ．）、角花胡Ｗａｒｂ．ｅｘ颓子（成ｏｎｙａｎｔｈｅｓＢｅｎｃｈ．）、披针叶胡颓子（置ｌａｎｃｅｏｌａｔａ沙枣（ＥａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉａＤｉｅｌｓ），Ｌ．）、宜昌胡颓予（ＥｈｅｎｒｙｉＷａｒｂ．ｅｘＤｉｅｓ）、星龟羊奶ｆｌｏｒａ）、长子但ｓｔｅｌｌｉｌａＲｅｈｄ．）、木半夏（Ｅ叶胡颓子（ＥｂｏｏｋｉｉｍｕｌｔｌｆｌｏｒａＴｈｕｎｂ．ｖａｒ．ｍｕｌｔｌＤｉｅｌｓ）和蔓胡颓子（Ｅ班ａｂｒａＴｈｕｎｂ）等。目前，该属植物中有些种类已被生产成药品，如杭州中药厂生产的治喘片主要以胡颓子叶为原料，其药用成分主要有：单宁、生物碱、黄酮菅、有机酸、香豆精、三萜及甾醇类化合物等。以胡颓子叶提取物制成的注射液用喷雾法直接作用于慢性喘息性气管炎患者的支气管粘膜，平喘有效率为９２．１％；穴注法有效率为８１．８％。还有报道国外从我国的胡颓子属植物中成功地提取了对平滑肌有调节作用的５一羟色胺，并将其用于治疗风湿性疾病锄。四山东省医学科学院研究生毕业论文四蔓胡颓子：根可清热、利湿、消肿止血，主要治传染性肝炎、小儿疮积、痢疾、风湿痹痛、咯血、便血、崩漏、跌打损伤：叶可平喘止咳，治支气管炎、咳嗽、哮喘及肝炎：果主治肠炎、痢疾、食欲不振。牛奶子：果能清热利湿、止血、治咳嗽、泄泻、痢疾、‘淋病：叶能治疗疮。宜昌胡颓子：果实、叶、根均可入药，可治痢疾、肺虚气短、吐血、疥疮、脑血栓。木半夏：果主治哮喘、痢疾、跌打损伤、痔疮等：根皮煎汁可治疥疮，并有活血、行气补虚损之效：叶可治肝炎及咳嗽。胡颓子：果实治痢疾、消渴、喘咳、病气、血崩、骨髓炎等：叶可治肺虚、气喘、咯血、痈肿、外伤出血：根有止咳、止血、利湿、消积滞作用。长叶胡颓子：根、枝、叶均可入药，治牙疼、哮喘、止咳化痰、顺气、治痔疮。角花胡颓子：果可治肠炎、腹泻：全株治痢疾、跌打、癖积：叶可治肺病、支气管哮喘、感冒咳嗽等。星毛羊奶子：根、叶、果治跌打损伤、痢疾，有散癖清热之效。１．２胡颓子属植物的化学成分有关胡颓子属植物的化学成分己有一些报道，胡颓子属植物的化学成分主要含有生物碱、挥发油、脂肪酸、黄酮、萜类、甾体、寡肽、氨基酸和蹂质等口３。另外胡颓子果实中还含有大量的微量元素。１．２．１生物碱胡颓子属植物中生物碱的类型主要为Ｂ一卡琳类和羟吲哚类生物碱。早期的定性检测和初步分析显示在胡颓子属植物沙枣的根皮和地上部分均含有生物碱类成分。迄今已从沙枣根皮中分离出８个生物碱成分，包括：哈尔曼（ｈａｒｍａｎ）、二氢哈尔曼（ｄｉｈｙｄｒｏｈａｒｍａｎ）、２一甲基一１，２，３，４一四氢一Ｂ一卡啉（２一ｍｅｔｈｙｌ一１，２，３，４一ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃａｒ—Ｂ—ｃａｒｂｏｌｉｎｅ）、胡颓子碱（ｅｌａｅａｇｎｉｎｅ）、四氢哈尔醇（ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｈａｒｍ０１）、Ⅳ一甲基四氢哈尔醇（Ⅳ一ｍｅｔｈｙｌｔｅｔ—ｒａｈｙｄｒｏｈａｒｍ－ｏｉ）、哈尔明（ｈａｒｍｉｎｅ）、哈尔醇（ｈａｒｍ０１）。此外在牛奶子叶和茎皮部位也发现了５一轻色胺口，＂。１９６８年，Ｓｌｙｗｋａ等从银果胡颓子（Ｅ．ｃｏｍｍｕｔａｔｅｂｅｒｎｈ）的根皮中还分离得到有旋光性的半萜螺环羟吲哚类生物碱（＋）一ｅｌａｃｏｍｉｎｅ，该化合物的结构及绝对构型是在１９９６年通过化学合成得以证明随１。值得一提的是对银果四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四ｆ胡颓子的根皮进行重复分离研究时发现生物碱Ｅｌａｃｏｍｉｎｅ和Ｉｓｏｅｌａｃ—ｏｍｉｎｅ都是以消旋体形式存在于植物体中阳１。１９７０年，Ｓｌｙｗｋａ等人又从银果胡颓子的根皮中得到另一个新卡琳类生物碱卜异丁基一１，２，３，４一四氢一矿卡琳，但未发现该化合物的盐酸盐有旋光活性，其结构与生物碱Ｅｌａｃｏｍｉｎｅ和ｌｓｏｅｌａｃ—ｏｍｉｎｅ似有生源关联盯３。１．２．２挥发油挥发油是存在于胡颓子属植物中的一类重要化学成分。胡颓子属植物沙枣的花不仅可供药用，也是天然香料，可提取高级香精油。李兆琳陆１等从其花中提得的挥发油，含油量高达０．１％，运用ＧＣ－ＭＳ研究了挥发油的化学成分，色谱分离出８５个组分，质谱确定了其中４７个组分的化学结构，其主要成分为反式一肉桂酸乙酯。而最近刘哗伟陋１等也运用ＧＣ－ＭＳ研究了从其花中提得挥发油化学成分，鉴定了１７种化合物，而且同样证实了反式一肉桂酸乙酯为其主要成分。另外中药辞海中记载胡颓子属植物的叶子中也含有大量的挥发油。１．２．３脂肪酸另一类广泛存在于胡颓子属植物中的化学成分是脂肪酸，主要存在于果实和种子中。江发寿阳３等从沙枣种子中分离出４种不饱和脂肪酸，证实沙枣油主要含有不饱和脂肪酸，使其在医疗上有重要的药用价值，而且也是制备营养保健油的优质原料。１．２．４萜类和甾体类萜类化合物广泛存在于胡颓子属植物的根、叶以及种子中。从胡颓子属植物中分离出的三萜成分主要是齐墩果酸、乌苏酸以及羽扇豆醇等。甾体类成分主要是Ｂ一谷甾醇及其葡萄糖苷盯’１们。１．２．５黄酮１９７３年，波兰学者对沙枣树叶中的黄酮成分进行了研究，从中分离得到４个黄酮化合物，并鉴定了其中的３种口３。Ｔａｇａｈａｒａｎ们等从胡颓子中分离得到３，７一二甲基山奈酚。赵鑫从胡颓子叶分离得到包括望春花黄酮醇苷Ａ（ｂｉｏｎｄｎｏｉｄｓ醇苷类化合物山奈酚一３—０一Ｂ－Ｄ－（４＂－０－４一香豆酰基）葡萄糖苷在内的６个黄酮代葡萄糖的黄酮醇ｃｈｒｙｓｏｅｒｉｏｌ苷类化合物。胡颓子属植物所含的黄酮苷类化合Ａ）在内的６个黄酮类化合物。Ｃａｏ…３等从长叶胡颓子中同样分离得到包括新黄酮类化合物。此后，Ｃａｏｎ２３等又从披针叶胡颓子的叶中发现了两个含有香豆酰基取豳山东省医学科学院研究生毕业论文四物的特点是在其糖部分常有香受酰基、阿魏酰基或芥子酰基的存在，丽其瞢元则多以山奈酚（ｋａｅｍｐｆｅｒ０１）、槲皮素（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）等为主。赵鑫从胡颓子叶中分出三个寡肽类化合物，丰富了该属植物的化合物结构种类。１．２。７氨基酸和微量元素汪维云、高学玲ｎ３３利用氨基酸自动分析仪法测得胡颓子、木半夏及牛奶子的果实中含有多种氨基酸。尤其入体必需的几种氨基酸（苏氨酸、蛋氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氦酸、苯丙氨酸、组氨酸等）含量比较高。他们又用原子吸收法测出果实中含有Ｚｎ、Ｆｅ、戮ｎ、Ｃｕ和Ｋ等微量元素。１．２．８鞣质Ｉｔｏｎ铂等从牛奶子中分得一系列ｅ一糖菅鞣花鞣质化合物胡颓子亭Ａ＿Ｇ（ＥｌａｅａｇｎａｔｉｎｓＡ—Ｇ）．四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四１．２．９其它１９７４年，苏联科学家从沙枣树叶中提取出咖啡酸、绿原酸和新绿原酸，还从沙枣树皮中分离得到儿茶酸（十）、表儿茶酸（一）及另两种儿茶酸类化合物口１。Ｒａｗａｔｎ朝等牛奶子地上部位分离得到一个新蒽醌苷类化合物１，６一二羟基－２－基一８—０一Ｂ—Ｄ一葡萄糖基（卜６）一旷Ｌ～木糖苷葸醌。１．３胡颓子属植物的药理活性１．３．１降血糖作用李玉山ｎ刚等以四氧嘧啶致糖尿病小鼠，应用长叶胡颓子果实水煎剂进行试验观察，检测空腹血搪（ＦＢＧ）、血浆胰岛素（ＮＳ）和Ｃ肤（Ｃ－Ｐ），结果发现可以使可以使糖尿病小鼠空腹血糖（ＦＢＧ）降低，虽然对血浆胰岛素（ＮＳ）和Ｃ肤（Ｃ－Ｐ）没有明显影响，但胰岛素敏感指数（ＩＳＩ）却明显高于实验对照组（Ｐ＜Ｏ．０５），研究结果还显示，胡颓子果实水煎剂抑制糖尿病小鼠血糖的升高与水煎剂浓度计量存在一定的依从关系，但对一定的血浆胰岛素（ＮＳ）和Ｃ肽（Ｃ－Ｐ）的没有明显的影响，这表明胡颓子果实降低血糖的作用并非通过刺激血浆胰岛素的增加完成。１．３．２抗脂质过氧化作用长叶胡颓子果实水煎剂能明显降低高胆固醇高脂饲料诱发高脂模型大鼠血浆中血清胆固醇（ＴＣ）、甘油三醋（ＴＧ）和低密度脂蛋白（ＬＤＬ－Ｃ）的水平（Ｐ（Ｏ．０５），调节体内脂质代谢，改善血流状况，有预防动脉粥样硬化和心血管系统疾病的作用。此外，还能够清除体内活性氧，减少膜脂过氧化，提高体内超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和谷光甘肤过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）的活力以及减少丙二醛（ＭＤＡ）和活性氧（Ｒ０Ｓ）的产生（Ｐ（Ｏ．０５）．ＳＯＤ和ＧＳＨ－ＰＸ作为体内关键性的抗氧化酶，可以防止脂质过氧化及其中间代谢产物对机体的损害ｎ引。１．３．３抗炎镇痛作用富硒长叶胡颓子根皮抗炎作用明显，其水煎液和乙醇提液都能明显抑Ｎ－－甲苯引起的小鼠的耳廓肿胀，且水煎剂的作用高于乙醇提取液。其乙醇提取液能明显抑制大鼠角叉菜引起的足肿胀：水煎剂能明显提高小鼠热板所致痛闭值，对醋酸所致小鼠扭体反应也有明显的对抗作用ｎ利。而从沙枣果实和种子的水煎剂和乙醇提物也能明显提高小鼠热板所致的痛闭值，证明沙枣果实和种子也有明显的抗炎镇痛作用ｎ８一引。‘１．３．４促进肌肉松弛作用四山东省医学科学院研究生毕业论文四Ｈｏｓｓｅｉｎｚａｄｅｈ等㈨的研究表明，用沙枣种子的水煎剂和乙醇提取物为小鼠皮下注射给药，可以明显促进小鼠的肌肉松弛，初步的植物化学试验显示提取物中含有黄酮，这也可能是其促进肌肉松弛作用的基础。１．３．５抑制溃疡作用沙枣果实的甲醇提取物在对乙醇诱发溃疡大鼠的试验中显示有明显的抑制溃疡作用，在剂量为３１５０ｍｇ／ｋｇ时，甲醇提取物抑制率可以达到９９．４％口¨。１．３．６免疫及抗癌作用胡颓子熊果酸能促进脾细胞增殖反应，对脾细胞ＩＬ一２、ＩＦＮ—Ｙ的产生有显著促进作用。伍杨、邓明会瞳２３等用小鼠分组进行分组对照试验。他们先常规制备小鼠脾细胞混悬液，然后分组加入不同浓度的熊果酸纯品进行离心，最后取上清液进行统计分析得出熊果酸能促进小鼠脾细胞产生增殖影响（Ｐ＜０．０１），小鼠脾细胞培养上清液中ＣｏｎＡ诱生ＩＬ一２、ＩＦＮ—Ｙ（Ｐ＜０．０５）。这也可能是其抗肿瘤作用机制之一。１．３．７对结肠炎的作用长叶胡颓子多糖对结肠炎损伤有保护作用。李玉山乜３３从长叶胡颓子中提取出多糖果，然后建立大鼠结肠炎模型，灌胃用药２周后，发现大鼠结肠粘膜损伤指数及结肠髓过氧化物酶活性降低，丙二醛的含量减少，超氧化物歧化酶的活性提高，使显著升高的细胞肿瘤因子、白细胞介素一８水平下降、细胞介素一ｌＯ水平升高，并与用药剂量呈量效关系。四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四第二章胡颓子叶化学成分研究２．１概述从胡颓子（ＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓＴｈｕｎｂ．）干燥叶的９５％７，醇提取物中，经溶剂分步萃取，反复硅胶柱层析，碳十八烷基键合硅胶柱层析，大孔吸附树脂ＡＢ．８柱层析，重结晶等方法得到了１８个化合物，通过理化常数测定和光谱数据分析等手段鉴定了其中１６个化合物的结构，分别为正三十一烷（Ｉ），１３一谷甾醇（ＩＩ），羽扇豆醇（ＩＩＩ），豆甾．４．烯．３，６．二酮（Ⅳ），水杨酸（Ｖ），没食子酸（ＶＩ），香草酸ⅣＩＩ），山柰酚（ＶＩＩＩ），山柰酚．３．Ｏ－１３…Ｄ３６ｏ－（对羟基桂皮酰基）－吡喃葡萄糖苷（Ｉ）（），甲基肌醇（Ｘ），胡萝卜苷（ＸＩ），槲皮素（ＸＩＩ），３７．甲氧基槲皮素（ＸＩＩＩ），葛花苷（ＸＩＶ），７．Ｄ－甲基鞣花酸一４一Ｏ－ａ．Ｌ．鼠李糖苷（ｘｖ），山柰酚一７一Ｏ－１３一Ｄ一吡喃葡萄糖苷（ＸＶＩ）。其中，化合物Ⅳ，Ｖ，ＶＩ，ＶＩＩ，ＶＩＩＩ，ＩＸ，ＸＩ，ＸＩＩ，ＸＩＩＩ，ＸＩＶ，ＸＶ，ＸＶＩ为首次从胡颓子叶中分得，化合物ＸＶＩＩ，ＸＶＩＩＩ的结构正在鉴定中。表２．１列出了从胡颓子叶中分离得到的化学成分及主要结构鉴定方法。仉山１ｅ２．１ＳｔｒｕｃｔｕｒｅｓａｎｄＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎＭｅｔｈｏｄｓ四山东省医学科学院研究生毕业论文四Ｎｏ．ＮａｍｅｓｏｆＣｏｍｐｏｕｎｄｓＳｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆＣｏｍｐｏｕｎｄｓＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎＭｅｔｈｏｄｓＩＶ豆甾一４一烯一３，铲二酮ｍ．Ｐ．ＥＳＩ—ＭＳ１Ｈ．ＮＭＲ１３Ｃ－ＮＭＲ（ｅｎｅｄｉｏｎｅ）Ｖ水杨酸ＥＳＩ—ＭＳ（ｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ）Ｃ∞Ｈｍ．Ｐ．ＩＲ１Ｈ－ＮＭＲ１３Ｃ－ＮＭＲ没食子酸ｍ．Ｐ。ＥＳＩ—ＭＳＶＩ（ｇａｌｌｉｃａｃｉｄ）Ｃ００Ｈ１Ｈ－ＮＭＲ１３Ｃ－ＮＭＲ香革酸ｍ．Ｐ。ＥＳＩ—ＭＳＶＩＩ（ｖａｎｉｌｌｉｃａｃｉｄ）１Ｈ，ＮＭＲ１３Ｃ．ＮＭＲｍ．Ｐ．ＩＲＥＳＩ．ＭＳＶＩＩＩ山柰酚（ｋａｅｍｐｆｅｒ０１）１Ｈ．ＮＭＲ１３Ｃ．ＮＭＲ…Ｄ由奈酚．３．Ｏ－１３６Ｏ。（对羟基桂皮酰ｍ．Ｐ．ＩＲＥＳＩ．ＭＳＩＸ基卜毗喃葡萄糖萤１Ｈ－ＮＭＲ１３Ｃ－ＮＭＲ［ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ－３一Ｏ一§－Ｄ－６－０－◇－ｈｙｄｒｏｘｙｃｉｎｎａｍｏｙｌ）－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ】·１４—四Ｉ胡颓子叶化学成分及药理活性研究四ＩＮｏ．ＮａｍｅｓｏｆＣｏｍｐｏｕｎｄｓＳｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆＣｏｍｐｏｕｎｄｓＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎＭｅｔｈｏｄｓＸ甲基肌醇（ｂｏｍｅｓｉｔ０１）Ｈ。瞽删。搽ＥＳ№Ｉ－Ｍ积Ｓｍ．Ｐ．ＥＳＩ—ＭＳＴＬＣｍ．Ｐ。ＩＲＸＩ胡萝卜苷（ｄａｕｃｏｓｔｅｒ０１）ＥＳ王．ＭＳＸＩ王槲皮素（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）’Ｈ．ＮＭＲ１３Ｃ－ＮＭＲＸＩＩＩ３’一甲氧基槲皮素（３＂－Ｏ－ｍｅｔｈｙｌｑｕｅｒｃｅ．ｔｉｎ）ｍ．Ｐ．ＥＳＩ—ＭＳ１Ｈ－ＮＭＲ１３Ｃ－ＮＭＲＸｌＶ葛花苷（ｋａｋｋａｌｉｄｅ）ｍ．Ｐ．ＩＲＥＳＩ．ＭＳ１Ｈ－ＮＭＲ’３Ｃ－ＮＭＲ－１５．四山东省医学科学院研究生毕业论文四２．２胡颓予叶化学成分的提取和分离２．２．１实验仪器与药材仪器：Ｘ一６、ＷＬ型显微熔点测定仪（温度计未校正）ＮＩＣＯＬＥＴＮＥＸＵＳ６７０ＢｒｕｃｋｅｒＡｖＡＮＣＥＦＴ－ＩＲ型红外分光光度计６００、ＩＮＯＶＡ－５００型核磁共振仪ＶＧＺＡＢ－ＺＦ型质谱仪试剂：柱层析硅胶（青岛海洋化工厂）十八烷基键合多孔硅胶薄层层析硅胶（青岛海洋化工厂）其他试剂均为分析纯药材：胡颓子叶于２００６年购霸安徽毫州敬德药业，经山东大学药学院生物教研室陈沪宁副教授鉴定为胡颓子属植物胡颓子（ＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓＴｈｕｎｂ．）的于燥叶。臼胡颓予叫化学成分及药理活性研究臼目２１目颓ｒＨ２．２．２化学成分的提取和分离２．２．２．１提取干燥的胡颓子叶１５ｋｇ，９５％乙醇加热回流提取３次，每次２小时。合并滤液减压回收乙醇，得浸膏。将浸膏制成水混悬液，依次以石油醚、氯仿、乙酸乙酯正丁醇萃取，得到四个不同极性部位萃取物，分别为２９＠，１２３９，１２３９，３５０９，提取流程见图２２。圈２２．２２胡颓子叶提取及部位分离流程图２．２分离２．２．２．２．１石油醚部位的分离纯化硅胶共１３００９１，石油醚一厶酸厶酯（１００：０～９９：Ｉ～９８：２—９７：３—９５：５曲卅１墩打油醚部位２９５９，硅胶柱层析分离（１０ｃｍｘｌＯＯｃｍ玻璃层析柱，２００～３００日８：２７：３～５：５－－０：１００）梯度洗脱，缚１０００ｍＬ为一流份，共收集１１０个流份（Ａ１～Ａ１１０）。ＴＬＣ检测，合并相同流份，采用结晶、晕结品或反复硅胶层析进行纯化，得到凹四山东省医学科学院研究生毕业论文四个化合物（Ｉ－ＩＶ），分离流程可见下图２－３。石油醚萃取浸膏２９５９Ａ３—Ａ１８ｈ４１．，Ａ５５硅胶柱层析重结晶石：乙梯度洗脱Ａ５７～Ａ６２Ａ６３－Ａ７０ｌＩ＋ＩＩＩ重结晶Ｉ怿瓢图２．３石油醚部位分离流程图Ａ３￣Ａ１８（石油醚：乙酸乙酯１００：Ｏ）合并重结晶得化合物ＩＡ４Ｉ－Ａ５５（石油醚：乙酸乙酯８５：１５）合并，硅胶柱层析分离（３ｃｍＸ５０ａｍ玻璃层析柱，２００～３００目硅胶共６０９），石油醚一乙酸乙酯（１００：０－９９：１～９８：２－９７：３～９５：５－９：１－８：２－７：３）梯度洗脱，每６０ｍＬ为一流份，共收集３５个流份（Ａ４１／Ｉ～Ａ４１／３５）。ＴＬＣ检测，合并相同流份，石油醚一乙酸乙酯重结晶，得化合物ＩＩ。从流份Ａ５７～Ａ６２（石油醚：乙酸乙酯８５：１５）合并，硅胶柱层析分离（２ｃｍ×５０ｃｍ玻璃层析柱，２００～３００目硅胶共３０９），石油醚一乙酸乙酯（ｉ００：Ｏ－９９：１～９８：２－９７：３～９５：５－９：１－８：２－７：３）梯度洗脱，每６０ｍＬ为一流份，共收集１８个流份（Ａ５７／Ｉ～Ａ５７／１８）。ＴＬＣ检测，合并相同流份，石油醚一乙酸乙酯重结晶，从流份Ａ５７／１０～Ａ５７／１５（石油醚：乙酸乙酯８５：１５）得化合物Ｉｌｌ。Ａ６３－Ａ７０（石油醚：乙酸乙酯８：２）合并，硅胶柱层析分离（２ｃｍＸ５０ｃｍ玻璃层析柱，２００～３００目硅胶共２５９），石油醚一乙酸乙酯（９８：２－９７：３－９５：５－９：１－８：２～７：３）梯度洗脱，每６０ｍＬ为一流份，共收集１５个流份（Ａ６３／１￣Ａ６３／１５）。ＴＬＣ检测，合并相同流份，石油醚一乙酸乙酯重结晶，得化合物ＩＶ。２．２．２．２．２氯仿部位的分离纯化取氯仿部位１２３９，硅胶柱层析分离（１０ｃｍＸ８０ｃｍ玻璃层析柱，２００～３００目硅胶共６００９），石油醚一丙酮（１００：０－９９：１～９８：２－９７：３－９５：５－９：１－８：２－７：３－５：５～０：１００）梯度洗脱，每１０００ｍＬ为一流份，共收集８０个流份（Ｂ１～Ｂ８０）。ＴＬＣ检测，合并相同流份。该部位的分离比较困难，从一开始洗脱到洗脱结束一直有很多叶绿素存在，该部位在上层析柱前用液相检测过，有２至３个峰较明显，但由·１８－四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四于大量色素的因素，造成该部位的纯化非常困难，所以到目前为止还没有从该部位拿到化合物。２．２．２．２．３乙酸乙酯部位的分离纯化取乙酸乙酯部位１２３９，硅胶柱层析分离（１０ａｍＸｌＯＯｃｍ玻璃层析柱，２００～３００目硅胶共１３００９），氯仿一甲醇（１００：０～９９：１－９８：２￣９７：３－９５：５～９：１～８：２～７：３～５：５～０：１００）梯度洗脱，每１０００ｍＬ为一流份，共收集１４８个流份（Ｃ１－－Ｃ１４８）。ＴＬＣ检测，合并相同流份，采用结晶、重结晶或反复硅胶层析进行纯化，得到八个化合物（ｖ￣ＸＩＩ），分离流程见图２．４。乙酸乙酯萃取浸膏１２３９上重结晶上霾差主上蠢结上萋篓；上蓁篓；土萋篓；上重结晶上萋篓．１９．四山东省医学科学院研究生毕业论文四２００～３００目硅胶共２５９），氯仿一甲醇（１００：Ｏ～９８：２～９７：３－９５：５￣９：１～８：２～７：３）梯度洗脱，每５０ｒａＬ为一流份，共收集２９个流份（Ｃ４７／１￣Ｃ４７／２９）。ＴＬＣ检测，合并相同流份，氯仿：甲醇重结晶，析出黄色粉末，得化合物ＸＩＩ。Ｃ６０～Ｃ９５（氯仿：甲醇８：２）合并，硅胶柱层析分离（３ｃｒｕＸ５０ｃｍ玻璃层析柱，２００～３００目硅胶共５０９），氯仿一甲醇（１００：０～９８：２～９５：５～９：１～８：２～７：３～６：４）梯度洗脱，每５０ｍＬ为一流份，共收集３１个流份（Ｃ６０／１０￣Ｃ６０／３１）。ＴＬＣ检测，合并相同流份，氯仿：甲醇重结晶，析出淡黄色结晶得化合物ＩＸ。Ｃ９７－－Ｃ１０５（氯仿：甲醇７：３）ＴＬＣ检测，氯仿：甲醇重结晶，得化合物ＸＩ。Ｃ１０８－－Ｃ１２８（氯仿：甲醇７：３）合并，硅胶柱层析分离（２ｃｍＸ５０ａｍ玻璃层析柱，２００～３００目硅胶共２８９），氯仿一甲醇（１００：０～９８：２～９５：５～９：１～８：２～７：３～６：４～５：５）梯度洗脱，每５０ｍＬ为一流份，共收集１８个流份（Ｃ１０８／１￣ｃ１０８／１８）。ＴＬＣ检测，合并相同流份，氯仿：甲醇重结晶，析出无色块状结晶得化合物Ｘ。２．２．２．２．４正丁醇部位的分离纯化取大孔吸附树脂（ＡＢ－８）２０００９乙醇湿法装柱，９５％乙醇流动清洗，检查流出的乙醇，直至流出的乙醇液与水混合不呈现白色乳浊物即可。然后以大量蒸馏水洗去乙醇。取正丁醇萃取浸膏３５０９，用水溶解过滤，水溶性部分进行大孔树脂柱层析分离，乙醇（０％～３０％，－－６０％－－９０％）梯度洗脱，每一梯度洗脱流份收集起来进行硅胶柱层析，分离流程见图２．５。正丁醇萃取浸膏３５０９水３０％乙醇目硅胶４５０９氯度洗脱６０％乙醇９０％乙醇ｇ．土辈燃氯Ｐ黼层上辈嚣氯上军躲氦四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四３０％乙醇流份浸膏，硅胶柱层析分离（１０ｃｍＸｌＯＯａｍ玻璃层析柱，２００～３００目硅胶４５０９），氯仿一甲醇（９７：３～９５：５－９：１－８：２－７：３－５：５－０：１００）梯度洗脱，每５００ｍＬ为一流份，共收集５３个流份（Ｄ１～Ｄ５３）。ＴＬＣ检测，合并相同流份，氯仿：甲醇重结晶，得到二个化合物（ｘＩｖ，ＸＶＩ）。Ｄ２３～Ｄ３２（氯仿：甲醇８：２）合并，硅胶柱层析分离（２ｃｍＸ５０ａｍ玻璃层析柱，２００～３００目硅胶共２０９），氯仿一甲醇（９７：３～９５：５－９：１－８：２－７：３－５：５）梯度洗脱，每ｌＯＯｍＬ为一流份，共收集２５个流份（Ｄ２３／１～Ｄ２３／２５）。聚酰胺薄膜与ＴＬＣ检测，合并相同流份，氯仿一甲醇重结晶，得化合物ＸＩＶ。Ｄ３５～Ｄ４２（氯仿：甲醇７：３）合并，硅胶柱层析分离（２ｃｍＸ５０ａｍ玻璃层析柱，２００～３００目硅胶共２７９），氯仿一甲醇（９７：３～９５：５～９：１～８：２～７：３－５：５－０：１００）梯度洗脱，每ｌＯＯｍＬ为一流份，共收集２８个流份（０３５／１～Ｄ３５／２８）。合并相同流份，聚酰胺薄膜检测为一主斑点。Ｃ１８烷基硅胶柱层析（１００９，２．５ｃｍＸ５０ｃｍ）纯化，得化合物ＸＶＩ。６０％乙醇流份浸膏，硅胶柱层析分离（１０ｃｍ×ｌＯＯｃｍ玻璃层析柱，２００－３００目硅胶６００９），氯仿一甲醇（９８：２～９７：３～９５：５－９：１－８：２－７：３—５：５－０：１００）梯度洗脱，每６００ｍＬ为一流份，共收集５５个流份（Ｅｌ～Ｅ５５）。ＴＬＣ检测，合并相同流份，得到两个化合物（ＸＩＩＩ，ＸＶ）。Ｅ７～Ｅ１２（氯仿：甲醇８：２）合并，硅胶柱层析分离（３ｃｍＸ５０ｃｍ玻璃层析柱，２００～３００目硅胶共５０９），氯仿一甲醇（９７：３～９５：５～９：１－８：２－７：３－５：５）梯度洗脱，每ｌＯＯｍＬ为一流份，共收集３３个流份（Ｅ７／１～Ｅ７／３３）。聚酰胺薄膜与ＴＬＣ检测，合并相同流份，氯仿一甲醇重结晶，得化合物ＸＩＩＩ。Ｅ３５～Ｅ４３（氯仿：甲醇８：２）合并，硅胶柱层析分离（２ｃｍ×５０ｃｍ玻璃层析柱，２００～３００目硅胶共５０９），氯仿一甲醇（９７：３～９５：５－９：１－８：２－７：３－５：５）梯度洗脱，每ｌＯＯｍ［．为一流份，共收集２５个流份（Ｅ３５／１～Ｅ３５／２５）。聚酰胺薄膜检测，合并相同流份，得化合物ＸＶ。２．３胡颓子叶化学成分的结构鉴定２．３．１化合物的结构鉴定化合物Ｉ：无色鳞片状结晶（石油醚），ｍ．Ｐ．６２－６４＂Ｃ。易溶解于石油醚、氯仿。ＩＲ（ＫＢｒ）ｖｖａｍ－１：‘Ｖ２９５６及ｖ２９１７为甲基和亚甲基的Ｃ—Ｈ伸缩振动吸收峰，１４６２为甲基、亚甲基的Ｃ－Ｈ弯曲振动吸收峰，ｖ７１８中强吸收显示烃基链长＞４，四山东省医学科学院研究生毕业论文四初步判断可能为直链饱和烃。ＥＩ—ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３６（矿）为分子离子峰。５７，７１，８５，９９，Ｉ１３，１２５等一系列Ｃ。Ｈ。，。峰证明化合物Ｉ为长链脂肪烃，分子式为Ｃ。，Ｈ６４。其光谱数据与文献阳３报道基本一致，确定化合物Ｉ为正三十一烷（Ｈｅｎｔｒｉａｎｔａｎｅ）。化合物ＩＩ：无色针状结晶（石油醚），ｍ．Ｐ．１３７～１３９℃。分子量４１４，分子式Ｃ２９Ｈ５００。Ｌｉｅｂｅｒｍａｎｎ－Ｂｕｒｃｈａｒｄ试验呈阳性反应。ＩＲ（ＫＢｒ）ｖｃｍ－１：ｖ３４３０为羟基伸缩振动吸收峰，Ｖ２９３６，２８５２为甲基和亚甲基的Ｃ—Ｈ伸缩振动吸收峰，Ｖ１３８２，１３６８为异丙基Ｃ－Ｈ弯曲振动吸收峰，ｖ９５９为反式双键Ｃ－Ｈ面外弯曲振动吸收峰，ｖ１０６１为Ｃ－Ｏ伸缩振动吸收峰。与已知的Ｂ一谷甾醇共薄层，Ｒｆ值和斑点颜色均一致，且混合熔点不下降，故化合物ＩＩ鉴定为Ｂ一谷甾醇（Ｂ－Ｓｉｔｏｓｔｅｒ０１）。化合物ＩＩＩ：无色针状结晶，ｍ．Ｐ．２１４～２１５。Ｃ。ＥＳＩ—ＭＳ：正离子检测：４２７［Ｍ＋Ｈ］＋，故其分子量为４２６。１３Ｃ－ＮＭＲ中显示有３０个碳信号，故分子式为Ｃ∞Ｈ∞０。不饱和度为６，１Ｈ—ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣＩ。）中６：０．７８，０．８１，０．８５，０．９６，０．９８，１．０５（各３Ｈ，ｓ）六组氢信号表明此化合物中含有６个角甲基。１Ｈ—ＮＭＲ中在６：４．５８（１Ｈ，ｍ），４．７０（１Ｈ，ｄ）两组氢信号和１℃一ＮＭＲ（１５０姗ｚ，ＣＤＣｌ。）中６：１０９．０，１５０．６的信号表明此化合物中含有双键。且在１Ｈ—ＮＭＲ中６：１．７０（３Ｈ，Ｓ），２．３９（１Ｈ，ｄｔ）有两组氢信号表明此化合物为羽扇豆烷型三萜。１Ｈ—ＮＭＲ中在８：３．２０（１Ｈ，ｄｄ）和１３Ｃ－ＮＭＲ中６：７７．９的信号表明此化合物中含有羟基。对照文献１Ｈ－ＮＭＲ和１３Ｃ－ＮＭＲ数据乜４’２副，确定此化合物为羽扇豆醇（Ｌｕｐｅ０１）。化合物Ⅳ：无色片状结晶（石油醚），Ｌｉｅｂｅｒｍａｎｎ—Ｂｕｒｃｈａｒｄ试验呈阳性反应。ｍ．Ｐ．１６１＂１６２℃：ＥＳＩ－ＭＳ：正离子检测：４２７［Ｍ＋ＨＩ＋：负离子检测：４２５［Ｍ—Ｈ］一，分子量为４２６。１３Ｃ—ＮＭＲ谱中显示有２９个碳信号，再根据１Ｈ＿ＮＭＲ可以推出分子式为Ｃ：。Ｈ。。０２：１Ｈ—ＮＭＲ（６００Ｈｚ，ＣＤＣｌ。）中Ｏ．７２（３Ｈ，Ｓ），０．９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），Ｏ．８４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），０．８１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），Ｏ．８４（３Ｈ，ｔ，Ｙ＝７．１Ｈｚ）为５个甲基信号；６．１７（Ｓ，Ｈ－４）为一双键信号。１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０Ｈｚ，ＣＤＣＩ。）中６１９９．５５和６２０２．４２两个信号，表明分子中含两个羰基，另外有６１２５．４４和６１６１．０７可以进一步说明分子中有个双键，综合所有数据对照文献啪１确定该化合物为豆甾－４－烯一３，６一二酮（ｅｎｅｄｉｏｎｅ）。化合物Ｖ：无色针状结晶（石油醚一丙酮），ｍ．Ｐ．１３６＂－－１３８℃，ＥＳＩ—ＭＳ：正离子检测：１４９［Ｍ＋Ｈ］＋ｉｔ１７１［Ｍ＋Ｎａ］＋负离子检测：１４７［ｉ—ＨＩ一。分子量为１４８，分子式四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四ＩＣ：Ｈ６０３。溴酚蓝反应阳性，表明有羧基存在。ＩＲ（ＫＢｒ）Ｖｃｍ－１：Ｖ３２３８是羟基（０Ｈ）的伸缩振动吸收峰，Ｖ３２３８－－－２８５８宽峰，为羧基氢的伸缩振动吸收峰，Ｖ１６５５是羰基（Ｃ＝Ｏ）伸缩振动吸收峰，ｖ１６１２，１４８３，１４６５是苯环的骨架伸缩振动吸收峰，ｖ７５８，６９７，６５９为苯环Ｃ－Ｈ面外弯曲振动吸收峰。１Ｈ—ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ。）６ｐｐｍ：７．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），６７．５５（１Ｈ，ｔｄ，，＝８．４Ｈｚ和Ｊ＝１．８Ｈｚ），６６．９５（１Ｈ，ｔ，６户８．４Ｈｚ），６７．９５（１Ｈ，ｄｄ，，＝８．４Ｈｚ和，＝１．８Ｈｚ）为苯环的氢，说明苯环为邻双取代，６１０．３５（１Ｈ）为羟基氢信号。结合分子式得知化合物为水杨酸。光谱数据与文献口力报道的水杨酸数据基本一致，确定化合物Ｖ为水杨酸（Ｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ）。化合物ＶＩ：棕色针晶（甲醇），ｍ．Ｐ．２３６～２３８℃；ＥＳＩ—ＭＳ正离子检Ｎ－１９３［Ｍ＋Ｎａ］＋，负离子检测：１６９［Ｍ—Ｈ］一分子量１７０；ＦｅＣｌ。显色反应呈阳性，说明该化合物为一酚性化合物。结合１Ｈ—ＮＭＲ和１３Ｃ—ＮＭＲ推出分子式为ｃＴｎ。ｏ；。１Ｈ—ＮＭＲ中８．９０（１Ｈ，ｂｒＳ），９．２１（２Ｈ，ｂｒＳ）为羟基信号，６．９３（２Ｈ，ｓ），说明有两个处在对称位置的氢，１２．２０（１Ｈ，ｂｒＳ）为一羧基信号，这也可由１３Ｃ—ＮＭＲ中含有６１６７．７信号进一步证实，该信号为羧基中羰基信号；６１４５．３，６１３７．９为连有羟基的碳信号，综合以上信息，与文献㈨对照确定该化合物为没食子酸（ｇａｌｌｉｃａｃｉｄ）。化合物ＶＩＩ：无色针晶（甲醇），ｍ．Ｐ．２０３－一２０５。Ｃ：ＥＳＩ—ＭＳ正离子检测：１６９［Ｍ＋ＨＩ＋，负离子检测：１６７［Ｍ—Ｈ］一，分子量为１６８。结合１Ｈ—ＮＭＲ和１３Ｃ—ＮＭＲ推出分子式为ＣｓＨ。０４’，１Ｈ－ＮＭＲ（ＤＭＳｏ－盔，６００ＭＨｚ）中６１２．４９（１Ｈ，Ｓ），为一羧基氢信号，另有６７．４２（１Ｈ，ｄｄ，户８．４，２．０Ｈｚ），６６．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．０Ｈｚ），表明分子中有两个苯环上的邻位氢，６３．７９（３Ｈ，Ｓ）为一甲氧基信号；１３Ｃ—ＮＭＲ中６１６７．１为羰基碳信号，６１５０．９，６１４７．１为连氧的苯环上的碳信号，其中６１４７．１是连甲氧基的碳信号，综合以上信息，与文献啪３对照鉴定该化合物为香草酸（ｖａｎｉｌｌｉｅａｃｉｄ）。化合物ＶＩＩＩ：黄色粉末（丙酮），ｍ．Ｐ．２７６～２７８＂Ｃ，ＥＳＩ—ＭＳ－正离子检测：２８７［Ｍ＋Ｈ］＋，３０９［Ｍ＋Ｎａ］＋，负离子检测：２８５［Ｍ－Ｈ］一。分子量为２８６，分子式Ｃ，５Ｈ。。０６。ＨＣｌ－Ｍｇ粉反应阳性，Ｍｏｌｉｓｈ反应阴性，Ｉ％Ａ１Ｃ１。乙醇试液显黄色荧光，提示该化合物为黄酮苷元。ＩＲ（ＫＢｒ）ｖｃｍ－１：ｖ３３１ｌ是羟基（ＯＨ）的伸缩振动吸收峰，ｖ１６６０是羰基（Ｃ＝Ｏ）伸缩振动吸收峰，Ｖ１６１３，１５０８是苯环的骨架伸缩振动吸收峰。１Ｈ一四山东省医学科学院研究生毕业论文四ＮＭＲ（ＤＭＳｏ－反，６００ＭＨｚ）中８．０４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），６．９３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ）表明Ｂ环为对位取代，６１２．４８（１Ｈ，Ｓ）为５位羟基信号，８．０４（２Ｈ，ｄ，，＝８．６Ｈｚ），６．９３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ）显示Ａ环为５，７为取代。综合以上信息，与文献口０’３１１对照确定化合物ＶＩＩＩ为山奈酚（ｋａｅｍｆｅｒ０１）。化合物Ⅸ：黄色粉末，ｍ．Ｐ．２３４＂＂２３６℃，与盐酸一镁粉反应显红色。ＥＳＩ—ＭＳ正离子检测：６１７［Ｍ＋Ｎａ］＋，负离子检测：５９３［Ｍ—Ｈ］一，分子量５９４，再根据１３Ｃ－ＮＭＲ中显示的碳的数目及１Ｈ－ＮＭＲ显示氢的数目推出化合物分子式为Ｃ∞Ｈ：。０，。。ＩＲ中３７００＂－－－＂３０００，１６８５，１６０８，１５０３，１４６０说明该化合物为黄酮，加之ＩＲ中的１０６８强吸收峰可以进一步表明该化合物为黄酮苷。１Ｈ—ＮＭＲ中的６６．４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ）和６６．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９６Ｈｚ）信号说明Ａ环５、７位被取代，而８．０ｌ（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）和，６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ）说明Ｂ环上有两组邻位质子，故Ｃ－４’被取代，１Ｈ—ＮＭＲ还给出糖端基质子信号６５．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），这些数据与黄芪苷的信号极为相似，此外还有一组与对羟基桂皮酰基相对应的共振信号，说明该化合物可能为黄芪苷与对羟基桂皮酰基组成的化合物。分析该化合物的１３Ｃ－ＮＭＲ化学位移值，进一步表明化合物是由黄芪苷与对羟基桂皮酸组成的。为了确定对羟基桂皮酰基的连接位置，将此化合物在碱性条件下水解，所得水解产物的分子离子峰为ｍ／ｚ４４７［Ｍ—Ｈ］一，其数据与黄芪苷（山柰酚一３一Ｄ－Ｂ—Ｄ一葡萄糖）相吻合，说明对羟基桂皮酰基与糖相连接。将该化合物按常法进一步酸水解，经ＴＬＣ检查出山柰酚和葡萄糖。比较该化合物与山柰酚一３一Ｏ－Ｂ—Ｄ一葡萄糖１３Ｃ－ＮＭＲ数据发现，二者苷元的１３Ｃ—ＮＭＲ信号完全一致，不同之处仅在于组成该化合物的葡萄糖Ｃ－６的１３Ｃ－ＮＭＲ信号由６６１．０向低场移至６６２．８，Ｃ－５的１３Ｃ－ＮＭＲ信号由６７７．５向高场位移至６７４．１，糖的其余各碳的”Ｃ－ＮＭＲ信号基本未发生变化，说明该化合物分子中的对羟基桂皮酰基与葡萄糖的Ｃ－６位成酯苷。综上，对照文献∞２１推定该化合物的结构为山柰酚一３一沪Ｂ—Ｄ－６一俨（对羟基桂皮酰基）一吡喃葡萄糖苷［ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ一３一Ｄ—Ｂ—Ｄ一６－０一（ｐ—ｈｙｄｒｏｘｙｃｉｎｎａｍｏｙｌ）一９１ｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ］。化合物Ｘ：无色块状结晶，ｍ．Ｐ．２０３－－－２０５。Ｃ。ＥＳＩ－ＭＳ正离子检测：１９５［Ｍ＋ＨＩ＋，负离子检测：１９３［Ｍ—Ｈ］一，分子量１９４。结合１Ｈ—ＮＭＲ和１３Ｃ—ＮＭＲ推出其分子式为Ｃ，Ｈ。。０６，１Ｈ—ＮＭＲ中有６３．３（ｓ．３Ｈ），显示有甲氧基氢信号；１３Ｃ—ＮＭＲ中６５６．９为甲氧基的碳信号，而其它碳信号的化学位移值均在６７～８ｌ之间，表明这些信号均四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四与氧相连，而碳的化学位移值没有大于９０的，可以说明该化合物不是糖，而是一环醇类化合物，由于没有进一步对该化合物进行立体结构鉴定，所以只给出了平面构型，参考相关文献口３１鉴定该化合物为甲基肌醇（ｂｏｍｅｓｉｔ０１）。化合物ＸＩ：白色粉末（氯仿一甲醇），ｍｐ３００＂－－３０２ｏＣ，Ｌｉｅｂｅｒｍａｎｎ一８ｕｒｃｈａｒｄ反应呈阳性。与胡萝卜苷对照品薄层色谱Ｒｆ值及显色行为一致，且混合熔点不下降。化合物Ｘ鉴定为胡萝卜苷（ｄａｕｃｏｓｔｅｒ０１）。化合物ＸＩＩ：黄色粉末（丙酮），ｍ．Ｐ．３１０～３１２。Ｃ，ＥＳＩ—ＭＳ：正离子检测：３０３［Ｍ＋Ｈ］＋，３２５［Ｍ＋Ｎａ］＋，负离子检测：３０１［Ｍ—Ｈ］一。分子量为３０２，分子式Ｃ，５Ｈ，。Ｏ，。盐酸一镁粉反应显红色，Ｍｏｌｉｓｈ反应为阴性。提示该化合物为黄酮苷元。ＩＲ（ＫＢｒ）ｖｃｍ－１：ｖ３２６４是羟基（ＯＨ）的伸缩振动吸收峰，ｖ１６６１是羰基（Ｃ＝Ｏ）伸缩振动吸收峰，ｖ１６１１，１５５７，１５１２，１４５６是苯环的骨架伸缩振动吸收峰。核磁共振谱１Ｈ—ＮＭＲ（６００／哪－ｌｚ，ＤＭＳＯ－反）６ｐｐｍ：８６．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，Ｈ一６），６６．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，Ｈ－８）为Ａ环上的两个质子信号，，＝２．５Ｈｚ表明Ａ环上两位质子为间位偶合关系，分别为６位和８位质子信号，该化合物为５，７位二取代。６６．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ一５７），６７．５４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１．６Ｈｚ，Ｈ一６’），６７．６７（１Ｈ，ｄ，ｊ＝１．６Ｈｚ，１２．４９（１Ｈ，ｂｒｓ）为黄酮化合Ｈ－２７）为Ｂ环上的三个质子信号，为１，３，４三取代，６物Ａ环５位羟基质子信号，６１０．７８（１Ｈ，Ｓ）为Ａ环７位羟基质子信号，６９．５８（１Ｈ，Ｓ，４’一ｏＨ），６９．３６（１Ｈ，Ｓ，３一ｏＨ），６９．３０（１Ｈ，Ｓ，３７一ＯＨ）为４７，３，３７的三个羟基质子信号。１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－吐）６ｐｐｍ：６１７６．０处的信号为羰基碳信号，６１６４．０，１６０．９，１４７．９，１４６．９这四个碳由于与酚羟基相连化学位移较大。以上数据与文献Ｈ５３报道的槲皮素相符，且与槲皮素标准品对照ＴＬＣ（聚酰胺膜，５０％乙醇为展开剂，１％－－氯化铝乙醇液显色）Ｒｆ值一致，混和熔点不下降，故确定化合物ＸＩＩ为槲皮素（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）。化合物ＸＩＩＩ：黄色粉末（氯仿，甲醇），ＥＳＩ－ＭＳ：正离子检测：３１７［Ｍ＋Ｈ］＋，３３９［Ｍ＋Ｎａ］＋，负离子检测：３１５［Ｍ－Ｈ］一。分子量为３２６，结合１Ｈ—ＮＭＲ和１３Ｃ—ＮＭＲ推出其分子式为Ｃ。６Ｈ，。０，。ＨＣｌ—Ｍｇ粉反应阳性，Ｍｏｌｉｓｈ反应阴性，Ｉ％ＡＩＣＩ。乙醇试液显黄色荧光，提示该化合物为黄酮苷元。１Ｈ—ＮＭＲ中有６１２．４７（Ｓ）、１０．７９（ｓ）、９．７６（Ｓ）、９．４６（Ｓ）四个羟基信号，又有６６．４８（ｄ，Ｊ＝２）和６６．２０（ｄ，Ｊ＝２），没有３位的特征氢信号，说明该黄酮有３，５，７位取代，另外还有１Ｈ—ＮＭＲ６：３．８５（Ｓ）和１３Ｃ—ＮＭＲ６：５６．２，说明分子中有一甲氧基。将１Ｈ—ＮＭＲ和”Ｃ—ＮＭＲ数据与槲皮四山东省医学科学院研究生毕业论文四素相对照，萁矗环和Ｃ环数据一致，说明甲基在８环上，１Ｈ－ＮＭＲ上有Ｓ７．７６（ｄ，户２），６７．７０（ｄｄ，户８．４，２Ｈｚ），６６．９４（ｄ，Ｊ－－８．４），说明Ｂ环上为３７，４’取代，根据Ｂ环上１℃一ＮＭＲ数据可以确定甲基是连在３’位，固鉴定该化合物为３’一甲氧基槲皮素（３’０－ｍｅｔｈｙｌｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）。纯合物ＸＩＶ＝无色针晶（举醇），ｍ．Ｐ．２３８－＇－２３９℃，ＦｅＣｌ。反应呈鬻性，Ｉ％Ａ１Ｃ１。乙醇试液显黄色荧光，。ＩＲ（ＫＢｒ）Ｖｃｍ－１：Ｖ３５００（ＯＨ），３２００，１６５１（Ｃ＝Ｏ），１６０５，１５８０，１５１０。说明该化合物为一黄酮类化合物，丽ＨＣｌ—Ｍｇ粉反应呈阴性，说明该化合物可能为异黄酮，这也可由１Ｈ－ＮＭＲ中含有６８．４５（ｓ，卜２）进一步证实。ＥＳＩ－ＭＳ：茬离子检测：６３１［瓣州ａ】＋，负离子检测：６０７［弘阅一，分子量为６０８，结合１Ｈ—ＮＭＲ和１３ｃ—ＮＭＲ推出其分子式为Ｃ描Ｈ。：Ｏ。。。从１℃一ＮＭＲ中可以看到有两组糖的信号，将该化合物水解后，经ＴＬＣ鉴定含有伊葡萄糖和拶一木糖。１卜ＮＭＲ中有６７．５３（２Ｈ，Ｓ），６７．０３（２Ｈ，ｓ）说明Ｂ环为４’位取代。另外还有６６．９８（Ｓ），除此之外１Ｈ－ＮＭＲ中６６～８再没有其它信号，说明化合物的矗环为三取代。从１Ｈ－ＮＭＲ中还可以看到两个甲氧基信号６３．８０（３Ｈ，Ｓ），６３．７７（３Ｈ，Ｓ）和一５位羟基信号６１２．９０（Ｓ）。６５．０５（１Ｈ，．７－－７．２）位为Ｄ—Ｇｌｃ端基质子，６４．１８（撼，Ｊ－７．２）位为Ｄ－Ｘｙｌ端基质子，显示为１３构型连接。综合以上数据，查阅相关文献∞朝鉴定该化合物为葛花菅（ｋａｋｋａｌｉｄｅ）。化合物ＸＶ：淡黄色针晶（氯仿，甲醇），１１１．Ｐ．＞３６０℃，Ｍｏｌｉｓｈ反应呈阳性。ＥＳＩ－ＭＳ：正离子检测：４８５［Ｍ＋Ｎａ］＋，４６３［黔Ｈ］＋，负离子检测：４６１［舻羽＋，分子量为４６２，并且有ｍ／ｚ１４７碎片离子峰，从１３Ｃ—ＮＭＲ中可以看出有一组甲基五碳糖的信号，可以证实这一碎片离子为糖。结合１Ｈ－ＮＭＲ和驺Ｃ—ＮＭＲ推出其分子式为Ｃ：，Ｈ。。０，。，Ｑ＝１３。为其红外光谱中显示有羟基（３４２２ｃｍ－１），共轭内酯羰基（１７４３ｃｍ－１）和芳环（１６０６ｃｆｆｌ，１４９３ｃｍ－１）特征峰。将该化合物水解后，经ＴＬＣ鉴定含有ａ－Ｌ－鼠李糖。１Ｈ—ＮＭＲ中６１。１３（３Ｈ，ｄ，户６．１８）为鼠李糖上甲基，６５．４８（１Ｈ，ｓ）鼠李糖端基质子，这一点也可由ＨＭＢＣ谱证实，该质子信号与１℃一ＮＭＲ中６１４６．８碳信号相关，也说明糖是与萤元的６１４６．８碳相连。６４。０４（３Ｈ，ｓ）为一甲氧基信号，６７．７３（ＩＨ，ｓ），６７．５１（１Ｈ，ｓ）为芳环上的氢。从ＨＭＢＣ谱中可以看到６７．５１氢与６１１１．２、１５９．１、１５３．１、１４０．５、１１３。４碳信号相关，丽羟基信号６１０．８（ｓ）与６１５３．１、１１１．９、１４０．５碳信号相关，我们可以得到以下结构片断Ａ。剩余的片断应该是一个连有羟基、糖和酰氧基的苯环，根据整个分子的不饱和度，两个片四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四断之间应该有两个环，从ＨＭＢＣ谱中可以看到５７．７３氢与５１４６．８、１５９．１、１４１．６、１１１．９、１１４．７碳信号相关，可以得到片断Ｂ或Ｃ。通过查阅文献，可以鉴定该化合物为鞣花酸类的一化合物，综合所有信息，鉴定该化合物为３’一沪甲基鞣花酸一４一沪仅一Ｌ一吡喃鼠李糖苷（３＇－Ｏ－ｍｅｔｈｙｌ．ｅｌｌａｇｉｃ＂ａｃｉｄ．４．Ｏ－ａ．Ｌ．ｒｈａｍｎｉｃｏｓｉｄｅ）。１ＯＲ４ｌ，掣ｐＲ１０Ｒ２Ｂ－Ｒｌ＝ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｅＲ２ｉＨ片断Ａ片断Ｂ和ＣＣ－Ｒ１＿ＨＲ２＝ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｅ．化合物ＸＶＩ：黄色结晶（甲醇），ｍ．Ｐ．２３４℃～２３６℃，ＦｅＣｌ。、ＨＣｌ一Ｍｇ粉反应阳性，Ｉ％ＡＩＣＩ。乙醇试液显黄色荧光，说明该化合物为黄酮类化合物。ＥＳＩ—ＭＳ：正离子检测：４７１［Ｍ＋Ｎａ］＋，负离子检测：４４７［Ｍ－Ｈ］－９分子量为４４８，结合１Ｈ—ＮＭＲ和１３Ｃ—ＮＭＲ推出其分子式为Ｃ：。Ｈ：。０。。。１Ｈ—ＮＭＲ中６６．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０），６．７９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０）分别为６位和８位氢，６．９５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０），８．０７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０）分别为Ｂ环上３７，５’和２’，６７氢。９．４２（１Ｈ，Ｓ）为４７一ｏＨ，１２．４７（１Ｈ，Ｓ）应该为５一ｏＨ，还‘剩一个羟基信号应该在３位或７位，和山柰酚的信号比较，可以证明其在３位。１３Ｃ－ＮＭＲ中显示有一组葡萄糖的信号，由此可以鉴定该化合物为山柰酚一７一Ｏ－１３一Ｄ一吡喃葡萄糖苷（ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ一７．Ｄ书一Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）２．３．２化合物结构鉴定数化合物Ｉ：正三十一烷（Ｈｅｎｔｒｉａｎｔａｎｅ）无色鳞片状结晶（石油醚），ｍ．Ｐ．６２～６４℃。ＩＲ（ＫＢｒ）Ｖｃｍ－１：２９５６，２９１７，２８４９，１４７３，１４６３，７２８，７１８。ＥＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３６［矿］，３９３，３７９，３６５，３５１，３３７，３２３，３０９，２８１，２６７，２５３，２３９，２２５，２１１，１９７，１８３，１６９，１５５，１４１，１２５，１１３，９９，８５，７１，５７。化合物ＩＩ：Ｂ一谷甾醇（１３－Ｓｉｔｏｓｔｅｒ０１）无色针状结晶（石油醚），ｍ．Ｐ．１３７～１３９℃。ＩＲ（ＫＢｒ）ｖｃｍ－１：３４３０，２９３６，２８５２，１４６４，１３８２，１３６８，９５９。化合物ＩＩＩ：羽扇豆醇（Ｌｕｐｅ０１）无色针状结晶（石油醚），ｍ．Ｐ．２１４，－－－２１５℃。１Ｈ—ＮＭＲ（６００Ｈｚ，ＣＤＣＩ。）：６０．７８，．２７．四山东省医学科学院研究生毕业论文四０．８１，０．８５，Ｏ．９６，０．９８，１．０５（各３Ｈ，ｓ，为２３，２４，２５，２６，２７，２８位角甲基质子）：１．７０（３Ｈ，ｓ，ＣＨ。一３０），２．３９（１Ｈ，ｄｔ，户５．９，１１．１ｎｚ，ｎ一１９），３．２０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ三４．８，１１．５Ｈｚ，ｎ一３Ｑ），４．５８（１Ｈ，ｍ，Ｈ一２９）和４．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ－－２．４Ｈｚ，Ｈ－２９）．１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ｎｚ）：６３８．４（Ｃ－１），２７．２（Ｃ一２），７８．７（Ｃ二３），３８．６（Ｃ一４），５５．０（Ｃ－５），１８．０（Ｃ－６），３４．０（Ｃ－７），４０．６（Ｃ一８），５０．２（Ｃ一９），３６．９（Ｃ一１０），２０．７（Ｃ－１１），２４．９（Ｃ一１２），３７．８（Ｃ一１３），４２．５（Ｃ一１４），２７．１（Ｃ一１５），３５．３（Ｃ－１６），４２．７（Ｃ－１７），４７．７（Ｃ一１８），４８．０（Ｃ一１９），１５０．６（Ｃ一２０），２９．６（Ｃ一２１），３９．７（Ｃ－２２），２７．７（Ｃ－２３），１５．１（Ｃ一２４），１５．８（Ｃ一２５），１５．７（Ｃ一２６），１４．３（Ｃ－２７），１７．７（Ｃ一２８），１０９．０（Ｃ一２９），１９．０（Ｃ一３０）．化合物ＩＶ：豆甾－４－烯一３，６一二酮（ｅｎｅｄｉｏｎｅ）白色片状结晶（石油醚），ｍ．Ｐ．１６１～１６２℃。１Ｈ—ＮＭＲ（６００Ｈｚ，ＣＤＣｌｓ）：６６．１７（ｓ，Ｈ一４），０．７２（ｓ，１８一ＣＨ。），１．１６（ｓ，Ｈ一１９），Ｏ．９３（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２１－ＣＨ。），Ｏ．８４（ｄ，，＝７．１Ｈｚ，２６一ＣＨ３），０．８１（ｄ，，＝７．０Ｈｚ，２７一ＣＨ３），Ｏ．８４（ｔ，，＝７．１Ｈｚ，２９－ＣＨ。）：１３ｃ—ＮＭＲ（１５０ｎｚ，ＣＤＣｌ３）：６３５．５１（Ｃ一１），３３．９７（Ｃ一２），１９９．５５（Ｃ－３），１２５．４４（Ｃ－４），１６１．０７（Ｃ－５），２０２．４２（Ｃ－６），４６．８２（Ｃ一７），３９．１０（Ｃ－８），５０．９５（Ｃ－９），３４．１９（Ｃ一１０），２０．８５（Ｃ一１１），３９．８１（Ｃ一１２），４２．５ｌ（Ｃ一１３），５５．８１（Ｃ－１４），２３．９６（Ｃ－１５），２８．０１（Ｃ一１６），５６．５２（Ｃ一１７），１１．９６（Ｃ一１８），１７．５０（Ｃ－１９），３６．０２（Ｃ－２０），１８．６９（Ｃ一２１），３３．７９（Ｃ一２２），２５．９７（Ｃ一２３），４５．７６（Ｃ－２４），２９．０８（Ｃ－２５），１９．８２（Ｃ－２６），１８．９９（Ｃ一２７），２３．０３（Ｃ一２８），１１．８７（Ｃ－２９）。化合物Ｖ：水杨酸（Ｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ）无色针晶（甲醇），１１１．Ｐ．１５８～１６０℃。１Ｈ—ＮＭＲ（６００Ｍｔｔｚ，ＤＭＳＯ—ｄ６）：６１０．３７（１Ｈ，ｓ，２一ＯＨ），７．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４，ｎ一３），７．５３（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．４，７．２，１．３Ｈｚ，Ｈ一４），６．９４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．４，７．２，１．３Ｈｚ，Ｈ一５），７．９４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＿－８．４，１．３Ｈｚ，ｎ－６）：１３Ｃ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ—ｄ６，１５０ＭＩｔｚ）６：１１７．９（Ｃ一１），１６２．２（Ｃ－２），１１１．２（Ｃ－３），１３７．０（Ｃ－４），１１９．６（Ｃ一５），１３１．０（Ｃ一６），１７４．９（ＣＯＯＨ）。化合物ＶＩ：没食子酸（ｇａｌｌｉｃａｃｉｄ）棕色针晶（甲醇），ｍ．Ｐ．２３６～２３８℃。１Ｈ—ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄｅ，６００Ｎ４ｚ）６：６．９３（２Ｈ，ｓ，Ｈ－２，６），８．９０（１Ｈ，ｂｒＳ，４一ＯＨ），９．２１（２Ｈ，ｂｒｓ，３，５一ＯＨ），１２．２０（１Ｈ，ｂｒｓ，ｃｏｏｎ）：”Ｃ—ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，１５０Ｍｔｔｚ）６：１６７．７（ＣＯＯＨ），１４５．３（Ｃ－３，５），１３７．９－２８—四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四（Ｃ一４），１２０．３（Ｃ—１），１０８．６（Ｃ一２，６）。化合物ＶＩＩ：香草酸（ｖａｎｉｌｌｉｃａｃｉｄ）白色针晶（甲醇），Ｉｎ．Ｐ．２０３～２０５℃。ＥＳＩ—ＭＳ正离子检测：１６９［Ｍ＋Ｈｉ＋，负离子检测：１６７［Ｍ—Ｈ］一，分子量为１６８。１Ｈ—Ｎ—ＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，６００ＭＨｚ）８ｉ１２．４９（１Ｈ，Ｓ，ＣＯＯＨ），９．８４（１Ｈ，Ｓ，４一ＯＨ），７．４１（１Ｈ，Ｓ，２－Ｈ），７．４２（１Ｈ，ｄｄ，户８．４，２．ＯＨｚ，Ｈ一６），６．８１（１Ｈ，ｄｄ，户８．４，２．０Ｈｚ，Ｈ一６），３．７９（３Ｈ，Ｓ，３－ＯＣＨ。）：１３Ｃ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ—ｄ。，１５０ＭＨｚ）６：１６７．１（ＣＯＯＨ），１５０．９（Ｃ一４），１４７．１（Ｃ－３），１２３．３（Ｃ一６），１２１．４（Ｃ一１），１１４．９（Ｃ一５），１１２．５（Ｃ一２），５５．４（３－ＯＣＨ。）。化合物ＶＩＩＩ：山奈酚（ｋａｅｍｆｅｒ０１）黄色粉末（甲醇），ｍ．Ｐ．２７４．０＂－－２７６．０℃。ＩＲ（ＫＢｒ）Ｖａｍ－１：ＶＶ３３１１，Ｖ１６６０，１６１３，Ｖ１５０８；１Ｈ—ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：６１２．４８（１Ｈ，Ｓ，５－ＯＨ），ｌＯ．８０（１Ｈ，Ｓ，７一ＯＨ），１０．１２（１Ｈ，Ｓ，４７一ＯＨ），９．４２（１Ｈ，Ｓ，３一ＯＨ），８．０４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，Ｈ一２７，６７），６．９３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，Ｈ一３’，５７）：Ｃ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ—ｄ。，１５０ＭＨｚ）６：１４６．７（Ｃ－２），１３５．５（Ｃ－３），１７５．８（Ｃ－４），１６０．６（Ｃ一５），９８．１（Ｃ一６），１６３．８（Ｃ一７），９３．４（Ｃ一８），１５６．０（Ｃ一９），１０２．９（Ｃ一１０），１２１．５（Ｃ—ｌ’），１２９．４（ｃ－２’），１１５．３（Ｃ－３７），１５９．２（Ｃ一４’），１１５．３（Ｃ－５７），１２９．４（Ｃ一６’）。化合物ＩＸ：山柰酚一３一Ｄ－Ｂ—Ｄ一６一Ｄ－（对羟基桂皮酰基）一吡喃葡萄糖苷［ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ一３—０一Ｂ—Ｄ一６－０一（ｐ—ｈｙｄｒｏｘｙｃｉｎｎａｍｏｙｌ）一ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ］黄色粉末，ｍ．Ｐ．２３４＂－－２３６℃。ＩＲ（ＫＢｒ）Ｖｃｍ－１：３７００＂－３０００，１６８５，１６０８，１５０３，１４６０，１０６８；１Ｈ＿ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ。，６００ＭＨｚ）６：１２．５９（１Ｈ，Ｓ，５一ＯＨ），１０．８７（１Ｈ，Ｓ，７一ＯＨ），１０．１８（１Ｈ，Ｓ，４一ＯＨ），１０．０４（１Ｈ，Ｓ，７”一ＯＨ），８．０１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４ＨｚＨ一２７，Ｈ－６’），６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，Ｈ一３’，Ｈ一５’），６．４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，Ｈ一８），６．１６（１Ｈ，ｄ，，＝１．９Ｈｚ，Ｈ一６），５．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ｇｌｃＨ一１），６．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．０Ｈｚ，Ｐ—ＯＨ—ＣｉｒＨ一２Ⅳ），６．８０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，Ｐ—ＯＨ—ＣｉｎＨ－５＂，Ｈ一９Ⅳ），７．３８（２Ｈ，ｄ，Ｐ—ＯＨ—ＣｉｎＨ一６Ⅳ，Ｈ一８＂），７．３５（１Ｈ，ｄ，Ｈ－３＂）：”Ｃ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ—ｄ６，１５０ＭＨｚ）６：１５６．２（Ｃ－２），１３２．９（Ｃ一３），１７７．３（Ｃ－４），１６１．０（Ｃ一５），９８．７（Ｃ一６），１６４．０（Ｃ一７），９３．６（Ｃ一８），１５６．３（Ｃ一９），１０３．８（Ｃ—ｉ０），１２０．６（Ｃ一１７），１３０．７（Ｃ一２７），１１５．Ｏ（Ｃ一３７），１５９．７（Ｃ－４７），１１５．０（Ｃ一５７），１３０．７（Ｃ－６７），１００．８（ＧｌｃＣ一１），．２９．四山东省医学科学院研究生毕业论文四７４．０（Ｃ一２），７６．１（Ｃ一３），６９．８（Ｃ一４），７４．１（Ｃ一５），６２．８（Ｃ－６），１６６．１（Ｐ—ＯＨ—ＣｉｎＣ一１＂），１１３．５（Ｃ一２＂），１４４．５（Ｃ一３＂），１２４．８（Ｃ一４＂），１３０．０（Ｃ－５＂），１１５．６（Ｃ一６＂），１５９．７（Ｃ－７＂），１１５．６（Ｃ－８＂），１３０．０（Ｃ一９＂）。化合物ＸＩ：甲基肌醇（ｂｏｍｅｓｉｔ０１）无色块状结晶，ｍ．Ｐ．２０３，－－－２０５℃。１Ｈ—ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）６：３．０８（ｄｄ，１户９．５，２．９Ｈｚ），３．３（Ｓ．３Ｈ），３．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ．－７．０，３．５Ｈｚ），３．８６（１Ｈ，Ｈ，ｄｄ，户７．０，３．５Ｈｚ），４．３６（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ），４．５０（Ｉｌｌ，２Ｈ），４．６８（ｍ，２Ｈ）：１３Ｃ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ—ｄ６，１５０Ｊ州ｚ）６：５６．９（ＯＣＨ３），６７．９（ＣＨ），７０．３（ＣＨ），７１．９（ＣＨ），７２．１（ＣＨ），７３．１（ＣＨ），８１．０（ＣＨ）。化合物ＸＩＩ：槲皮素（Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）黄色粉末（丙酮），ｍ．Ｐ．３１０～３１２℃。ＩＲ（ＫＢｒ）Ｖ１６１１，１５５７，１５１２，１４５６，１３５６，１３２０，１２４７，１２１ｌ，１ｃｍ－１：３２６４，２８０５，２３４２，１６６１，１６９，ｉ０９３。１Ｈ—ＮＭＲ（６００删Ｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）６ｐｐｍ：６．１８（１Ｈ，ｄ，，＝２．５Ｈｚ，Ｈ一６），６．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，Ｈ一８），６．８８（１Ｈ，ｄ，，＝８．４Ｈｚ，Ｈ一５７），７．６７（１Ｈ，ｄ，，＝１．６Ｈｚ，Ｈ一２’），７．５４（１Ｈ，ｄｄ，，＝８．３Ｈｚ，１．６Ｈｚ，Ｈ一６’），９．３０（１Ｈ，Ｓ，３７一ＯＨ），９．３６（１Ｈ，Ｓ，３一ＯＨ），９．５８（１Ｈ，Ｓ，４７一ＯＨ），１０．７８（１Ｈ，Ｓ，７一ＯＨ），１２．４９（１Ｈ，ｂｒｓ，５－ＯＨ）。１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－－ｄ６）６ｐｐｍ：１４５．２（Ｃ－２），１３５．９（Ｃ－３），１７６．０（Ｃ－４），１６０．９（Ｃ－５），９８．３（Ｃ－６），１６４．０（Ｃ－７），９３．４（Ｃ－８），１５６．３（Ｃ一９），１０３．２（Ｃ－ｌＯ），１４６．９（Ｃ－３７），１４７．９（Ｃ一４７），１１５．７，１１５．２（Ｃ一２７和５７），１２０．１（Ｃ－６７）。化合物ＸＩＩＩ：３７一甲氧基槲皮素（３７—０一ｍｅｔｈｙｌｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）黄色粉末（氯仿，甲醇），１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）６ｐｐｍ：６．２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，Ｈ一６），６．４８（１Ｈ，ｄ，，＝２．０Ｈｚ，Ｈ一８），６．９４（１Ｈ，ｄ，，＝８．４Ｈｚ，Ｈ一２Ｈｚ，Ｈ一５７），７．７６（１Ｈ，ｄ，，＝２．０７），７．７０（１Ｈ，ｄｄ，，＝８．４Ｈｚ，２．０Ｈｚ，Ｈ一６’），９．４６（１Ｈ，Ｓ，３－ＯＨ），９．７６（１Ｈ，Ｓ，４’－ＯＨ），ｉ０．７９（１Ｈ，Ｓ，７一ＯＨ），１２．４７（１Ｈ，Ｓ，５一ＯＨ）。１３Ｃ—ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ—ｄ。）６ｐｐｍ－１４７．１（Ｃ一２），１３６．３（Ｃ一３），１７６．３（Ｃ－４），１６１．１（Ｃ一５），９８．７（Ｃ一６），１６４．４（Ｃ－７），９４．０（Ｃ－８），１５６．６（Ｃ－９），１０３．５（Ｃ一１０），１２２．２（Ｃ—ｌ’），１１６．０（Ｃ一２７），１４９．２（Ｃ一３’），１４７．８（Ｃ－４７），１１２．３（Ｃ一５７），１１２．４（Ｃ一６７）．化合物ＸＩＶ：葛花苷（ｋａｋｋａｌｉｄｅ）。无色针晶（甲醇），ｍ．Ｐ．２３８＂－＇２３９℃，１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０Ｅ－Ｉｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）６ｐｐｍ：１５５．５（Ｃ一２），１２３．３（Ｃ－３），１８１．２（Ｃ－４），１５３．３（Ｃ－５），１３２．９（Ｃ－６），１５７．０（Ｃ－７），９４．７－３０一四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四（Ｃ一８），１５３．０（Ｃ一９），１０７．０（Ｃ一１０），１２２．２（Ｃ一１７），１３０．７（Ｃ一２７），１１４．２（Ｃ－３７），１５９．７（Ｃ一４７），１１４．２（Ｃ一５’），１３０．７（Ｃ一６７）．１００．６（ＧｌｃＣ一１），７３．５（Ｃ－２），７７．０（Ｃ一３），７０．２（Ｃ一４），７６．２（Ｃ一５），６９．１（Ｃ一６）．１０４．６（ＸｙｌＣ—１），７３．９（Ｃ一２），７７．０（Ｃ一３），６９．９（Ｃ一４），６６．１（ｃ－５）．６０．８（６一ＯＣＨ。），５５．６（４７一ＯＣＨ。）：１Ｈ—ＮｌＶｌＲ６ｐｐｍ：６．９８（１Ｈ，Ｓ，ｎ一８），８．４５（１Ｈ，Ｓｎ一２），７．５３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ～２７，６’），７．０３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ一３’，５７），９．４６（１Ｈ，Ｓ，３一ＯＨ），９．７６（１Ｈ，Ｓ，４’一ＯＨ），１０．７９（１Ｈ，Ｓ，７一ＯＨ），１２．９０（１Ｈ，Ｓ，５一ＯＨ），３．８０（３Ｈ，Ｓ，６－ＯＣＨ。），３．７７（３Ｈ，Ｓ，４７一ＯＣＨ。）。Ｇｌｃ：５．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ一１），３．３５（１Ｈ，ｍ，Ｈ一２），３．３３（１Ｈ，ｍ，Ｈ一３），３．２ｌ（１Ｈ，ｍ，Ｈ－４），３．６２（１Ｈ，ｍ，Ｈ一５），３．６４（１Ｈ，ｍ，Ｈ一６ａ），３．９３（１Ｈ，ｍ，Ｈ一６ｂ），Ｘｙｌ：４．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０，Ｈ—１），３．０１（ＩＨ，ｍ，Ｈ一２），３．０７（１Ｈ，ｍ，ｎ－３），３．３２（州，ｍ，Ｈ一４），２．９６（１Ｈ，ｍ，Ｈ一５ａ），３．７１（１Ｈ，ｍ，Ｈ－５ｂ），除此之外，６５．４８＂－＂６４．９０的其它信号为糖上的羟基氢信号。化合物ＸＶ：３７一Ｄ＿甲基鞣花酸一４一（７－Ｑ－Ｌ－吡喃鼠李糖苷（３’一０一［］ｅｔｈｙｌ—ｅｌｌａｇｉｃａｃｉｄ一４一Ｏ－Ｑ—Ｌ—ｒｈａｍｎｉｃｏｓｉｄｅ）淡黄色针晶（氯仿，甲醇），ｍ．Ｐ．＞３６０℃。１Ｈ—ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ—ｄ。）６ｐｐｍ：１１．１ｌ（１Ｈ，Ｓ，３一ＯＨ），１０．８（１Ｈ，Ｓ，４’一ＯＨ），７．７３（（１Ｈ，Ｓ，Ｈ－５），７．５１（（１Ｈ，Ｓ，Ｈ－５７），４．０４（３Ｈ，Ｓ，３７０ＣＨ３），Ｒｈａ：５．４８（１Ｈ，Ｓ，ｎ－１），３．５３（１Ｈ，ｍ，ｎ－２），４．０ｌ（１Ｈ，Ｓ，ｎ－３），３．３２（１Ｈ，ｍ，Ｈ－４），３．８５（１Ｈ，ｄ，Ｈ一５），１．１４（３Ｈ，ｄ，ｎ－６），４．７３～５．１２为糖上的三个羟基氢；１３Ｃ—ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ。）６ｐｐｍ：１１４．７（Ｃ一１），１４１．６（Ｃ一２），１３６．５（Ｃ一３），１４６．８（Ｃ一４），１０７．６（Ｃ一５），１１１．９（Ｃ一６），１５９．１（Ｃ－７），１１３．４（Ｃ－１７），１４２．２（Ｃ－２７），１４０．５（Ｃ－３’），１５３．１（Ｃ－４’），１１１．９（ｃ－５７），１１１．２（Ｃ－６７），１５９．１（Ｃ一７７），６１．４（３’一ＯＣＨ。），Ｒｈａ：１００．５（Ｃ－Ｉ），７０．４（Ｃ一２），７０．５（Ｃ一３），７２．０（Ｃ－４），７０．３（Ｃ一５）．化合物ＸＶＩ：山柰酚一７一Ｏ－０一Ｄ一吡喃葡萄糖苷（ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ一７．伊ｐ—Ｄ．ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）黄色结晶（甲醇），ｍ．Ｐ．２３４℃～２３６℃，１ｎ—ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳ０－－ｄ。）６ｐｐｍ：１２．４７（１Ｈ，Ｓ，５一ＯＨ），９．４２（１Ｈ，Ｓ，４７一ＯＨ），１０．１１（１Ｈ，Ｓ，３一ＯＨ），６．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ－＿２．０，Ｈ一６），６．７９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０，Ｈ－８），６．９５（２Ｈ，ｄ，户９．０，ｎ一３７，５７），８．０７（２Ｈ，ｄ，］－－９．０，Ｈ一２７，６’），５．３０（１Ｈ，ｄ；户４．８，ＧｌｃＨ一１）．１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－－ｄ６）６ｐｐｍ：１４７．７（Ｃ一２），１３６．１（Ｃ－３），１７６．２（Ｃ－４），１６１．５（Ｃ－５），９９．０（Ｃ－６），１６２．８．３１．四山东省医学科学院研究生毕业论文四（Ｃ－７），９４．５（Ｃ－８），１５５．９（Ｃ一９），１０４．８（Ｃ一１０），１２１．６（Ｃ一１’），１２９．７（Ｃ一２７），１１５．６（Ｃ－３’），１５９．５（Ｃ－４’），１１５．６（ｃ－５７），１２９．７（Ｃ－６７），１００．１（ＧＩｃＣ—１），７３．２（Ｃ－２），７６．６（Ｃ－３），７０．０（Ｃ一４），７７．３（Ｃ一５），６０．８（Ｃ一６）。２．４胡颓子叶挥发油化学成分的气相色谱一质谱联用分析在对胡颓子叶化学成分分离过程中，发现其石油醚萃取部位含有大量挥发油，然而到目前为止，还未见有关其挥发油成分的研究报道。为了更好地了解胡颓子叶的化学成分，利用ＧＣ－ＭＳ技术对常规水蒸汽蒸馏法制备的胡颓子叶挥发油的化学组成进行了研究，以期为胡颓子叶的开发利用提供进一步的实验依据。２．４．１材料２．４．１．１药材胡颓子叶购自安徽毫州敬德药业，经本所天然药物研究室鉴定为胡颓子科植物胡颓子（Ｅ］ａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓＴｈｕｎｂ．）的干燥叶。粉碎成粗粉，备用。２．４．１．２仪器与试剂ＴｒａｃｅＧＣ－ＴｒａｃｅＤＳＱ气相色谱一质谱联用仪（美国热电公司，配Ｘｃａｌｉｂｕｒｌ．３工作站）；无水乙醚，乙酸乙酯（ＡＲ，重蒸）；无水硫酸钠（５５０℃，烘烤４ｈ）２．４．２方法与条件２．４．２．１挥发油的提取称取ｌＯＯｇ胡颓子叶粗粉，置圆底烧瓶中，按常规水蒸汽蒸馏法提取１０ｈ，得馏出液６００ｍＬ左右。无水乙醚萃取３次，每次１５０ｍＬ，合并萃取液，加入ｌＯｇ无水Ｎａ。Ｓ０４干燥１２ｈ以除去水分。过滤，所得滤液减压蒸馏除去溶剂得黄色透明油状液体，具浓郁特殊香味，出油率为０．３％（ｗ／ｗ）。挥发油用乙酸乙酯溶解，Ｏ．４５ｕｍ微孔滤膜过滤。２．４．２．２分析条件色谱条件：ＢＤ－５ＭＳ色谱柱（３０ｍＸ０．２５ｍｍＸ０．２５１．１ｍ，Ｊ＆ｗ公司）；进样量１ｕＬ；载气：高纯氦气，流量ｌｍＬ／ｍｉｎ；柱温：５０℃，以８℃／ｍｉｎ升至２５０℃，保持２０ｍｉｎ；进样口温度：２３０℃，不分流进样。质谱条件：离子源（ＥＩ）温度：２５０℃，电子轰击能量７０ｅＶ，传输线温度２５０℃，扫描质量范围ｍ／ｚ：２０＂－－６００，溶剂延迟时间３ｍｉｎ。２．４．３结果２．４．３．１对提取得到的胡颓子叶挥发油样本进行ＧＣ—ＭＳ分析，其总离子流图（见图２．６）共分离得到４６个峰。２．４．３．２通过检索Ｒｅｐｌｉｂ质谱图库，结合人工谱图解析，并查对有关质谱资料ｍ’四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四３７１，从基峰相对丰度等几个方面进行比较，从而鉴定其结构，并通过峰面积归一法确定各成分的相对百分含量，鉴定出其中的３０种化学成分（如表２．２所示），占总挥发油成分的８７．１５％。Ｒｔ０．∞一４５．０３图２．６胡颓子叶挥发油的ＧＣ－ＭＳ分析总离子流图表２．２胡颓子叶挥发油的化学成分及相对含量编号１２３４５６７８９１０１２１３１４１５１６１７１８１９２０２１２２２３２４２５２６２７２８２９３０船ＩＮ／ｍ时ｉｎ９．１８…名称…誓器ＣＪ－Ｉ—ｅ０２Ｃｄ－ｈＯＣＴＨ．ＮＯ。Ｃ９Ｈ·．０２ＣｇＨ，００２Ｃｔ０Ｈｚ００２Ｃ８Ｈ８０。Ｃｔｓｌｌ２２０Ｃ－ｏＨ－ｚ０２Ｃ－，Ｈ。ｚＯｚＣｔ３ＨｚｏＯｚＣ－０Ｈ，－０。ｃ。ｌＨｌ６０。ⅥⅡ１１６ｕ２１４４１２０１３９１５８１５０１７２１５２１９４１６４１８６２０８１６２１８０２００２１４２０６２２８２６８２２６２４２２５６２７０２９６２８０３２４２９０３３８３５２３６６０．５８０．６００．２６２．１５０．９００．９８０．７２０．２７０．２６０．１９０．３５０．５７５．４４７．８３０．８４０．４２３．０３０．４８０．３１０．５２３０．９７０．５１０．８１２６．７６０．２３０．３６０．２００．２１０．１７辛酸１０．００苯并呋喃１０．１８２．乙基．３．甲基．马来酰亚胺１１．０５壬酸１１．５１４一乙烯基一２一甲氧苯酚１２．５２癸酸１２．９９香草醛１３．６８香叶基丙酮１３．７７２一甲氧基４－丙烯基酚１４．０４十一碳酸１４．２９１５．０３１５．２０５．６．环氧化－１３．紫罗兰酮５一羟基－３－甲基茚酮一１。¨名ｕ（４Ｈ）苯并呋喃Ｃ－她．０。１５．７７十二碳酸Ｃ，此扣ｚ１６．３１十三碳酸１６．９７３．氧化．１３一紫罗兰酮Ｃ。３Ｈ。８０。Ｃ－。Ｈｚ８０ｚ１８．４３十四碳酸１９．３４６，１０，１４一三甲基十五酮－２Ｃ。。Ｈ３６０１９．４７十四碳烯酸一１ＣｔｔＨ２６０２１９．７０十五碳酸ＣｔｓＨ２００２Ｃ。６Ｈ３２０ｚ２１．２４十六碳酸２２．１７十七碳酸Ｃｔ，Ｈ３４０ｚ２２．６７叶绿醇Ｃｚ扎００２３．２６十八碳二烯酸／亚油酸Ｃ。８Ｈ３如Ｃ”Ｉ－１４８２４．７６二十三烷２５．０３甲氧基肉桂酸辛酯Ｃ。ｌｌＨ：。０３Ｃ。。Ｈ５０２５．８９二十四烷Ｃ２ｄ－Ｉｓｚ２７．２７二十五烷２８．９８二十六烷Ｃｚ６Ｈ５Ｉ５，６，、乙２警化一４，４，７ａ·三甲基一２四山东省医学科学院研究生毕业论文四２．４．３．３分析数据显示胡颓子叶挥发油的主要成分为脂肪酸类化合物（７４．５７％）。其中十六碳酸的含量最高（３０．９７％），其次为十八碳二烯酸（２６．７６％），再次是十二碳酸（７．８３％）。芳香烃（６．０４％）、烷烃（Ｏ．８１％）、醛（Ｏ．７２％）、酮（２．３２％）、酯（０．３６％）、酚（１．１６％）、醇（Ｏ．８１％）和胺类（Ｏ．２６％）等所占的比例较小。２．４．４讨论上述分析结果表明，胡颓子叶挥发油中主要化合物为十六碳酸、十八碳二烯酸和十二碳酸，三者占总挥发油成分的６５．５６％。胡颓子叶挥发油中脂肪酸类化合物居多，这与一般植物挥发油成分中都含有大量的萜类和芳香化合物不同。与同科沙棘属植物沙棘的挥发油成分相近似啪一钉，主要成分均为脂肪酸类化合物，且亚油酸和棕榈酸的含量都很高。挥发油是一类重要的活性成分，除了用于医药行业，还应用于香料、化妆品和烟草行业，近年来不断有各种挥发油新作用及新应用的报道。胡颓子科共有两个属，沙棘属和胡颓子属，沙棘属植物已经得到了广泛的开发与研究，而胡颓子叶作为珍贵的药食两用药材，无论从深度还是广度来说都有待于开发和研究。为充分发挥我国中药资源丰富的优势，开拓新药源，本文应用ＧＣ—Ｍｓ技术对胡颓子叶的挥发油成分进行了研究，以期为胡颓子叶的开发利用提供进一步的实验依据。四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四第三章胡颓子叶生物活性的初步研究３．１胡颓子叶提取物的祛痰作用的试验观察３．１．１胡颓子叶的提取对胡颓子叶以５０％的乙醇分别以１２倍量和１０倍量提取２次，每次煎煮２个时，合并滤液回收溶剂。药渣再加１０倍量水前煎煮２小时，与前述浓缩液合并继续浓缩，浓缩到一定程度加１０倍量水沉淀，上清液浓缩，沉淀混悬，分别送去药理试验室做祛痰作用试验。３．１．２胡颓子叶提取物祛痰作用试验选用昆明种雄性小鼠３０只，体重２０－２２９，随机分为胡颓子叶Ａ提取物组（７６９／ｋｇ）、Ｂ提取物组（５６９／ｋｇ）和正常对照组。每日灌胃给药一次，连续７天，灌胃体积０．５ｍＬ／２０９，对照组灌胃等体积的蒸馏水。末次给药后３０分钟，分别腹腔注射５％酚红生理盐水０．５ｍＬ／２０９，３０分钟后颈椎脱臼处死，迅速用５％ＮａＨＣＯ。灌洗小鼠气管、支气管３次，每次０．５ｍＬ，收集灌洗液共１．５ｍＬ离心。表３．１胡颓子叶提取物的祛痰作用（Ｘ±ＳＤ，ｎ＝ｌＯ）·Ｐ＜Ｏ．０５，与对照组比较从表中结果可以看出，胡颓子叶Ｂ提取物组（５６９／ｋｇ）酚红分泌量与对照组比较有明显增高，说明胡颓子叶Ｂ提取物可以增加气管、支气管粘膜的分泌功能，使痰液粘度下降，易于咳出，从而起到祛痰的作用。Ａ提取物组（７６９／ｋｇ）有增加气管、支气管粘膜的分泌功能的趋势，但与对照组相比无显著差别。胡颓子叶Ａ提取组与Ｂ提取物组相比，无明显差别。故最终使用哪种工艺，需要斟酌。药物剂量确定：Ａ提取物组：１ＩＩｌＬ药液相当于生药３．０５９，原液稀释后给药ｌｍＬ。Ｂ提取物组：ｌｍＬ药液相当于生药２．２４９，由于有沉淀，原液无法给药，故四山东省医学科学院研究生毕业论文四对倍稀释后给药１ＩＩｌＬ。３．２山柰酚一３一沪１３一Ｄ－６一Ｄ．（对羟基桂皮酰基）一吡喃葡萄糖苷内皮细胞保护作用的观察摘要：观察山柰酚一３．Ｏ－１３．Ｄ．６．ｏ－（对羟基桂皮酰基）．吡喃葡萄糖苷对体外培养的人脐静脉内皮细胞株ＥＣＶ３０４白蜘胞保护作用，经过初筛、复筛，结果显示该样品均对Ｈ２０２所致内皮细胞损伤无保护作用；却有细胞毒性作用，显示其可能有抗肿瘤活性。３．２．１材料与方法３．２．１．１药品及试剂：供试样品（Ｆｕ．１）是从胡颓子叶分离纯化得到的山柰酚．３．Ｏ－１３…Ｄ６Ｏ一（对羟基桂皮酰基）．吡喃葡萄糖苷纯品，该样品用二甲基亚砜溶解，以ＰＢＳ配成ｌｍＭ母液贮存。用时以培养基稀释成所需浓度。ＲＰＭｌｌ６４０培养基：美国ＧＩＢＧＯ公司生产。二甲基亚砜：天津化学试剂一厂，批号：９７０８２１。ＭＴＴ．－Ｓｉｇｍａ公司生产，山东生化试剂中心分装。其它试剂为国产分析纯。３．２．１．２细胞：ＥＣＶ３０４内皮细胞系由本室传代保存，使用含１０％ｄｘ牛血清的ＲＰＭｌｌ６４０培养基，置Ｃ０２培养箱内培养。３．２．１．３仪器：Ｆｏｒｍａ３１１ｌ水套式二氧化碳培养箱：美国Ｆｏｒｍａ公司生产。Ｗａｌｌａｃｌ４２０多功能标记分析仪、９６孔板：丹麦制造。３．２．１．４细胞培养及药物作用：取指数生长期的细胞经洗涤后，用Ｏ．１２５％胰酶消化计数，调整细胞数５×１０４／ｍＬ接种于９６孔板内，每孔Ｏ．１５ｍＬ，置Ｃ０２孵箱内培养。２４小时后加药。供试样品浓度均为５０肛Ｍ；作用３０ｍｉｎ后，加入损伤剂Ｈ２０２致终浓度为１５０ｐＭ。每个浓度设１个复孔，并设空白对照和损伤模型。３７℃二氧化碳孵箱内培养１６小时，以ＭＴＴ法测定ＯＤ值，检测细胞的存活陋捌。３．２．１．５细胞存活率的计算：细胞终止培养后，每：Ｊ：ＬｊＪｎ入１０１．ｔＬＯ．５％ＭＴＴ置Ｃ０２孵箱，４小时后倾去孔内液体，每：Ｊ：ＵＪｎ入二甲基亚砜０．２ｍＬ，充分振荡使蓝紫色甲臌溶解。于多功能标记分析仪测定ＯＤ５６０。以ＯＤ５６０的均值表示细胞存活活性。四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四３．２．２结果模型组以Ｈ２０２孵育内皮细胞１６小时后，细胞形态发生明显的变化，细胞皱缩、变圆的比例增加，出现大量漂浮细胞（图片未列出），表明模型成功。对细胞存活活性检测表明，对照组细胞生．长正常，细胞的存活数明显高于Ｈ２０２模型组。Ｆｕ－１样品处理后，细胞损伤比模型组加重，说明该样品在损伤处理状态下有细胞毒性的作用。１．４０１．２０１．０００．８００．６００．４００．２００．００ＣＯｌｔＭｏｄＦｕ＿ｌ图３．１药物对Ｈ２０２所致细胞存活活性的影响｝Ｐ＜０．０５，与模型组相比３．２．３讨论本试验中我们首先进行了Ｈ２０２对ＥＣＶ３０４细胞不同损伤程度的试验，结果显示Ｈ２０２可浓度依赖性的使内皮细胞损伤加重，１００９Ｍ以至４５０１．ｔＭ损伤１６ｈｒ可造成不同程度的内皮损伤模型。本试验选择了１５０和４００１．ｔＭ分别作为轻度和重度的损伤模型，结果显示该浓度的模型很成功。同时对药物准备来看，本试验采用了高温灭菌的方式对药物进行除菌。其优点是可节省药物，效率高。但其不利的一面是对容易氧化的药物易使其在高温过程中产生氧化。结果显示供试样品对内皮细胞无内皮保护作用，相反该样品（Ｆｕ－１）却有细胞毒性作用，推测这两药可能具有抗癌活性。建议下一步验证对肿瘤细胞的细胞毒活性和其对肿瘤动物模型的抗癌活性。３．３五种样品对体外肿瘤传代细胞株细胞毒作用的试验观察摘要：观察五种样品对体外肿瘤传代细胞株Ｉ－ｌｅｌａ（＾撬）、ＳＧＣ－７９０１（人胃癌）２种细胞细胞毒的作用。通过对２种样品（浓度为１００ｕｇ／ｍＬ）初试结果，选择对细胞ＳＧＣ－７９０１（人胃癌）和Ｉ－Ｉｅｌａ（＾毓）有一定的抑制作用，其ＩＣ５０值见下表。以上细胞抑制率在４０％以上样品做复试。复试结果５个样品分别对体外肿瘤传代四山东省医学科学院研究生毕业论文四３．３．１材料３．３．１．１药品及试剂：５种样品由从胡颓子叶分离纯化得到，分别用二甲基亚砜溶解，用含１５％小牛血清ＲＰＭＩ１６４０培养基配成ｌｍｇ／ｍＬ。用时稀释成所需浓度。ＲＰＭｌｌ６４０培养基：美国ＧＩＢＧＯ公司生产。二甲基亚砜：天津化学试剂一厂，批号：９７０８２１。ＭＴＴ：Ｓｉｇｍａ公司生产，山东生化试剂中心分装。３．３．１．２细胞：Ｈｅｌａ（人害霸畜）、ＳＧＣ－７９０１（人胃癌）细胞系，均由药哩彭靳糯使辟拾１５％小牛血清的ＲＰＭｌｌ６４０培养基，置Ｃ０２培养箱内培养。３．３．１．３仪器：Ｆｏｒｍａ３１１ｌ水套式二氧化碳培养箱，美国Ｆｏｒｍａ公司生产。Ｗａｌｌａｃｌ４２０多功能标记分析仪，美国。９６孔板：丹麦制造。３．３．２方法３．３．２～细胞培养及药物作用：Ｈｅｌａ（人撬）、ＳＧＣ－７９０１（人勖高）细懒为贴壁细胞，取其指数生长期的细胞经洗涤后，用０．２５％胰酶消化后计数，调整细胞数为１×１０５／ｍＬ接种于９６孔板内，每孔Ｏ．１ＩＩｌＬ，置ＣＯ。孵箱内培养。培养２４小时后加药。受试物用二甲基亚砜溶解用含１５％ｄ、牛血清ＲＰＭｌｌ６４０培养基配成ｌｍｇ／ｍＬ。作用于Ｈｅｌａ、ＳＣ，Ｃ－７９０１受试药物的最高剂量组药物浓度均为１００按２倍依次稀释至６．２５１．ｔｐｇ／ｍＬ，ｇ／ｍＬ，共５个剂量组。每个浓度设三个复孔，并设空白对照孑Ｌ。在３７℃二氧化碳培养箱内培养４８小时后，用ＭＴＴ方法测定ＯＤ值，计算细胞抑制率。３．３．２．２细胞抑制率的计算：细胞终止培养后，每孔加入１０ｕＬ０．５％ＭＴＴ置Ｃ０２孵箱内，４小时后取出倾去孔内液体加入二甲基亚砜（Ｏ．２ＩＩｌＬ／孔），充分振荡，使蓝紫色甲躜溶解，于多功能标记分析仪５３０ｎｍ波长处记录ＯＤ值，采用不同浓度受试药物三复孔ｏＤ值的均值计算细胞的抑制率及ＩＣ５０。见下表。表３．２五种样品对不同细胞株的初试抑制作用及ＩＣ５０四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四注：山柰酚一３一Ｄ＿Ｂ—Ｄ一６一Ｄ－（对羟基桂皮酰基）一吡喃葡萄糖苷（Ｗ６）、葛花苷（Ｗ７）、甲基肌醇（Ｗ８）、３７一Ｄ－甲基鞣花酸－４－ａ－Ｌ－鼠李糖苷（ｗ９）、３７一甲氧基槲皮素（ＷｌＯ）。３．３．３结果试验结果表明５个样品均对体外肿瘤传代细胞ＳＧＣ－７９０１（人勖毫）和Ｈｅｌａ（人宫颈癌）有抑制作用。其中Ｗ６和ＷｌＯ两个样品有明显的细胞毒作用（根据新药临床前研究指导原则Ｈ引，植物提取物ＩＣ５０≤３０ｕｇ／ｍＬ认为有一定细胞毒作用）。建议课题组对样品的化学结构及特性进一步了解，对其样品进行其它药理活性筛选。四山东省医学科学院研究生毕业论文四结语本研究论文主要获得如下阶段性研究成果：１、对国内外关于胡颓子属植物的化学成分、药理活性和药用价值方面研究成果进行了简要的文献综述，并在此基础上设计了研究方案，确定了研究内容。从胡颓子叶的乙醇提取液中分离得到１８个化合物，通过理化常数测定和光谱数据分析等手段鉴定了其中１６种化合物的结构，分别正三十一烷（Ｉ），Ｂ．谷甾醇（ＩＩ），羽扇豆醇（ＩＩＩ），豆箔一４一烯一３，６一二酮（Ⅳ），水杨酸（ｖ），没食子酸ⅣＩ），香草酸（ＶＩＩ），山柰酚（ＶＩＩＩ），山柰酚一３－Ｏ－Ｂ…Ｄ６ｏ－（对羟基桂皮酰基）一吡喃葡萄糖苷（田，甲基肌醇（Ｘ），胡萝卜苷ＣＸＩ），槲皮素ＣｘＩＩ），３７一甲氧基槲皮素（ＸＩＩＩ），葛花苷（ｘｉｖ），３’．Ｏ－甲基鞣花酸．４一Ｏ－ａ．Ｌ．鼠李糖苷ＱＷ），山柰酚一７—０－－Ｂ—Ｄ一吡喃葡萄糖苷（ＸＶＩ）。其中，化合物Ⅳ，Ｖ，ＶＩ，ＶＩＩ，ＶＩＩＩ，ＩＸ，ＸＩ，ＸｌＩ，ＸｌＩＩ，ＸＩＶ，ＸＶ，ＸＶＩ为首次从胡颓子叶中分得，化合物ＸＶｌＩ，ＸＶＩＩＩ的结构正在鉴定中。２、另外还分析了胡颓子叶挥发油的成分，并从鉴定了其中的３０种成分。３、对胡颓子叶提取物和从中分得的主要化合物做了初步的生物活性筛选，为以后胡颓子叶的进一步开发奠定了一定的基础。四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四参考文献［１］中国科学院植物志编辑委员会中国植物志，第五十二卷第二分册北京：科学出版社，１９８３，卜６６．［２］彭国全，季梦成江西胡颓子属植物资源及开发利用研究江西农业大学学报，２００４，２６（１）：６４—６７．［３］陈新，川渝地区胡颓子属药用植物资源研究成都中医药大学学报，２００１，２４：４０－４２．［４］ＢｅｋｋｅｒＮＰ，ＧｌｕｓｈｅｎｋｏｖａＡＩ．ＣｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｃｅｒｔａｉｎｓｐｅｃｉｅｓｏｆｔｈｅＥ１ｏｆａｅ—ａｇｎａｃｅａｅｆａｍｉｌｙ．ＣｈｅｍｉｓｔｒｙＮａｔｕｒａｌＣｏｍｐｏｕｎｄｓ，２００１，３７（２）：９７—１１６．［５］李兆琳，陈宁，薛敦渊，等沙枣花挥发油化学成分的研究高等学校化学学报，１９８９，ｌ０（８）：８０６—８０７．［６］刘哗伟，邸多隆，王勤．沙枣花挥发油的化学成分及其指纹图谱韵研究食品科学，２００３，２４（７）：１１卜１１３．［７］，刘泽鹰，王沙枣树药用价值和有效成分研究的进展．中草药，１９８６。１７（７）：４１—４４．［８］ＰｅｌｌｅｇｒｉｎｉＣ，ＷｅｂｅｒＭ，ＢｏｒｓｃｈｂｅｒｇＨＪ．Ｔｏｔａｌａｎｄ（一）一ｉｓｏｅｌａｃｏｍｉｎｅ，ｔｗｏＥ］ａｅａｇｎｕｓｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆ（＋）一ＥｌａｃｏｍｉｎｅｈｉｔｈｅｒｔｏｕｎｎａｍｅｄＯｘｉｎｄｏｌｅＡｌｋａｌｏｉｄｆｒｏｍｃｏｍｍｕｔａｔａ．Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ，１９９６，７９（１）：１５卜１６８．［９］江发涛，谢建新，刘金荣，等．沙枣的营养成分分析及沙枣油的理化常数测定．石河子大学学报（自然科学版），２００２，６０：２０—２２．［１０］ＴａｇａｈａｒａＫ，ＫｏｙａｍａＪ，ＳｕｇｉｔａＴ，ｅｔａ１．ＣｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｔｈｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆｏｆｔｈｅｇｅｎｕｓＥｌａｅａｇｎｕｓ（Ｉ）：Ｏｎｇｅ＿订ｓ．ＳｈｏｙａｋｕｇａｋｕｔｈｅｌｅａｖｅｓｏｆＥ］ａｅａｇｎｕｓｐｕｎＺａｓｓｈｉ，１９８１，３５（４）：３４０—３４２．［１１］ＣａｏＳＧ，ＴｏｓｈｉｙｕｋｉＴ，ＭｉｚｕｏＭ，ｅｔａ１．ＦｌａｖｏｎｅｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓｆｒｏｍＥ］ａｅａｇｎｕｓＰｒｏｄｕｃｔＬｅｔｔｅｒｓ，２００１，１Ｂｏｃｋｉｉ（Ｅ］ａｅａｇｎａｃｅａｅ）．Ｎａｔｕｒａｌ５（１）：卜８．［１２］ＣａｏＳＧ，ＴｏｓｈｉｙｕｋｉＴ，ＭｉｚｕｏＭ，ｅｔａ１．ＦｌａｖｏｎｅｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓｆｒｏｍＰｒｏｄｕｃｔＬｅｔｔｅｒｓ，２００１，１５Ｅ］ａｅａｇｎｕｓｌａｎｃｅｌｌａｔａ（Ｅｌａｅａｇｎａｃｅａｅ）．Ｎａｔｕｒａｌ（４）：２１１－２１６．［１３］汪维云、高学玲．胡颓子属植物营养成分的测定和研究．天然产物研究与开．４ｌ－四山东省医学科学院研究生毕业论文四发．１９９６（３）：５２－－－５５．［１４］ＩｔｏＨ，ＭｉｋｉＫ，ＹｏｓｈｉｄａＴ．ＥｌａｅａｇｎｔｉｎｓＡ—Ｇ，Ｃ－ＧｌｕｃｏｓｉｄｉｃＥ１ｔａｇｉｔａｎｎｉｎｓｆｒｏｍＥ］ａｅａｇｎｕｓｕｎｂｅｌｌａｔａ．ＣｈｅｍＰｈａｒｍＢｕｌｌ，１９９９，４７：３６—５４２．［１５］ＲａｗａｔＵ，ＳａｔｉＳＣ，Ｓａｔｉ０Ｐ，ｅｔａ１．ＡｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅｇｌｙｃｏｓｉｄｅｆｒｏｍＥ］ａｅａｇｎｕｓ．ｕｍｂｅｌｌａｔａＴｈｕｎｂ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＩｎｄｉａｎＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙ，２００２，７９（４）：３８３—３８４．［１６］李玉山，李田，谭志鑫．长叶胡颓子降血糖、血脂及抗脂质过氧化作用的研究安徽医药，２００５，９（７）：４８９—４９１．［１７］肖本见，谭志鑫，李玉山．富硒长叶胡颓子根皮抗炎镇痛作用的试验研究，时珍国医国药，２００５，１６（４）：３１５—３１６．［１８］ＡｈｍａｄｉａｎｉＡ，ＨｏｓｓｅｉｎｙＪ，ＳｅｍｎａｎｉａｎＳ，ｅｔａ１．ＡｎｔｉｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅａｎｄａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｓｏｆＥ］ａｅａｇｎｕｓａｎｇｕｔｉｆｌｉａｆｒｕｉｔｅｘｔｒａｃｔ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０００，７２：２８７—２９２．［１９］ＲａｍｅｚａｎｉＭ，ＨｏｓｓｅｉｎｚａｄｅｈＨ，ＤａｎｅｓｈｍａｎｄＮ．ＡｎｔｉｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔＯｆＥ／ａｅａｇｎｕｓａｎｇｕｔｎｉａｆｒｕｉｔｓｅｅｄｓｉｎｍｉｃｅ．Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ，２０００，７２：２５５—２６２．［２０］ＨｏｓｓｅｎｅｉｎｚａｄｅｈＨ，ＲａｍｅｚａｎｉＭ，ＮａｍｊｏＮ．ＭｕｓｃｌｅｒｅｌａｘａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＥ／ａｅａｇｎｕｓａｎｇｕｔｉｆｌｉａＬ．ｆｒｕｉｔｓｅｅｄｓｉｎｍｉｃｅ．ＪｏｕｎｒａｌｏｆＥｔｈｎｏｐｈａｒｍ－ａｃｏｌｏｇｙ，２００３，８４：２７５—２７８．［２１］ＧｕｒｂｕｚＩ，Ｕｓｔｕｎ０，ＹｅｓｉｌａｄａＥ，ｅｔａ１．Ａｎｔｉ—ｕｌｃｅｒｏｇｅｎｉｃａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓｏｍｅｐｌａｎｔｓｕｓｅｄａｓｆｏｌｋｒｅｍｅｄｙｉｎＴｕｒｋｅｙ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｔｈｎｏｐｈａｒｍ－ａｃｏｌｏｇｙ，２００３，８８：９３—９７．［２２］伍杨，邓明会，林平．胡颓子熊果酸对小鼠免疫功能的影响．四川Ｉ中医．２００６，２４（３）３５～３６．［２３］李玉山．长叶胡颓子多糖对ＴＮＢＳ诱导大鼠结肠炎作用的研究．四川中医．２００６，２４（５）：２４～２５．［２４］ＳｈｏｌｉｃｈｉｎＭ，ｅｔａ１．１３ＣＮｕｃｌｅａｒｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅｏｆｌｕｐｉｎｅ—ｔｙｐｅｔｒｉｔｅｒｐｅｎｅｓ，ｌｕｐｅｏｌ，ｂｅｔｕｌｉｎａｎｄｂｅｔｕｌｉｎｉｃａｃｉｄ［Ｊ］．ＣｈｅｍＰｈａｒｍＢｕｌｌ，１９８０，２８（３）：１００６—１００８．［２５］袁久志，孙启时．蒙古栎化学成分的研究［Ｊ］．中国中药杂·４２—四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四志，１９９８，２３（９）：５４８—５４９．［２６］毛士龙，桑圣民，劳爱娜，等．宝兴矛甾体成分研究［Ｊ］．天然产物研究与开发，２０００，１２（５）：１４—１６．［２７］周伯庭，李新中，徐平声，等．广东紫珠地上部位化学成分研究（Ｉ）［Ｊ］．中南药学，２００４，２（４）：２３８—２３９．［２８］尹凯，高慧嫒，李行诺，等．皱皮木瓜的化学成分［Ｊ］．沈阳药科大学学报，２００６，２３（１２）：７６０—７６３．［２９］邹建华，杨峻山．短瓣金莲的化学成分研究［Ｊ］．中国药学杂志，２００５，４０（ｉ０）：７３３—７３５．［３０］周应军孙启时．巴东栎化学成分研究［Ｊ］．沈阳药科大学学报，１９９９，１６（３）：１９４－１９７．［３１］李宁，李铣，杨世林，等．过山蕨总黄酮的化学成分研究（１）［Ｊ］．沈阳药科大学学报，２００４，２１（２）：１０５—１０８．［３２］钟海军，陈纪军，王惠英，等．翻白叶的化学成分［Ｊ］．中草药，２０００，３１（７）：４８８—４９０．［３３］王明安，王明奎，彭树林，等．青檀树皮中的化学成分［Ｊ］．天然产物研究与开发，２００１，１３（６）：５－８［３４］ＨｉｌｌｅｒＫ，Ｇｉｌ—ＲｊｏｎｇＲ．Ｓａｐｏｎｉｎ／Ｓａｐｏｇｅｎｉｎ—ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｉｄａｇｏ［Ｊ］．ＨｅｒｂａＨｕｎｇ，１９８０，１９（１）：９１—９４．［３５］尹俊亭，仲英，孙敬勇，等．葛花化学成分的研究（１）［Ｊ］．中草药，２００６，３７（３）：３５０—３５２．［３６］丛浦珠．质谱学在天然有机化学中的应用［Ｍ］．北京：科学出版社，１９８７：５７ｉｎｔｈｅｇｅｎｕｉｓＳａｌ—［３７］丛浦珠，苏克曼．分析化学手册第九分册．质谱手册［Ｍ］．北京：化学工业出版社，２０００：２９３［３８］黄浩，赵鑫生，姜标．胡颓子科植物化学成分研究概况［Ｊ］．中草药，２００６，３７（２）：３０７—３０９［３９］杜然，张海燕，黄炜，等．藏药沙棘超临界Ｃ０２萃取挥发油组分的ＧＣ—ＭＳ分析［Ｊ］．时珍国医国药，２００７，１８（７）：１６６０—１６６１［４０］鄂征．组织培养技术：人民卫生出版社，１９８９．［４１］ＳｕｚｕｋｉＭ，ＡｏｓｈｉｂａＫ，ＮａｇａｉＡ．ＯｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｉｎｃｒｅａｓｅｓＦａｓｌｉｇａｎｄ四山东省医学科学院研究生毕业论文四ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ．ＪＩｎｆｌａｍｍ（Ｌｏｎｄ）２００６：３：１１．［４２］新药临床前研究指导原则．中华人民共和国卫生部药政局１９９３：７：１３９．中华人民共和国卫生部药政局１９９３．７：１３９［４３］四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四附录化合物Ｉ的ＥＩ谱化合物ＩＩＩ的１３Ｃ－ＮＭＲ－４５．四山东省医学科学院研究生毕业论文四化合物ＩＩＩ的１Ｈ－ＮＭＫＦ，－㈣№ｔ～…＾ｍＡ，ａ■啦●∞５－御ａＩ十毗■＿任㈣Ｍ■∞∞ｔ蛳Ｏｔ｝０∞∞枷孵０∞■“ｔＨ１３∞Ｏ—‘＊…ｔｄＤ㈣㈣－ｃ＂－－一０■■’ａ＂－—一·刚，供＂●瓤叫Ｄ曲帅¨一一日■●●Ｂ口。Ｈ·一Ｐ坩螂：萱●口ｅ■ｔ，２·＾堆瑚”口滞啦ｔｔ’，ｘ憎一¨０ｌ∞∞ＩＩ●●ｑ佃■■ｐ●以■，■ｔ∽㈨●啸Ｏ∞ｍ，Ｉ瑚鞴№二＿１—…１—。’忑…’，品。一一磊…一，磊１…’，５ｅ’…。‘矿’——葛…—’ｊ＿一’矗１一—’１’■”斗３∞咄●化合物ＩＶ的１３Ｃ—ＮＭＲ－４６－四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四ｇｇｉ；§§§§翳ｇｉｉｉ§§；ｌｌ！；２§≥嚣…一善；～～ｈ～～～一Ｐ一一一一一…。。。ｅ。口。。＿一岫戡遘掣逮蔷孛蝌妊彰旁∥龟』…“嘲”‘一一，．ｊＬ一一，Ｉ霞嬲蓊酒，ＩＬ化合物ＩＶ的１Ｈ－ＮＭＲ｝§；ｌｉｉ；；；ｌ；ｉｉ；ｉ；ｌｉｌｉｌｉ；强ｌｌ；ｉ；ｉ；ｉ；§ｉｌｌｉｌｉｌ；ｌｉ；ｉ；；ｉ；ｌ；ｉｉ篓…’一鼍。越≮ｋ澍Ｊ。蝎越谶粼吣避暑战造希黼；编冽锔聋多壶纱强＿…’瓷秀”乏…ｍ！但…一，、矾（汇一Ｘｉ｛ｌ醚蝴封Ⅺｊ豇一化合物ＩＶｌＨ—ＮＭＲ的放大谱四山东省医学科学院研究生毕业论文四三量墨吞是嚣言§ｌ＼川Ｖ鲫０‘Ｏ∞ｅ∞啪＂ｃＯｉ５㈣０＂ｃ…一ａｑ■ｌＥｔｆ；…●＂“９∞№……ａ■■ｎ嵋ｏｏ…－－眦？啊∞∞“，幢幻Ｏ’聱∞恍岫７２·ⅣⅢ…ｒ㈣Ｈ掰∞，轴帅神”６舵∞∽●“ｎ口Ｐ●＊ｔＰ，：＿—面一—可－忑一…五’一一Ｆ——百１—百…１厂１—吾——１∞２Ｍ－３】Ｂｉｅ㈣【－化合物Ｖ的１３Ｃ－ＮＭＲ吾ｌ叫划／１渺￡；§墨§ｌ；§§ｉ委兰ｉｌ参圣‘ｈ、ｈ…ｈ～ｈｒ…￡∞∞。ｏｚ～¨，㈣ＭＭ…一ＭＨ＾∞Ⅵ々％ｍｅ’ｊ睡；Ｏ獬Ｍｍ，＊Ⅺ４■蝌抻ｄ㈣●：州Ｏ∞∞啪－ｃ…·‘Ｃ－‘■■Ｉ”ｎ··－∞＂ｍ‘Ｍ“＂哪删∞■■ｐ，＂㈣ｎ’＂一０弛’０∞Ⅳ晴Ｍ＊撑：目’啼”跏＊●化合物Ｖ的ｎＨ－ＮＭＲ一４８－四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四晷§ｌｌ｜Ｎ∥》；ｉｉ｝Ｎ｜∥｜ｉｉ；§｜＼／吣Ｐ化合物Ｖ１Ｈ－ＮＭＲ的放大谱导彦蚤誊等兰詈嚣个￥∥一，ｌ磊１’＿。１——１＿—一：ｉ—ｆ一，矗一’品，…’—虿——己一－…ｉ…’１］ｆ—’—Ｔ≥：ｏ芎毫赫化合物ＶＩ的１３Ｃ－ＮＭＲ四山东省医学科学院研究生毕业论文四ｒＢ｛ＨＩ，ｍ（扣附～竹■；ｉ；｛｜：一ＦｊⅦ●．．·ｐ㈣ｌ●ＨＷ。吣心．舻∥＼Ｎ，／＼二∥＼／●Ⅲｍｔ§㈣ｌＩｏ＾‘ｍ㈣‘ｔⅢ●∞…＃∞Ｍ～Ｕ瑚Ⅸ●，㈣２∞；㈣…∞Ｏ∞Ⅻｗ■¨“Ｗ∞∞，Ｈ‘∞一ｒ一之￡嚣。：二湍乏ｍ●＿ｐｊ“Ｍ●Ｃ¨ｌ●Ｉ’雠蚺●５＊呻一八。＾恒ＥＩ斟≈，＊ｑ，口Ｈ…＇Ⅲ“－，口—、博七钆一鼓…化合物ＶＩ的１３Ｈ—ＮＭＲｆｕ－”Ｊｎ№ｃ·∞Ｆ２－ｋ捌Ｉ＂ｔＩ一，，－●ｔｎＩｑＴＦＩ■ｅ删Ｏ＿∞ｏｊ－＃Ｔｃ…㈣ｗｕＷ＿，■∞黼№‘ｌｍｚ∞■Ｏ¨ｍ●＊，５臻４１Ｉｍｌ一琳ｈ■Ｏ＊∞ｒ蛳埘二ｒ一“；；＿：，惭，¨●咐＿ｔ：嚣＝悻ＩｍＨｍ＂＿－·一ａ■■电●ｊ·－－·—一ｑ·＾’“¨ｌ＂Ｍ鲥Ｉ驯＊§●”＊。辩Ｉ钟∞ａＩ∞６舶“一”＿Ｄ｜０ｔ㈣●ｎ—丽——ｉ——■一”百～一—ｒ一飞＿—１■—１厂—ｉ——，化合物ＶＩＩ的”Ｃ—ＮＭＲ批撕啪划辟鹞Ⅲｍ∞ｃ琳●哪：∞●“●，新，¨●■帕四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四Ｉｎ佃０－ｄＥ瞻－器霎量；季葶晕蚕誉～ｌｌ¨㈣７７＿嘲“ｔＩ舅ｐ■１●＾■＇蛳－．ｗｐＯ●咕ａａＮ札嘲‘ｅ－㈣！¨●啪㈣¨ｔ翱，瑚■㈣ｍ●’”■＿０㈣‘Ｋ。＿。～０■■‘¨·一－…ｔＢｔ‘∞一”ｌ∞ｍｏ㈣口∞∞㈣Ｗ．Ｉ枷＿ｔ‘，。＾＇‘Ｍｍ，Ⅲ㈣Ｅ＃糖ｄ＿ｍ＿，ｍＭｔ●１№－，ｈ∞Ⅻ№化合物ＶＩＩ的１Ｈ—ＮＭＲ’Ⅱ‘：譬，ｑ？蚪￡端■｝～々％搿；ｆ’脚Ｍ●＂㈣％《ｔ＊≯２＂＂辘上“蹲∞＃‰ｑ＋Ｍ＃１％３ｗ“ｍ０％㈣｝＃＂’…ｑｗ＃∞‰铷％■＾‘《§Ｉ≈《…＾Ｗ《’啦ｉ，ｑｔｍ｛ｑｑ，‘…＊ｏ蕊一９”“１≮”“乞１％＇女㈣，■ｔ？焉≯“…“口●■‰＂……“≯自嗍镕％挫№¨¨＃《㈣ｐ∞∞０ｌ≈％■《”＃＊ｍ“《Ｍ。■§＃％｝∞Ｘｊｏ№☆㈣Ｉ｛■ｆ＃｝＃ｔ∥Ｍ｝，’，Ⅱ，一，鼢，ｆ’’；瑟…”：≥’。５：毒…’，辨’…。。’…毒７”‘碡一…。‘点４”ｉ；…１化合物ＶＩＩＩ的１３Ｃ－ＮＭＲ一ｋｑ＊ｍ‘。｛％…５１．四山东省医学科学院研究生毕业论文四ｌ｛心《／喵彬ｗ蛙邋扣Ｆｌ钿‘－●，●－●■＇＊≈ｑ咖么彰掣畜茹ｏ∥！沙≈·…ｎ●－㈣ｔｎ¨●＊ｌ¨５－州ｃＪ，ｏ舳＇０‘∞＇Ｈ’＃㈣■ｏ釉１翟’Ｔ＊ｘＷⅫＨ＂２¨ｗ㈣Ｈ●∞∞ｍ“㈣一●∞Ⅻ＂ｎ…一’Ｈ－一。ａ■●ｎ，ⅧＦ，－■’喇●●●■Ｍｆ’¨ｌ≈Ⅻ●ｔ＿∞■■●Ｉ－㈣ｔ●恺１．ｉｌ学ｑ岫ｄ＾】柳Ｈ＿，‘■Ｉ．一Ｊ山ｊ丝，，．Ｊ，斟．瑙，』，ｊ｜｜㈦玎一一一…一，…一，一，化合物ＶＩＩＩ的１Ｈ－ＮＭＲ备ｉｌｌ冕主！；、矿。缈ＶＶ至一，＿］ｉ［１…，一一一二ｙ２一ｊ缸ＩＩｌｉ一化合物ＶＩＩｌｌＨ—ＮＭＲ的放大谱－５２·四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四耄詈詈莒蚕耋暑毫§孝善誊言三卷乏誉耋巷篡暑蓦暑誊芝耋善誊蓦三詈墨萎耄塞磊荟量葛量聋嚣誊誊薹善丕三星呈篓萎三三兰三曼曼曼曼曼曼曼曼曼兰兰兰至差事霉享窨只：＝霉馨ｎ，ｗｍ—㈣…一萼飞。麓童溅ｍｍ．Ⅲ＝ｗ¨扣哪ｃ，＊∞９懂３●●ｏ¨＿一…ｐ■ｎＬｑ～～ｍ■ｍ＊㈨Ｗ∞●Ｉｇ●０ｎ●●■’２一■㈣…：ｎ＃＇㈣Ｈ＊瑚期批∞０晴：０一一●ｉ一—了一ｊ；ｉ’～＿一’一品，…一矗…广百…ｊ—ｒ甲己…一ｌ●，Ｏ啪～譬ｑＩ●∞’４瑚％＾’化合物ＩＸ的１３Ｃ－ＮＭＲ各ｉ§圣ｉ；§；ｉ；粪§§ｌｌ蕈誊黉虿ｉ§垒；蕈孽《§ｉ§§；！ｌｇ§ｉｉ；；；§ｉ§；Ｖ¨：ｍｍＰｍｍｍ…·～ａ■Ｈ¨一…≈·＾＇Ｈ●删＿－一，㈣２■口嘲ｍ■■■舢Ｗ≯增１＂＂㈣－Ⅷ－－∞－＾”ｔ●“－ｒｔⅧ■＿，ｃ●百一苴舡。一¨黼轧。必鲻，崩催化合物ＩＸ的１Ｈ－ＮＭＲ．５３．四山东省医学科学院研究生毕业论文四，§ｌ§ｉ奏耋善耋蚤；；ｌ；ｉ｜ｉｉ；；ｉｉｌｉ鲢葺毫誊暑三善奎毫蓥善吾霉兰圣兰三ＶⅫＮ沙Ｎ气妒Ｎ。、ｊ∥吣粼挝邋避龇∥８＝＝管苦；＝；，嚣篇毒ｇ毒：鲁：宅逍一一Ｍ。，制，ＷＭ……目．跹，一一土坠乩一量瞳乙化合物ＩｘｌＨ—ＮＭＲ的放大谱一膨￡§｝墓要２詈》；≥鲞；§＼。≮／ｆ／Ｎ妒∥ｎａ：一’磊……■蟊…１‘一五。…’磊…＿焉…１７品…占”—。’—石一‘’；譬一…化合物Ｘ的１３Ｃ－ＮＭＲ－５４—四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四馨～一嚣：…ｏ■■Ｂ……¨●＾ｈ，“●∞：娜，ｏ●ｈｎ一＾－ｃ●－…一’ＶⅥ，■日Ｉ口Ⅶｈ叫奢…●Ｏ＿●ｍｗ＂诤㈣，－㈣ｕ≈《铷瞄…’ｈ·∞ｍ；．，：～’－１～’＿ｒ‘化合物Ｘ的１Ｈ＿ＮＭＲＩｔ－７ｔ＿●ｎ＊”＊Ｍ＿｝；§ｇ§ｉ影＼／ｉ≮，聪铲Ⅻ：缈矽；墨萋耄蓦釜呈窘萋蓦点ｊ裔葶墨ｉ雹卺薹耄喜耄委塞量景霹量孽；嚣撼柱罩盆皇￥譬；；｛；；拿：羞；嚆乎畸彳置宅亏宝０霉兽爵一ｎｔｉ：ｌ劐一一幽Ｊｌ，．９ｍ＿０１ｎ“ｒ■Ｈ●竹０、］ｌ／。～一Ｌｎ型Ｌ矿＾＾Ｍ＊＊：睁啪肌口■ｄ＿～，“化合物Ｘ１Ｈ—ＮＭＲ的放大谱５５四山东省医学科学院研究生毕业论文四墨詈至票曼委量蚕导蕈量星Ｎｙ｝∥ｈ＾…＾口ｎ蓦景蓦霉罨薹～－！Ｎ／Ⅶｉ■●＇㈣…，。ｆ一∞Ｍ嚣，．日■ｗ＿Ｏ¨■－ｐ＇Ｃ：！＿ⅢⅧａｌ∞‘¨●ｃ：㈨●·１ｍ？‘㈣●●ｆ¨㈣±●一㈣¨ｃｏ：∞ｃ…Ｉ抬●’撑～··…·’㈣ｏ＂ｔ…～－··‘∞Ｉ㈣…－”ｒｊ㈨‘‘Ｍ…ｔ～，●∞㈣●”３ｊ瑚“ＥＨｔｅ－＿ｎ：，Ⅲ…’｝Ⅲｆｆ＂．ｅ｝－一＾１．，：’…：’ｍ’‘‘＊㈨一一一陲盼鹣……鲻簦……。∥……一’？化合物ＸＩＩ的１Ｈ－ＮＭＲ…卜１＿二Ｌ一ｄ孵ａ－ｄ６７２－Ｍ时】５ｎ１０ｎ—ｒ＿ｔ”●ｈｔｅ．却啪∞’雌０帅５－Ｃｐ’ＣＩ’｝‰％“＿ＴＤ∞娜５ｎＭ口∞１１蛳？”∞ＯⅫ‘∞一■揶Ｔ００００００∞埘二了一“＿ｎ”嚣ｒ一乏…ＣＨ■●ｔＬ●２…一！：：≯ｌ∞０１０删－口Ⅷｆ？·一Ｈｒ¨Ｉ加州ｔ●’，娜∞Ｉ柙ⅡＩ＊坩■■ｔ●ｆ，批∞Ｏ曲－，。＿—’１—忑ｆ一”ｊ品’’１—’Ｉ磊——１。—’了１。—’■五一７—’ｉｉ＿’——’矗一一一厅——’ｍＩ…’一化合物Ｘｌｌ的１３Ｃ－ＮＭＲ９㈣Ｉ·５６四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四ｆｌ卜ｌ＇１Ｘ，ｎ●面口－西”－哪ｌ：’＿ｈ’■ｔｔ●一●Ⅲ＊１目，Ｉ＊ＣⅢｊ萍Ⅶ蟹蟠㈣＿，劫棚ｔ’ｔ㈣∞∞ⅫＮｏ∞‘¨ｍｌ撙，，¨“一‘Ｅ—《科＇坤埘ｆ‘｝∞∞∞∞嘣●０却』呻ｃ僦＝一。。”’磊一毛＿＿“Ⅷ㈣：：ｒｄｑ岫Ⅲｐ∞＂¨¨Ｄｔ∞ｍ■々矿一矗一—１＿—百一’，ｒ一百一１ｉ——ｉ——ｒ—１ｒ…。≥－－＿＿＿－－＿－－－－＿－＿。●＿－●＿●＿＿－＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿●●－＿－＿。＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿－－●●＿－●－＿－＿＿－＿＿－－－●＿＿＿●＿＿＿＿＿●－＿＿＿＿＿＿＿＿＿●。－。。－＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿－－＿Ｈ●‘。。。。。。。。。。’。。‘。。。。’。’’。。’。。‘。。‘。。。。。’’。’１’一…化合物ＸＩＩＩ的１３Ｃ－ＮＩＶＩＲｆｕ·Ｉ，＇ＨＩｎ∞ｌｒｍ§鬻溅ｉ§ｉｉ＼『炒１７躲盼”ＶＶｍ＿¨ｔ■ｒ●时●一■ｂ－¨ｍｒⅢ口＊＾１●‘Ⅲ■■ｎｉ蝴咿幽《．。…一址一…一Ｌ一龃化合物ＸＩＩＩ的１Ｈ—ＮＭＲ５７四山东省医学科学院研究生毕业论文四¨■ｍ，∞¨…’＊｝ｔ·ｋ…‘Ｉ●Ｉ＂…Ｍ＊＾‘ｍｍ，口■ｍｎｒ＿ＴⅢ出－■Ｐ＊＿■ｆｍ●０＊∞１４ｋ∞㈨，Ｈｏ㈣瑟０＇Ⅲ㈣●∞一拼”２ｍａｏｏ咖●＃Ｏ∞∞㈣镰ｎ＊０一ｒ～．Ｉ．瑟。。毖：－—·一ｏ■＿‘ｔ？Ｈ－－～，ａＷ’ｍ啦Ⅵ内■Ｈ一蛳：啦＋ＣＯＢ■ｑ№ＩＩ口＿ｊｈ％…ｔ１＝＝ｒ１—’二ｆ…’—’忑Ｆ—’—’０Ｆ’１—■忑＿１矗ｆ’一磊一…——ｒ———’。：ｒ一”’—五’—一化合物ＸＩＶ的”Ｃ—ＮＭＲ㈣日㈣∞，Ⅳ，●Ⅲ口，∞＇●科＇＊“■…＂一ｐｌａｔＨｎ■ｎ¨ＩｌｈＩ１０化合物ＸＩＶ的１Ｈ—ＮＭＲ¨∞●啊ｗ＇∞ｍ≈００＋嘲＾㈣Ｉｍ＿５Ｓ四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四己一潋一一Ｈ姒ｘ二勘！厶Ⅸ化合物ＸＩＶｌＨ－ＮＭＲ的放大谱荟ｌｉ景色量ｉ；ｌｉｉｌｌｉ；ｌｉｉ；＼／ＮｆＶＷ飞ｉ％歹化合物ＸＩＶｌＨ－ＮＭＲ的放大谱四山东省医学科学院研究生毕业论文四§§ｇ§§§娶§§§ｉｉｓｇ！§§吾ｉ§兰ｇＨｓＷＮＮＶ笋蜂岁Ｖ．１ｌＩｌ。。＿Ｌ』．．ＩＩ渊一ｒ一生一ｒ绺掣—』一化合物ＸＶ的１Ｈ－ＮＭＲ㈣＃Ｍ●ｒＭ【ｍ●■Ⅲ＃，·枷Ｉ¨－ｔＦ＇舢Ⅻ●Ｆ㈣■“●■㈣…｝ＩＣＬ略Ｔ呻枷１２０１０埘■ｑⅡ１０∞一－Ⅲ－∞Ｉｍ”■●－－。圳－‘···一．１Ⅲ一‘∞一私Ｏ■｛∞∞㈣●■●●∞∞Ｏ∞Ｉ●●ｔ∞㈣＇‘‘’·＾＇¨●¨■川●’＂≈琳一¨Ｉ，Ⅲ＿■＿ｉｇｌｏｔｉｒｌｔ—㈣５哪肇∞■ｊ＿●＇‘＿ｉ目，Ｕ！［疆．。幽址选化合物ＸＶｌＨ－ＮＭＲ的放大谱－６０一四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四ｉ—１＿—丽——百——丁‘—Ｆ——广—１＿—百——ｒ化合物ＸＶ的１３Ｃ－ＮＭＲ■㈧ＨⅣ‘－ｍ＇ｍｔｍⅢ＊ｍ¨ｑ抛‘＊咿－０啪啪…∞Ｉｍ¨∞一．１ＩｌＬｕ．ＬＬｌｌ∞●∞‘：＇‘ｐｐｍ化合物ＸＶ的ＨＭＢＣ６１臼山东省医学科学院研究’ｔ毕业论文山化台物ｘｖ的ｔＮＢＣ放大潜化合物ｘｖ皓ＩＮＢＣ放大谱四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四ｆｈ－工２曩＿－ｃ工ｔ口阳ｏ—ｔ嵋化合物ＸＶ的ＨＭＢＣ放大谱’＇■■目黼～■■■●摊Ｍ。Ｍ＾＿№ｌ－＿■镕咄■腻嘶—４ｋ，＊＃¨‰㈣■－＿●‰＿＊｝●一＿％●，＊㈣●■％■ｍ＿…＃‰㈣”●Ｐ％自ｍｍ％“芸？…”粤ｒ＇ｌｌＦ乞：：≯％＇■ｍ，＿…∞¨抖∞■●■ｋ噌“目日＊％■‰Ｍ。＃’●Ｈ●●抖＊…＾＿＃＃№’慨｛ｍ＿＊＃＿■ｎｌ＊“●ｗ■删ｌ｜＿２｝｛；｜｜ｊｎ■ｈ’¨ｏ…”么…磊”’。鑫’…～～＆…磊…：…二’４。乏”一磊…ｏ●¨ｍ㈣～；阱…．蝴∞＿～”＿＂㈣ｌ辚镕。ｗ｛一●∞№一”化合物ＸＶＩ的１３Ｃ－ＮＭＲ６３四山东省医学科学院研究生毕业论文四ａＰ懈＿●＿－一ｔ●￥●一Ｈ＿…＋’■＇■■■一●■●，一■■－●＿’¨？－＿■’－＃％■ｋ¨１０Ｈｍ…●●ｎ…－－｝●…●ｈ●㈣…¨ｔ■＿＿Ⅲ＊＿¨”ｑ＿，…“”～＊＾●ｑｐ…一●’ｋ㈨＿■ｍ＿＿＿Ⅲ＿＿燃●ｒ●ｈｔ船一■…口－－■＊…‘●●‰”＃”月Ⅲ…。：篇∥扣。ｊ《，韶ｒ－取一—础－ｏ嚣１……ｑ一一。素！釜蕊≮；岛六獭４０《＿；拳ｉ，毵爹ｔ化合物ＸＶＩ的１Ｈ—ＮＭＲ≥；ｌｋ，¨■Ｌ＿ｑ■㈣～ｍ●＊ｔｍ■ｍ■■＿●●●■●十■＃㈣㈣＊＊“㈣’嘲嘟●ａ％自～ｏ‰％ｍ￥■＃《ｍ＃㈣㈨＃糍一“ｎ●一≈■■■。一一”＃￡■镕ｍｗ＿＃＿＿∞～＿：””…”嚣－％茹：｜≥茹麓ｂ…∥ｌ。…！｝：；钆Ｍｏ襄矽，：争¨，＂”；。移镰西¨饔秀；鬻’！鬟§；ｉｌｊｌｉ∥；一～…。一…＋～≮４。鬻秀寥．．ｊ。～＊矗。÷．化合物ＸＶｌｌＨ－ＮＭＲ的放大谱－６４．．四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四匀瓜】Ｑ综述［１］付义成，王晓静．胡颓子属植物化学成分及药理活性研究综述［Ｊ】．齐鲁药事，２００７（４）．胡颓子属植物化学成分及药理活性研究综述付义成，王晓静（山东省医学科学院药物研究所济南市２５００６２）［摘要］胡颓子属植物中主要化学成分有挥发油、萜类、生物碱、黄酮等；药理活性主要有降血糖血脂、抗脂质氧化、抗炎镇痛、免疫等。本文对该属植物化学成分及药理活性做一综述，为今后对该属植物做进一步开发和研究提供参考。［关键词］胡颓子属；化学成分；药理活性ＳｕｒｖｅｙｉｎｓｔｕｄｙＯｉｌＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓａｎｄＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＡｃｔｉｖｉｔｉｅｓｆｒｏｍｐｌａｎｔｓｏｆＥ／ａｅａｇＲＵＳＬＦＵＹｉ—ｃｈｅｎｇ，ＷＡＮＧＸｉａｏ－ｊｉｎｇ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，ＳｈａｎｄｏｎｇＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ，Ｊｉｎａｎ２５００６２Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｉＳｐａｐｅｒｐｒｅｓｅｎｔｓａｖｉｅｗｏｆｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｐｈａｒｍａｃ０１０９ｉｃａｌｓｔｕｄｙｏｎＥ１ａｅａｇＤＵＳＬ．ａｎｄｇｉｖｅｓａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｆｕｔｕｒｅ’Ｓｆｕｒｔｈｅｒｒｅｓｅａｒｃｈ．Ｅ／ａｅａｇｎｕｓＬ．ｃｏｎｓｉｓｔｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｓ，ｔｅｒｐｅｎｅ，ａｌｋａｌｏｉｄ，ｆｌａｖｏｎｏｉｄ，ｅｔｅ，ａｎｄｈａｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｌｏｗｅｒｉｎｇｓｅｒｕｍｌｉｐｉｄ，ｇｌｕｃｏｓｅａｎｄａｎｔｉ—ｌｉｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ，ａｓｗｅｌｌａｓＡｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙａｎｄａｎａｌｇｅｓｉｃａｎｄｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃｆｕｎｃｔｉｏｎｓ，ｅｔｃ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｅ］ａｅａｇｎｕｓＬ．；ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ；ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ胡颓子属饵ｌａｅａｇｎｕｓＬ．）植物在全世界约有８０种，在我国约有５５种，为常绿或落叶灌术或小乔术，直立或攀援．通常具刺，主要分布在长江流域及其以南地区，植物资源比较丰富。该属好多植物有药食两用价值，其中做为药用的约为２０种，历代本草均有记录，如《本草纲目》中记载“胡颓子叶治：肺虚，短气。”《中藏经》记为“治喘嗽上气。＂ｎ１另外，胡颓子果实营养丰富，现在已有将胡颓子果实开发成天然饮料的加工工艺的研究报道乜１。１、化学成分１．１挥发油类化合物胡颓子属植物的花中一般含挥发油较多，有芳香气味较浓作为天然香料．四山东省医学科学院研究生毕业论文四如沙枣的花中含有几十种挥发油成分，其主要组分为肉桂酸的衍生物∞１。１．２萜类化合物赵鑫等‘钔从胡颓子叶中分得羽扇豆醇（１ｕｐｅ０１）、齐墩果酸（ｏｌｅａｎｏｌｉｃａｃｉｄ）。娄方明等芦】从长叶胡颓子中分得熊果酸。另外还有报道的山楂酸以及桦木醇。１．３生物碱类化合物主要为１３一卡啉类和羟吲哚类生物碱，现在已从沙枣根皮中分离出８个生物碱类成分，包括：哈尔曼（ｈａｒｍａｎ）、二氢哈尔曼（ｄｉｈｙｄｒｏｈａｒｍａｎ）、２一甲基一１，２，３，４一四氢一Ｂ一卡啉（２一ｍｅｔｈｙｌ一１，２，３，４一ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃａｒ—Ｂ—ｃａｒｂｏｌｉｎｅ）、胡颓子碱（ｅｌａｅａｇｎｉｎｅ）、四氢哈尔醇（ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｈａｒｍ０１）、Ｊ『ｖ一２甲基四氢哈尔醇（』ｖ一２ｍｅｔｈｙｌｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｈａｒｍ０１）、哈尔明（ｈａｒｍｉｎｅ）及哈尔醇（ｈａｒｍ０１）阳，７］ｏＳｌｙｗａｋ等随３从变化胡颓子根皮中还分离得到１一异丁基一１，２，３，４一四氢一Ｂ一卡啉ｏ１．４黄酮类化合物Ｃａｏ等阳３从长叶胡颓子中分离得到包括山柰酚一３一Ｄ—Ｂ—Ｄ一（４”一Ｄ一４一香豆酰基）葡萄糖苷等。然后他们又从披针叶胡颓子的叶中发现了２个香豆酰基代葡萄糖的黄酮醇的苷类化合物ｎ们。赵鑫等ｎ妇从胡颓子叶中分离得到３，５一二羟基一４７，７一二甲氧基黄酮，３一甲氧基山柰酚，３，３’一二甲氧基槲皮素。徐裕彬，国兴明等ｎ２３从牛奶子中分得芦丁（ｒｕｔｉｎ）、槲皮素（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）。１．５甾醇类化合物目前报道的主要是Ｂ．谷甾醇（１３一ｓｉｔｏｓｔｅｒ０１）【４】。１．６有机酸类化合物该属植物中普遍存在没食子酸、咖啡酸、香豆酸、芥子酸、阿魏酸、鞣花酸和绿原酸等。１．７氨基酸及微量元素汪维云、高学玲ｎ３３利用氨基酸自动分析仪法测得胡颓子、木半夏及牛奶子的果实中含有多种氨基酸。尤其人体必需的几种氮基酸（苏氨酸、蛋氨酸、缬氮酸、异亮氪酸、亮氮酸、苯丙氨酸、组氨酸等含量也很高。他们又用原子吸收法测出果实中含有Ｚｎ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｃｕ和Ｋ等微量元素。１．８其他化学成分皂苷、强心苷、糖、鞣质、葸醌等ｎ４１。四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四２、药理活性２．１降血糖血脂、抗脂质氧化作用李玉山、李田等ｎ朝以高胆固醇高脂饲料诱发高脂模型大鼠，四氧嘧啶致糖尿病小鼠，应用长叶胡颓子果实水煎液进行实验观察。检测空腹血糖、血脂及血清脂质过氧化产物各项指标水平。发现长叶胡颓子果实具有抑制高脂血症大鼠血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白的升高，降低丙二醛、活性氧，增强超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物活力的作用，可使糖尿病小鼠空腹血糖降低。可能的作用机理是（１）胡颓子果实能加速体内血脂的代谢、转化和排泄的作用：（２）通过提高选择性抑制肠道对胆固醇的重吸收作用或者抑制内源性肝胆固醇的合成，而降低血清胆固醇：（３）胡颓子果实中多糖、生物类黄酮等，通过对小肠双糖酶活性的抑制，缓解食物在胃肠道消化和吸收而达到降低血糖的作用：（４）影响体内调节血糖的某些激素使血糖水平下降。２．２抗炎镇痛作用肖本见等ｎ∞用小鼠分组进行对照试验，结果发现富硒长叶胡颓子果实的水提‘液和醇提液对二甲苯所致小鼠耳廓炎症和角叉菜胶引起大鼠足肿胀有明显的抑制作用。其抗炎成分可能是有机酸中咖啡酸的衍生物，调节免疫作用的成分可能与其果实中含丰富的生物类黄酮及含硒成分有关。２．３平喘作用胡颓子叶其味酸、性平，有敛肺、平喘、止咳功能。中医将其用于治疗咳嗽气喘，咯血【１７】。杭州中药厂生产的中成药治喘片主要是以胡颓子叶为原料，海珠喘息片及消炎止咳片的配方中也有胡颓子叶ｎ巩１９１。以胡颓子叶注射液用喷雾法直接作用于慢性喘息性气管炎患者的支气管粘膜，平喘有效率为９２．１％；穴注法有效率为８１．８％。胡颓子叶临床口服给药也有平喘效果，但目前其作用机制还有待阐明。２．４免疫及抗癌作用胡颓子熊果酸能促进脾细胞增殖反应，对脾细胞ＩＬ一２、ＩＦＮ—Ｙ的产生有显著促进作用。伍杨、邓明会呦３等用小鼠分组进行分组对照试验。他们先常规制备小鼠脾细胞混悬液，然后分组加入不同浓度的熊果酸纯品进行离心，最后取上清液进行统计分析得出熊果酸能促进小鼠脾细胞产生增殖影响（Ｐ＜０．０１），小鼠脾细胞培养上清液中ＣｏｎＡ诱生ＩＬ一２、ＩＦＮ—Ｙ（Ｐ＜０．０５）。这也可能是其抗肿瘤四山东省医学科学院研究生毕业论文四作用机制之一。２．５对结肠炎的作用长叶胡颓子多糖对结肠炎损伤有保护作用。李玉山乜¨从长叶胡颓子中提取出多糖果，然后建立大鼠结肠炎模型，灌胃用药２周后，发现大鼠结肠粘膜损伤指数及结肠髓过氧化物酶活性降低，丙二醛的含量减少，超氧化物歧化酶的活性提高，使显著升高的细胞肿瘤因子、白细胞介素一８水平下降、细胞介素一１０水平升高，并与用药剂量呈量效关系。３、结语胡颓子属植物在我国种类多，分布广，但目前有关胡颓子属植物的文献报道还比较少，主要是围绕长叶胡颓子、富硒长叶胡颓子、胡颓子及牛奶子等几种植物。该属植物化学成分主要是黄酮、有机酸及微量元素，这也可能是其临床作用的基础。对其药理活性研究，一般是以植物的某个部位进行（如根、叶等），其所含化学成分与药理活性之间的关系还有待阐明。所以，如何充分利用我国丰富的胡颓子属植物资源，特别是将其开发成有临床应用价值的药物，还有很多工作需要做。参考文献［１］中药辞海．中国医药科技出版社．第二卷：１３２１［２］高学玲汪维云．胡颓子果汁饮料加工工艺研究．２００６，２０（５）：４０～４１．［３］高等学校化学学报．１９８９，１０（８）：８０４．中国野生植物资源［４］赵鑫，黄浩，朱瑞良．中药胡颓子叶的脂溶性化学成分研究．中成药．２００６，２８（３）：４０３～４０５［５］娄方明，杨娟，白志川等．长叶胡颓子根茎化学成分研究Ｉ．中国中药杂志．２００６，３１（１２）：９８８～９８９［６］ＺｈａｎｇＷＮ，ＬｉｕＺＹ，ＷａｎｇＺＭ．Ａｄｖａｎｃｅｓｉｎｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆａｃｔｉｖｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆ４１＂－－＇４４．Ｓｈａｚａｏ［Ｊ］．ＣｈｉｎＴｒａｄｉｔＨｅｒｂＤｒｕｇｓ，１９８６，１７（７）：［７］ＳａｌｍＲＦ，ＺｉｎｓｍｅｉｓｔｅｒＨＤ，ＥｉｃｈｅｒＴ．Ｎｉｔｒｏｇｅｎ—ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｃｏｍｐｏｕｎｄｓｍｏｓｓｆｒｏｍｔｈｅｆｏｎｔｉｎａｌｉｓｓｑｕａｍｏｓａ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９８，４９（３）：８８７～８９２．四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四［８］ＳｌｙｗａｋａＧＷＡ，ＬｏｃｏｃｋＲＡ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆａｎｅｗｂｅｔａ—ｃａｒｂｏｌｉｎｅａｌｋａｌｏｉｄｆｒｏｍＥ］ａｅａｇｎｕｓｃｏｍⅢｕｔａｔｅ［Ｊ］．ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ，１９６９，５３：４６３５～４６３８．［９］ＣａｏＳＧ，ＴａｎａｋａＴ，ＭｉｚｕｎｏＭ，ｅｔａ１．ＦｌａｖｏｎｏｌｇｌｙｃｏｓｌｄｅｓｆｒｏｍＥ］ａｅａｇｎｕｓｂｏｃｋ—ｉｌ（Ｅｌａｅａｇｎａｃｅａｅ）［Ｊ］．ＮａｔＰｒｏｄＬｅｔｔ，２００１，１５（１）：１２８．［１０］ＣａｏＳＧ，ＴａｎａｋａＴ，ＭｉｚｕｎｏＭ，ｅｔａｌｌＦｌａｖｏｎｏｌｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓｆｒｏｍＥ］ａｅａｇｎｕｓｌａｎｃｅｏｌｌａｔａ（Ｅｌａｅａｇｎａｃｅａｅ）［Ｊ］．ＮａｔＰｒｏｄＬｅｔｔ，２００１，１５（４）：２１１～２１６．［１１］赵鑫，朱瑞良，姜标等．胡颓子有效部位化学成分研究．中国中药杂志．２００６，３１（６）：４７２－－－，４７３．［１２］徐裕彬，国兴明，周杰等．牛奶子根化学成分的分离与测定．山地农业生物学报．２００５，２４（２）：１３８，－－－－１４１．［１３］汪维云、高学玲．胡颓子属植物营养成分的测定和研究．天然产物研究与开发．１９９６（３）：５２～５５．［１４］陶晶、苏李等．抗逆性灌木树种银葛药用成分初步研究．吉林林业科技．２００６，３５（３）：３４～３８．［１５］李玉山、李田等．长叶胡颓子降血糖、血脂及抗脂质过氧化作用的研究．安徽医药．２００５，９（７）：４８９＂－＇４９１．［１６］肖本见，谭志鑫，李玉山．富硒长叶胡颓子根皮抗炎镇痛作用的试验研究．时珍国医国药．２００５，１６（４）：３１５～３１６．［１７］张银娣，肖继震，唐瑜零等．胡颓子叶提取物平喘作用的初步研究［Ｊ］．中草药，１９８１，３６（总２８２页）．Ｅ１８］２ａ．江苏新医学院编．中药大词典［Ｍ］．上海：上海人民出版社，１９７５；［１９］陈新．川渝地区胡颓子属药用植物资源研究［Ｊ］．成都中医药大学学报，２００１，２４（２）：４０＂－－－４２．［２０］伍杨，邓明会，林平．胡颓子熊果酸对小鼠免疫功能的影响．四川中医．２００６，２４（３）３５－－－３６．［２１３李玉山．长叶胡颓子多糖对ＴＮＢＳ诱导大鼠结肠炎作用的研究．四川中医．２００６，２４（５）：２４＂－－２５．四山东省医学科学院研究生毕业论文四攻读学位期间取得的研究成果［１］付义成，王晓静，贾献慧，李俊婕．胡颓子叶化学成分研究【Ｊ】．中草药，２００８（５）．胡颓子叶化学成分研究付义成王晓静宰李俊婕（山东省医学科学院药物研究所，山东济南２５００６２）摘要：目的研究胡颓子叶的化学成分。方法采用反复柱色谱方法进行分离，利用化合物的光谱学数据结合理化性质鉴定化合物的结构。结果分离并鉴定了１０个化合物：１３．谷甾醇（Ｉ）、羽扇豆醇（ＩＩ）、豆甾．４．烯．３，６．二酮（Ⅲ）、水杨酸（ＩＶ）、没食子酸（Ｖ）、香草酸（Ⅵ）、山柰酚（ＶＩＩ）、山柰酚．３．Ｏ．１３…Ｄ合物ＩＩＩ～Ⅸ为首次从该种植物中分离得到。关键词：胡颓子叶；化学成分；结构鉴定Ｓｔｕｄｉｅｓｏｎ６ｏ－（对羟基桂皮酰基）一吡喃葡萄糖苷（Ⅷ）、甲基肌醇（ＩＸ）、胡萝卜苷（Ｘ）。结论化ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｒｏｍｌｅａｖｅｓｏｆＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓＦｕＹｉ—ｃｈｅｎｇＷａｎｇＸｉａｏ—ｊｉｎｇ＊ＬｉＪｕｎ—ｊｉｅ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａＳｈａｎｄｏｎｇＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＪｉｎａｎＳｈａｎｄｏｎｇ２５００６２）ＡＢＳＴＲＡＣＴ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅｐｕｎｇｅｎｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆｌｅａｖｅｓｏｆＥｌａｅａｇｎｕｓＴｈｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｂｙｃｏｌｕｍｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄｔｈｅｉｒｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｗｅｒｅｅｌｕｃｉｄａｔｅｄｂｙｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓａｎｄｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃａｎａｌｙｓｉｓ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｅｎｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓＢ－ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ（１），ｌｕｐｅｏｌ（２），ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ一３一Ｄ…１３ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｅｎｅｄｉｏｎｅ（３），ｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ（４），ｇａｌｌｉｃａｃｉｄ（５），ｖａｎｉｌｌｉｃａｃｉｄ（６），ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ（７），Ｄ６－Ｏ一⑦－ｈｙｄｒｏｘｙｃｉｎｎａｍｏｙｌ）－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ（８），ｂｏｍｅｓｉｔｏｌ３ｔｏ９ａｒｅ（９），ｄａｕｃｏｓｔｅｒｏｌ（１Ｏ）．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＣｏｍｐｏｕｎｄｓＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓｆｏｒｔｈｅｆｉｒｓｔｔｉｍｅ．ｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｌｅａｖｅｓｏｆＫｅｙｗｏｒｄｓ：ｌｅａｖｅｓｏｆＥｌａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓ；ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ；ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ胡颓子叶异名蒲颓叶，为胡颓子属植物胡颓子（Ｅ］ａｅａｇｎｕｓｐｕｎｇｅｎｓＴｈｕｎｂ．）的干燥叶，分布于长江流域以南各省区。胡颓子叶性：酸，平，无毒。《本草纲目》中记载“胡颓子叶治：肺虚，短气。＂已报道的从胡颓子叶中分离出的化学成分主要有黄酮和生物碱。为研究胡颓子叶的化学成分与活性之间的关系，以更好地四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四利用这一丰富的药用植物资源，作者对胡颓子叶进行了系统的化学成分研究，从其乙醇提取物的石油醚及乙酸乙酯部位分离并鉴定了１０个化合物，分别是１３一谷甾醇（Ｉ）、羽扇豆醇（ＩＩ）、豆甾一４一烯一３，６一二酮（Ⅲ）、水杨酸（ＩＶ）、没食子酸（Ｖ）、香草酸（Ⅵ）、山柰酚（Ⅶ）、山柰酚一３—０－１３一Ｄ－６—０－（对羟基桂皮酰基）一吡喃葡萄糖苷（Ⅷ）、甲基肌醇（ＩＸ）、胡萝ｂ苷（Ｘ）。化合物ＩⅡ～Ⅸ为首次从该种植物中分离得到。１仪器和材料熔点用Ｘ４型显微熔点仪测定（温度未校正）；核磁共振用Ｂｒｕｋｅｒ型核磁共振仪测定：质谱用ＡｇｉｌｅｎｔＴｒａｐＡｃａｎｃｅ６００ＶＬ型质谱仪测定。柱色谱用硅胶为青岛海洋化工厂生产；色谱用试剂均为分析纯。柱色谱用硅胶（１００，－－－－２００目，２００＂－－３００目），薄层色谱硅胶Ｇ、ＧＦ２５４、Ｈ（４００目）均为青岛海洋化工厂生产。胡颓子叶于２００６年购于济南药业集团有限责任公司中药饮片厂。经山东大学药学院生药学教研室陈沪宁副教授鉴定为Ｅ］ａｅａｇｎｕｓ２提取和分离ｐｕｎｇｅｎｓＴｈｕｎｂ．的干燥叶。干燥的胡颓子叶１５ｋｇ，用９０％乙醇加热回流提取３次，浓缩，醇提物加水混悬后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇反复萃取，得石油醚萃取物２９５９，氯仿萃取物１２３９，乙酸乙酯萃取物１２３９，正丁醇萃取物３５０９。将石油醚萃取物经常压柱层析，以石油醚．乙酸乙酯溶剂系统梯度洗脱，ＴＬＣ检测，合并相同组分，再反复经硅胶柱层析得到化合物Ｉ～Ⅲ，乙酸乙酯萃取物以氯仿．甲醇溶剂系统梯度洗脱，最后得到化合物Ⅳ～Ｘ。３结构鉴定化合物Ｉ：白色针状结晶（丙酮），ｍｐ１３７．６～１３８＂Ｃ。Ｌｉｅｂｅｒｍａｎｎ－Ｂｕｒｃｈａｒｄ反应呈阳性。ＥＳＩ．ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１４．２（Ｍ＋），３９７．３（衍．ＯＨ，基峰）。与Ｂ一谷甾醇对照品薄层色谱Ｒｆ值及显色行为一致，且混合熔点不下降，化合物Ｉ鉴定为１３一谷甾醇。化合物ＩＩ：白色针状结晶（石油醚），ｍｐ．２１４＂－＇２１５０Ｃ。分子式Ｃ３０ＨｓｏＯ，分子量为４２６。１Ｈ．ＮＭＲ（６００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）：６Ｏ．７８，Ｏ．８１，０．８５，Ｏ．９６，Ｏ．９８，１．０５（各３Ｈ，Ｓ，为２３，２４，２５，２６，２７，２８位角甲基质子）；１．７０（３Ｈ，ｓ，ＣＩ－１３—３０），２．３９（１Ｈ，ｄｔ，．／－－５．９，１１．１Ｈｚ，Ｈ一１９），３．２０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．８，１１．５Ｈｚ，Ｈ一３ａ），４．５８（１Ｈ，ｍ，Ｈ一２９）和４．７０（１Ｈ，ｄ，户２．４Ｈｚ，Ｈ－２９）．＂Ｃ－ＮＭＲ（１５０Ｈｚ）：６３８．４（Ｃ－１），２７．２（Ｃ一２），７８．７（Ｃ·３），３８．６（Ｃ－４），５５．０（Ｃ一５），１８．０（Ｃ－６），３４．０（Ｃ－７），４０．６（Ｃ一８），５０．２（Ｃ一９），３６．９（Ｃ－１０），２０．７四山东省医学科学院研究生毕业论文四（Ｃ一１１），２４．９（Ｃ一１２），３７．８（Ｃ－１３），４２．５（Ｃ一１４），２７．１（Ｃ一１５），３５．３（Ｃ一１６），４２．７（Ｃ－１７），４７．７（Ｃ—１８），４８．ｏ（ｃ－１９），１５０．６（Ｃ－２０），２９．６（Ｃ－２１），３９．７（Ｃ一２２），２７．７（Ｃ一２３），１５．１（Ｃ－２４），１５．８（Ｃ一２５），１５．７（Ｃ一２６），１４．３（Ｃ－２７），１７．７（Ｃ一２８），１０９．０（Ｃ－２９），１９．０（Ｃ一３０）．以上数据与文献报道ｎ’２３的一致，故鉴定化合物ＩＩ为羽扇豆醇。化合物ＩＩｈ白色片状结晶（石油醚），Ｌｉｅｂｅｒｍａｎｎ．Ｂｕｒｃｈａｒｄ试验呈阳性反应。ｍｐｌ６１－－－１６２。Ｃ；ＥＳＩ—ＭＳ：正离子检钡ｗＪ：４２７［Ｍ＋Ｈ】＋；负离子检ｉ贝ＪＪ：４２５［Ｍ—ＨＩ。，分子量４２６，分子式Ｃ２９Ｈ４６０２；１Ｈ—ＮＭＲ（６００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）：６６．１７（ｓ，Ｈ一４），Ｏ．７２（ｓ，Ｈｚ，１８－ＣＨ３），１．１６（ｓ，Ｈ－１９），Ｏ．９３（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２１一ＣＨ３），Ｏ．８４（ｄ，，＝７．１２６－ＣＨ３），０．８１（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２７一ＣＨ３），０．８４（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２９－ＣＨ３）；１’Ｃ－ＮＭＲ（１５０Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）：６３５．５１（Ｃ－１），３３．９７（Ｃ一２），１９９．５５（Ｃ一３），１２５．４４（Ｃ－４），１６１．０７（Ｃ－５），２０２．４２（Ｃ－６），４６．８２（Ｃ－７），３９．１０（Ｃ－８），５０．９５（Ｃ·９），３４．１９（Ｃ一１０），２０．８５（Ｃ—ｌ１），３９．８１（Ｃ－１２），４２．５１（Ｃ一１３），５５．８１（Ｃ－１４），２３．９６（Ｃ一１５），２８．０１（Ｃ一１６），５６．５２（Ｃ－１７），１１．９６（Ｃ一１８），１７．５０（Ｃ一１９），３６．０２（Ｃ－２０），１８．６９（Ｃ一２１），３３．７９（Ｃ一２２），２５．９７（Ｃ一２３），４５．７６（Ｃ一２４），２９．０８（ｃ－２５），１９．８２（Ｃ－２６），１８．９９（Ｃ一２７），２３．０３（Ｃ－２８），１１．８７（Ｃ．２９）。以上数据与文献报道∞１的一致，故鉴定化合物Ⅲ为豆甾．４一烯一３，６．二酮。化合物Ⅳ：白色针晶（甲醇），ｍｐｌ５８－－－１６０。Ｃ；ＥＳＩ．ＭＳ正离子检测：１３９［Ｍ＋Ｈ】＋，负离子检测：１３７［Ｍ—Ｈ】。，分子量为１３８，结合碳谱和氢谱得分子式为Ｃ７Ｈ６０。１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：６１０．３７（１Ｈ，Ｓ，２一ＯＨ），７．０２（１Ｈ，ｄ，户８．４，Ｈ－３），７．５３（１Ｈ，ｄｄｄ，，／－－８．４，７．２，１．３Ｈｚ，Ｈ－４），６．９４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ－－８．４，７．２，１．３Ｈｚ，Ｈ－５），７．９４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．３Ｈｚ，Ｈ－６）；¨Ｃ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，１５０ＭＨｚ）６：１１７．９（Ｃ一１），１６２．２（Ｃ－２），１１１．２（Ｃ－３），１３７．０（Ｃ－４），１１９．６（Ｃ．５），１３１．０（Ｃ一６），１７４．９（ＣＯＯＨ）。与已知文献报道Ｈ３的一致，鉴定化合物Ⅳ为水杨酸。化合物Ｖ：棕色针晶（甲醇），ｍｐ２３６～２３８。Ｃ；ＦｅＣｌ３显色反应呈阳性，ＥＳＩ—ＭＳ以上数据正离子检测：１９３［Ｍ＋Ｎａ】＋，Ｃ７Ｈ６０５。负离子检测：１６９［Ｍ—Ｈ】。分子量１７０，分子式ｓ，１Ｈ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，６００ＭＨｚ）６：６．９３（２Ｈ，ｓ，Ｈ一２，６），８．９０（１Ｈ，ｂｒ４－ＯＨ），９．２１（２Ｈ，ｂｒｓ，３，５一ＯＨ），１２．２０（１Ｈ，ｂｒｓ，ＣＯＯＨ）；”Ｃ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ—ｄ６，１５０ＭＨｚ）６：１６７．７（ＣＯＯＨ），１４５．３（Ｃ一３，５），１３７．９（Ｃ一４），１２０．３（Ｃ－１），１０８．６（Ｃ一２，６）。以上数据与己知文献报道畸１的一致．，鉴定化合物Ｖ为没食子酸。化合物ＶＩ：白色针晶（甲醇），ｍｐ２０３－－一２０５℃；ＥＳＩ—ＭＳ正离子检测：１６９［Ｍ＋Ｈ】＋，负离子检测：１６７［Ｍ—Ｈ】。，分子量为１６８。１Ｈ－Ｎ－ＭＲ（ＤＭＳＯ—ｄ６，６００—７２·四胡颓子叶化学成分及药理活性研究四ＭＨＺ）６：１２．４９（Ｉｎ，Ｓ，ｃｏｏｎ），９．８４（１ｎ，Ｓ，４一ＯＨ），７．４１（１Ｈ，Ｓ，２—０Ｉ－ｉ），７．４２（１Ｈ，ｄｄ，户８．４，２．０Ｈｚ，Ｈ－６），６．８１（１ｎ，ｄｄ，Ｊ－－８．４，２．０Ｈｚ，Ｈ－６），３．７９（３Ｈ，Ｓ，３－０ＣＨ３）；”Ｃ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，１５０Ｍｎｚ）６：１６７．１（ＣＯＯＨ），１５０．９（Ｃ＿４），１４７．１（Ｃ一３），１２３．３（Ｃ．６），１２１．４（Ｃ一１），１１４．９（Ｃ一５），１１２．５（Ｃ一２），５５．４（３－ＯＣＨ３）。以上数据与己知文献报道嫡１的一致．，鉴定化合物Ⅵ为香草酸。化合物ＶＩＩ－黄色粉末（甲醇），ｍｐ２７４．０～２７６．Ｏ℃，盐酸镁粉反应呈阳性，示为黄酮类化合物。ＥＳＩ－ＭＳ正离子检Ｎ－２８７［Ｍ＋Ｈ】＋，负离子检测：２８５［Ｍ－Ｈ】一，分子量２８６，分子式ＣｌｓＨｌ００６。１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：６１２．４８（１Ｈ，Ｓ，５－ＯＨ），１０．８０（１Ｈ，Ｓ，７一ＯＨ），１０．１２（１ｎ，Ｓ，４７－ＯＨ），９．４２（１ａ，Ｓ，３－ＯＨ），８．０４（２Ｈ，ｄ／＝８．６Ｈｚ，Ｈ－２７，６７），６．９３（２Ｈ，ｄ／＝８．６Ｈｚ，Ｈ－３７，５’）；¨Ｃ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ—ｄ６，１５０ＭＨｚ）６＂１４６．７（Ｃ－２），１３５．５（Ｃ·３），１７５．８（Ｃ－４），１６０．６（Ｃ一５），９８．１（Ｃ一６），１６３．８（Ｃ一７），９３．４（Ｃ－８），１５６．０（Ｃ一９），１０２．９（Ｃ－１０），１２１．５（Ｃ一１７），１２９．４（Ｃ－２７），１１５．３（Ｃ·３７），１５９．２（Ｃ－４７），１１５．３（Ｃ一５７），１２９．４（Ｃ一６７）。１Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ－ＮＭＲ．数据与文献报道口’８３的一致，鉴定化合物Ⅶ为山柰酚。化合物Ⅷ：黄色粉末，ｍｐ２３４＂－－２３６℃，与盐酸．镁粉反应显红色。ＥＳＩ—ＭＳ正离子检测：６１７［Ｍ＋Ｎａ】＋，负离子检测：５９３［Ｍ－Ｈ】。，分子量５９４，分子式Ｃ３０Ｈ２６０１３。１Ｈ—ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，６００ＭＨｚ）６：１２．５９（１Ｈ，Ｓ，５－ＯＨ），１０．８７（１Ｈ，ｓ，７－ＯＨ），１０．１８（１Ｈ，Ｓ，４－ＯＨ），１０．０４（１Ｈ，Ｓ，７Ⅳ一ＯＨ），８．０１（２Ｈ，ｄ，／＝８．４Ｈ一２７，Ｈ－６Ｈｚ７），６．８６（２Ｈ，ｄ，，＝８．９Ｈｚ，Ｈ一３７，Ｈ一５７），６．４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，ｇｌｕＨｚ，Ｈ一８），６．１６（１Ｈ，ｄ，，＝１．９Ｈｚ，Ｈ－６），５．４６（Ｉｎ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，Ｐ·ＯＨ—Ｃｉｒｐ＿ｏＨ－ＣｉｎＨ－１），６．］３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．０Ｈ－２Ⅳ），６．８０（２Ｈ，ｄ，，＝８．３Ｈｚ，Ｐ－ＯＨ－ＣｉｎＨ一５＂，Ｈ一９Ⅳ），７．３８（２Ｈ，ｄ，Ｈ一６＂，Ｈ一８＂，Ｈ２３Ⅳ），７．３５（１Ｈ，ｄ，Ｈ－３Ⅳ）；１３Ｃ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ—ｄ６，１５０ＭＨｚ）６：１５６．２（Ｃ－２），１３２．９（Ｃ－３），１７７．３（Ｃ－４），１６１．０（Ｃ一５），９８．７（Ｃ－６），１６４．０（Ｃ·７），９３．６（Ｃ一８），１５６．３（Ｃ－９），１０３．８（Ｃ－１０），１２０．６（Ｃ一１’），１３０．７（Ｃ－２’），１１５．０（Ｃ一３７），１５９．７（Ｃ一４’，１１５．０（Ｃ－５７），１３０．７（Ｃ一６７），１００．８（ｇｌｕＣ一１），７４．０（Ｃ－２），７６．１（Ｃ－３），６９．８（Ｃ－４），７４．１（Ｃ一５），６２．８（Ｃ－６），１６６．１（ｐ—ｏＨ－ＣｉｎＣ一１Ⅳ），１１３．５（Ｃ一２”），１４４．５（Ｃ－３Ⅳ），１２４．８（Ｃ一４’７），１３０．０（Ｃ一５Ⅳ），１１５．６（Ｃ－６Ⅳ），１５９．７（Ｃ．７’７），１１５．６（Ｃ一８’’），１３０．０（Ｃ．９Ⅳ）。１Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ－ＮＭＲ数据与文献报道Ｍ的一致，鉴定化合物Ⅷ为山柰酚．３一Ｄ．１３…Ｄ６ｏ－（对羟基桂皮酰基）．吡喃葡萄糖苷。化合物Ⅸ：白色块状结晶，ｍｐ２０３＂－２０５℃。Ｈ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ—ｄ６）６：３．０８（ｄｄ，．７３．四山东省医学科学院研究生毕业论文四１Ｈ，，／－－９．５，２．９Ｈｚ），３．３（ｓ．３Ｈ），３．６７（１Ｈ，ｄｄ，．／－－７．０，３．５Ｈｚ），３．８６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ－－７．０，３．５Ｈｚ），４．３６（ｄ，Ｊ＝４．６ｎｚ），４．５０（ｍ，２Ｈ），４．６８（ｍ，２Ｈ）；¨Ｃ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ—ｄ６，１５０ＭＨｚ）６：５６．９（ＯＣＨ３），６７．９（ＣＨ），７０．３（ＣＨ），７１．９（ＣＨ），７２．Ｉ（ＣＨ），７３．Ｉ（ＣＨ），８１．０（ＣＨ）。以上数据与己知文献报道ｎ帕一致，鉴定化合物Ⅸ为甲基肌醇。化合物Ｘ：白色粉末（氯仿．甲醇），ｍｐ３００，－一３０２＂Ｃ，Ｌｉｅｂｅｒｍａｎｎ．Ｂｕｒｃｈａｒｄ反应呈阳性。与胡萝ｂ苷对照品薄层色谱Ｒｆ值及显色行为一致，且混合熔点不下降。化合物Ｘ鉴定为胡萝ｂ苷。致谢：核磁共振数据由山东大学药学院任建、马斌老师代测，质谱数据由山东省医学科学院药物所刘拥军老师协助测定。Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ［１】ＳｈｏｌｉｃｈｉｎＭ，ｅｔａ１．¨ＣＮｕｃｌｅａｒｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅｏｆｌｕｐｉｎｅ—ｔｙｐｅｔｒｉｔｅｒｐｅｎｅｓ，ｌｕｐｅｏｌ，ｂｅｔｕｌｉｎａｎｄｂｅｔｕｌｉｎｉｃａｃｉｄ【Ｊ】．ＣｈｅｍＰｈａｒｍＢｕｌｌ，１９８０，２８（３）：１００６－１００８．【２】ＹｕａｎＪＺ，ＳｕｎＱＳ．ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＱｕｅｒｃｕｓｍｏｎｇｏｌｉｃａＦｉｓｃｈ【Ｊ】．ＣｈｉｎａＪＣｈｉｎＭａｔｅｒＭｅｄ（＠国中药杂志），１９９８，２３（９）：５４８—５４９．［３】ＭａｏＳＬ，ＳａｎｇＳＭ，ＬａｏＡＮ，ｅｔａ１．ＳｔｅｒｏｉｄｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｒｏｍＥｕｏｎｙｍｕｓｍｕｐｉｎｅｎｓｉｓ【Ｊ】．ＮａｔｕｒａｌＰｒｏｄｕｃｔＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．（天然产物研究与开发），１９９８，１２（５）：１４－１６．【４】ＺｈｏｕＢＴ，ＬｉＸＺ，ＸｕＰＳ，ｅｔａ１．ＣｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｒｏｍｔｈｅｕｐｇｒｏｕｎｄｏｆＣａｌｌｉｃａｒｐａｋｗａｎｇｔｕｎｇｅｎｓｉｓＣｈｕｎ［Ｊ】．ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＰｈａｒｍａｃｙ（中南药学），２００４，２（４）：２３８－２３９．［５】ＹｉｎＫ，ＧａｏＨＹＬｉＸＮ，ｅｔａ１．ＣｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＣｈａｅｎｏｍｅｌｅｓｓｐｅｃｉｏｓａ（Ｓｗｅｅｔ．）Ｎａｋａｉ［Ｊ】．ＪｏｆＳｈｅｎｙａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（沈阳药科大学学报），２００６，２３（１２）：７６０－７６３．［６】ＺＯＵＪＨ，ＹＡＮＧＪＳ．ＳｔｕｄｉｙｏｎｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＴｒｏｌｌｉｕｓｌｅｄｅｂｏｕｒｉ［Ｊ】．ＣｈｉｎＰｈａｒｍ，（中国药学杂志），２００５，４０（１０）：７３３－７３５．【７】ＺｈｏｕＹＪ，ＳｕｎＱＳ．ＡＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＱｕｅｒｃｕｓｅｎｇｌｅｒｉａｎＳｅｅｍ阴．ＪｏｆＳｈｅｎｙａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（沈阳药科大学学报），１９９９，１６（３）：１９４－１９７．［８】ＬｉＮ，ＬｉＸ，ＹａｎｇＳＬ，ｅｔａ１．ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆｔｈｅｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍＣｏｍｐｔｏｓｏｒｕｓｓｉｂｉｒｉｃｕｓＲｕｐｒ．．（１）［Ｊ】．，ｏｆＳｈｅｎｙａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（沈阳药科大学学报），２００４，２１（２）：１０５—１０８．一７４—四胡颓子叶化学成分及药理活性研究幽【９】ＺｈｏｎｇＨＪ，ＣｈｅｎＪＪ，ＷａｎｇＨＹｅｔａ１．ＣｈｅｍｉｃａｌＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｎＰｏｔｅｎｔｉｌｌａ∥劳ｉｔｈｉｉｖａｒ．ｖｅｌｕｔｉｎａ［Ｊ】．ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌＤｒｕｇｓ（中草药），２０００，３１（７）：４８８—４９０．［１０】ＷａｎｇＭＡ，ＷａｎｇＭＰｔｅｒｏｃｅｌｔｉｓＫ，ＰｅｎｇＳＬ，ＣｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｘｏｍｔｈｅｂａｒｋｓｏｆＰｒｏｄｕｃｔＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄｔａｔａｒｉｎｏｗｉｉ阴．ＮａｔｕｒａｌＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｚｚ（天然产物研究与开发），２００１，１３（６）：５－８．．７５．四山东省医学科学院研究生毕业论文四致谢首先向我尊敬的导师王晓静研究员表示衷心的感谢，感谢导师三年来在学习给予耐心指导和生活上给予无微不至关怀。导师为人正直、专业精深、治学严谨、高度敬业，这些使我得以知识增进，性格发展，让我终生受益。本实验的药理部分是在牟艳玲老师的指导下完成的，并得到了解砚英主任及药理室各位老师的大力帮助。在此表示我衷心的感谢。在实验过程中，丁杏苞老师、贾献慧老师、唐文照老师、杜成林老师、孙敏耀老师、刘拥军老师、白虹老师、王国荣老师、王晓飞师兄，薛晓霞师姐以及李俊婕、王姣、赵焕新、刘学杰、蒋雷、黄先丽等同学给予了诸多帮助，一并表示感谢。感谢药物所领导和老师给予的关怀和支持。最后，感谢养育我的父母，感谢父母多年来对我学业的支持。胡颓子叶化学成分及药理活性研究

作者：

学位授予单位：

付义成

山东省医学科学院

1. 付义成.王晓静.FU Yi-cheng.WANG Xiao-jing 胡颓子属植物化学成分及药理活性研究综述[期刊论文]-齐鲁药事2007,26(4)

2. 付义成.王晓静.贾献慧.李俊婕 胡颓子叶化学成分研究[期刊论文]-中草药2008,39(5)

3. 赵鑫.黄浩.朱瑞良.ZHAO Xin.HUANG Hao.ZHU Rui-liang 中药胡颓子叶的脂溶性化学成分研究[期刊论文]-中成药2006,28(3)

4. 郭明娟.江洪波.田祥琴.黄连.黄静.GUO Ming-juan.JIANG Hong-bo.TIAN Xiang-qin.HUANG Lian.HUANG Jing 胡颓子叶的化学成分[期刊论文]-华西药学杂志2008,23(4)

5. 赵鑫.朱瑞良.姜标.黄浩.ZHAO Xin.ZHU Rui-liang.JIANG Biao.HUANG Hao 胡颓子有效部位化学成分研究[期刊论文]-中国中药杂志2006,31(6)

6. 赵鑫 胡颓子（胡颓子科），短肋羽藓（藓纲：羽藓科）和假柴龙树（茶茱萸科）的化学成分和生物活性[学位论文]2006

7. 娄方明.杨娟.白志川.武冰峰.LOU Fang-ming.YANG Juan.BAI Zhi-chuan.WU Bing-feng 长叶胡颓子根茎化学成分研究Ⅰ[期刊论文]-中国中药杂志2006,31(12)

8. 黄浩.赵鑫.姜标.HUANG Hao.ZHAO Xin.JIANG Biao 胡颓子科植物化学成分研究概况[期刊论文]-中草药2006,37(2)

9. 林萍.LIN Ping 胡颓子对人胃癌细胞增殖抑制的实验研究[期刊论文]-时珍国医国药2007,18(9)10. 骆文福 红果绿叶--胡颓子[期刊论文]-林业实用技术2002(3)

本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Thesis_Y1400511.aspx