一种抗肿瘤转移的药物组合物及其应用[发明专利]

*CN103405721A*

(10)申请公布号(10)申请公布号 CN 103405721 A(43)申请公布日 2013.11.27

(12)发明专利申请

(21)申请号 201310368568.4(22)申请日 2013.08.22

(71)申请人张素平

地址235000 安徽省淮北市烈山区第七中学(72)发明人张素平(51)Int.Cl.

A61K 36/9066(2006.01)A61P 35/04(2006.01)

权利要求书1页 说明书5页权利要求书1页 说明书5页

()发明名称

一种抗肿瘤转移的药物组合物及其应用(57)摘要

本发明公开了一种抗肿瘤转移的药物组合物及其应用，该药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而成：狼毒1-4份、白花蛇舌草40-52份、龙胆草40-52份、莪术20-30份、牛蒡子20-30份、淫羊藿12-20份、茯苓12-20份、桑寄生12-20份。本发明的药物组合物抗肿瘤转移效果显著。

CN 103405721 ACN 103405721 A

权 利 要 求 书

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1.一种抗肿瘤转移的药物组合物，其特征在于：所述的组合物由包含如下重量份的中药材原料制备而成：狼毒1-4份、白花蛇舌草40-52份、龙胆草40-52份、莪术20-30份、牛蒡子20-30份、淫羊藿12-20份、茯苓12-20份、桑寄生12-20份。

2.根据权利要求1所述的抗肿瘤转移的药物组合物，其特征在于：所述的组合物由如下重量份的中药材原料制备而成：狼毒2-3份、白花蛇舌草45-50份、龙胆草45-50份、莪术23-27份、牛蒡子23-27份、淫羊藿15-18份、茯苓15-18份、桑寄生15-18份。

3.根据权利要求2所述的抗肿瘤转移的药物组合物，其特征在于：所述的组合物由如下重量份的中药材原料制备而成：狼毒2份、白花蛇舌草48份、龙胆草48份、莪术25份、牛蒡子25份、淫羊藿16份、茯苓16份、桑寄生16份。

4.根据权利要求1或2或3所述的抗肿瘤转移的药物组合物，其特征在于：所述的组合物为口服制剂。

5.根据权利要求4所述的抗肿瘤转移的药物组合物，其特征在于：所述的口服制剂为片剂、胶囊、颗粒剂、口服液。

6.根据权利要求1或2或3所述的抗肿瘤转移的药物组合物，其特征在于：所述的肿瘤为黑色素瘤。

7.权利要求1或2或3所述的组合物在制备抗肿瘤转移的药物中的应用。8.权利要求1或2或3所述的组合物在制备抗黑色素瘤转移的药物中的应用。

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说 明 书

一种抗肿瘤转移的药物组合物及其应用

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技术领域

[0001]

本发明属于中医药技术领域，具体涉及一种抗肿瘤转移的药物组合物及其应用。

背景技术

据世界卫生组织(WHO)统计，20世纪80年代全世界每年新患癌症的病人约700

万，每年死于癌症者约500万人。50年代初，我国癌症死亡占全部死因的第9位或第10位，70年代我国癌症死亡已跃居第3位。1991年统计资料，我国一些大中城市居民的癌症死亡已占据全部死因的第1位。我国每年新患癌症约160万人、死于癌症者约130万人。上述资料表明：全世界和我国的癌症发病率在逐年明显增加。此外，我国癌症病人就诊时晚期病人仍占多数，具有已失去了手术等根治机会、治疗效果较差的特点。广大医务工作者加强肿瘤治疗的研究，掌握和提高现有各种治疗手段的治疗效果，对降低癌症死亡率，减少复发率，提高癌症病人的生活质量具有重要意义。按现在我国癌症死亡的水平，全国每1分钟就有2个人死于癌症，每天将有2 800多人被癌症夺走生命，1年将相当于一个有百万人口的城市被毁灭。可见，癌症是常见病、多发病，对人们生命和健康有者严重威胁，对国民经济建设的影响也是巨大的。在美国，每年癌症治疗费用830亿美元，占全国医疗费用的14％。几乎每个人都感受到癌症的威胁。因为全世界每年因癌症死亡的人数高达630万人，而我国每年因癌症死亡的人数已达130万人，并且癌症病人每年以3％的速度递增，相当于每200个家庭中就有1个家庭受到癌症的威胁。

[0003] 化疗是目前治疗癌症的一个重要手段，化疗药物在杀死癌细胞的同时，对机体正常细胞也存在毒性。近年来，随着抗癌新药的不断涌现，联合化疗方案的合理应用，化疗的疗效有了较大的提高，但这些药物同时对正常组织器官有损害或毒性作用，从而降低机体免疫功能，出现骨髓抑制等一系列毒副反应，影响化疗的疗效，甚至迫使化疗终止。临床研究表明，在化疗时根据患者的体质、癌症分期以及出现的毒副反应症状，辅以中药治疗，可有效地增强化疗的效果，又能在一定程度上避免或减轻放化疗的毒副反应，延长患者的生存期和提高患者的生存质量。而中药作为我国得天独厚的资源，有些药物具有明显的抗肿瘤作用，因此从我国传统的天然药物中筛选高效低毒、靶向性强的抗肿瘤药物具有十分重要的意义。

[0002]

发明内容

[0004] 本发明根据传统中医理论，经过对药物组分的大量筛选、重组、尝试、又通过大量动物实验研究作出的。因此，本发明的目的在于通过对传统药物药理进行研究后重新组方，提供一种抗肿瘤转移的药物组合物。[0005] 本发明的目的是这样实现的：

一种抗肿瘤转移的药物组合物，由包含如下重量份的中药材原料制备而成：狼毒1-4份、白花蛇舌草40-52份、龙胆草40-52份、莪术20-30份、牛蒡子20-30份、淫羊藿12-20份、茯苓12-20份、桑寄生12-20份。

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说 明 书

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优选地，上述的抗肿瘤转移的药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而成：

狼毒2-3份、白花蛇舌草45-50份、龙胆草45-50份、莪术23-27份、牛蒡子23-27份、淫羊藿15-18份、茯苓15-18份、桑寄生15-18份。[0007] 进一步优选地，上述的抗肿瘤转移的药物组合物由如下重量份的中药材原料制备而成：狼毒2份、白花蛇舌草48份、龙胆草48份、莪术25份、牛蒡子25份、淫羊藿16份、茯苓16份、桑寄生16份。[0008] 进一步优选地，上述的抗肿瘤转移的药物组合物为口服制剂。再进一步优选地，所述的口服制剂为片剂、胶囊、颗粒剂、口服液。[0009] 通过试验研究发现，由上述配比的中药材组成的药物组合物抗肿瘤转移的的疗效显著。因此，本发明的第二个目的在于提供一种医药新用途，即上述的组合物在制备抗肿瘤转移的药物中的应用。优选上述的组合物在制备抗黑色素瘤转移的药物中的应用。[0010] 本发明涉及的中药口服液的制备方法包括如下步骤：

（1）取处方量的狼毒1-4份、白花蛇舌草40-52份、龙胆草40-52份、莪术20-30份、牛蒡子20-30份、淫羊藿12-20份、茯苓12-20份和桑寄生12-20份，洗净去杂，晾干，粉碎；

（2）再将上述颗粒状药材加水漫过药面2cm，浸泡1-1.2h，捞出药材置多功能提取灌中加水煎煮二次，第一次加总药材8-10倍量的水，煎煮2h，取煎液，滤过，第二次加总药材6-8倍量的水，煎煮1h，取两次煎液合并，滤过，浓缩至90℃时相对密度为1.15g/mL的浓缩液；

（3）将浓缩液置0-5℃低温冷藏24h，将冷藏液加0.3%的助滤剂硅藻土，滤过，滤液再浓缩至每毫升含5-6g生药量，置0-5℃低温冷藏24h，将冷藏液滤过，添加或不添加矫味剂后包装即得口服液。

[0011] 根据中医药史料记载，本发明采用的中药材原料的药理活性和来源如下：

狼毒：具有泻水逐饮、破积杀虫的功效。水肿腹胀；痰食虫积；心腹疼痛；症瘕积聚；结核；疥癣。选用瑞香科植物瑞香狼毒Stellera chamaejasmeL.[Passerina chamaejasmeFisch.]的根。[0012] 白花蛇舌草：拉丁名Herba Hedyotis Diffusae，具有清热解毒、利湿的作用；主治：肺热喘咳；咽喉肿痛；肠痈；疖肿疮疡；毒蛇咬伤；热淋涩痛；水肿；痢疾；肠炎；湿热黄疸；癌肿。选自茜草科植物白花蛇舌草 Hedyotis diffusa Willd. 的干燥全草。[0013] 龙胆草：清热燥湿；泻肝定惊。湿热黄疸；小便淋痛；阴肿阴痒；湿热带下；肝胆实火之头胀头痛；目赤肿痛；耳聋耳肿；胁痛口苦；热病惊风抽搐。来源于龙胆科植物龙胆（Gentiana scabra Bge.）的根和根茎。[0014] 莪术：行气破血，消积止痛。用于燀瘕痞块，瘀血经闭，食积胀痛；早期宫颈癌。选用姜科植物桂莪术Curcuam kwangsiensis S.G.Leset C.F.Liang的根茎。[0015] 牛蒡子：具有疏散风热、宣肺透疹、利咽散结、解毒消肿的功效，主治风热咳嗽、咽喉肿痛、斑疹不透、风疹瘙痒、疮疡肿毒。选自菊科植物牛蒡Arctium lappa L.的干燥成熟果实。

[0016] 淫羊藿：补肾阳，强筋骨，祛风湿。用于阳痿遗精，筋骨痿软，风湿痹痛，麻木拘挛；更年期高血压。选用小檗科植物淫羊藿（Epimedium brevicornum Maxim.）的干燥叶。[0017] 茯苓：具有利水，渗湿利尿的功效。主治小便不利；水肿胀满；痰饮咳逆；呕吐；脾虚食少；泄泻；心悸不安；失眠健忘；遗精白浊。选用多孔菌科真菌茯苓Poria cocos

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说 明 书

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（Schw.）Wolf 的干燥菌核。[0018] 桑寄生：补肝肾；强筋骨；祛风湿；安胎。主腰膝酸痛；筋骨痿弱；肢体偏枯；风湿痹痛；头错目眩；胎动不安，崩漏下血。用于风湿痹痛，腰膝酸软，筋骨无力，崩漏经多，妊娠漏血，胎动不安；高血压。选用桑寄生科植物桑寄生 Taxillus chinensis (DC.) Danser的干燥带叶茎枝。

[0019] 发明人通过试验研究结果表明，本发明的药物组合物抗肿瘤转移疗效确切，灌胃模型小鼠后能明显抑制B16细胞在 C57BL/6 小鼠体内的生长。其具有扩张血管、增加微血管壁通透性和组织液生成的作用, 并没有增加肿瘤细胞血行和/或淋巴转移的概率。相反,本发明的药物组合物使其血行及淋巴转移概率明显降低。本发明的药物组合物抗肿瘤转移效果显著，且无毒副反应。[0020]

具体实施方式

[0021] 以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案做进一步作描述，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。[0022] 实施例1

生药处方：狼毒2公斤、白花蛇舌草48公斤、龙胆草48公斤、莪术25公斤、牛蒡子25公斤、淫羊藿16公斤、茯苓16公斤、桑寄生16公斤。[0023] 制备方法：

（1）取处方量的狼毒、白花蛇舌草、龙胆草、莪术、牛蒡子、淫羊藿、茯苓和桑寄生，洗净去杂，晾干，粉碎；

（2）再将上述颗粒状药材加水漫过药面2cm，浸泡1-1.2h，捞出药材置多功能提取灌中加水煎煮二次，第一次加总药材10倍量的水，煎煮2h，取煎液，滤过，第二次加总药材8倍量的水，煎煮1h，取两次煎液合并，滤过，浓缩至90℃时相对密度为1.15g/mL的浓缩液；

（3）将浓缩液置0-5℃低温冷藏24h，将冷藏液加0.3%的助滤剂硅藻土，滤过，滤液再浓缩至每毫升含6g生药量，置0-5℃低温冷藏24h，将冷藏液滤过，包装即得口服液。[0024] 实施例2

生药处方：狼毒3公斤、白花蛇舌草40公斤、龙胆草42公斤、莪术21公斤、牛蒡子30公斤、淫羊藿12公斤、茯苓20公斤、桑寄生20公斤。[0025] 制备方法：

（1）取处方量的狼毒、白花蛇舌草、龙胆草、莪术、牛蒡子、淫羊藿、茯苓和桑寄生，洗净去杂，晾干，粉碎；

（2）再将上述颗粒状药材加水漫过药面2cm，浸泡1-1.2h，捞出药材置多功能提取灌中加水煎煮二次，第一次加总药材8倍量的水，煎煮2h，取煎液，滤过，第二次加总药材8倍量的水，煎煮1h，取两次煎液合并，滤过，浓缩至90℃时相对密度为1.15g/mL的浓缩液；

（3）将浓缩液置0-5℃低温冷藏24h，将冷藏液加0.3%的助滤剂硅藻土，滤过，滤液再浓缩至每毫升含5g生药量，置0-5℃低温冷藏24h，将冷藏液滤过，包装即得口服液。[0026] 实施例3

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说 明 书

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生药处方：狼毒1公斤、白花蛇舌草52公斤、龙胆草45公斤、莪术30公斤、牛蒡子22公斤、淫羊藿20公斤、茯苓12公斤、桑寄生16公斤。[0027] 制备方法：

（1）取处方量的狼毒、白花蛇舌草、龙胆草、莪术、牛蒡子、淫羊藿、茯苓和桑寄生，洗净去杂，晾干，粉碎；（2）再将上述颗粒状药材加水漫过药面2cm，浸泡1-1.2h，捞出药材置多功能提取灌中加水煎煮二次，第一次加总药材8倍量的水，煎煮2h，取煎液，滤过，第二次加总药材6倍量的水，煎煮1h，取两次煎液合并，滤过，浓缩至90℃时相对密度为1.15g/mL的浓缩液；

（3）将浓缩液置0-5℃低温冷藏24h，将冷藏液加0.3%的助滤剂硅藻土，滤过，滤液再浓缩至每毫升含6g生药量，置0-5℃低温冷藏24h，将冷藏液滤过，包装即得口服液。[0028] 实施例4、中药对自发性B16F10黑色素瘤转移小鼠模型的影响

常规培养B16F10黑色素瘤细胞，实验前4-5天，按1：10细胞传代于细胞培养瓶中，以免细胞生长过度而出现不完全融合。每个培养瓶大约含6-8×106细胞，取对数生长期的细胞，弃去培养液，用PBS洗净，加入1mL 0.25%胰酶＋0.02% EDTA消化液，放入细胞培养箱中，1-3 min后，轻敲培养瓶使细胞脱落。加10mL DMEM，用移液管吹打细胞，获得单细胞悬液，转入50mL聚丙烯离心管。离心细胞（1200 rpm×10min），然后用PBS洗两遍。用苔盼蓝计数细胞，调整细胞浓度为1×107/mL，备用。[0029] 清洁级C57BL/6小鼠（雌性，5-6周龄，16-20g），以每只 200μl 剂量接种于小鼠左上肢腋部皮下。于接种后第6天按照左足垫上原发瘤的大小将小鼠随机分为如下两组：

模型对照组（12只）：灌胃150mL/kg小鼠体重的纯化水；中药组（12只）：灌胃实施例1制备的中药口服液，剂量为100mL/kg小鼠体重；末次给药后第2 天，即接种第 20天时取材。两组小鼠每次给药前及最后取材前均用游标卡尺测量肿瘤最长径(L)和最短径(W)，按公式L×W2×0.52 计算肿瘤体积(V)，并按(Vn- Vn-1) /Vn-1计算肿瘤生长指数，n为测量次数。[0030] 取材时完整摘除肿瘤，滤纸吸干后称重；取肝、脾、肺、脑组织及各级引流淋巴结，常规制备石蜡切片，HE 染色，观察药物对肿瘤细胞血行及淋巴转移的影响。以肝、脾、肺、脑出现转移灶为血行转移阳性，局部淋巴结内出现非蔓延性转移灶为淋巴转移阳性。[0031] 试验结束后，通过统计试验结果可以看出，灌胃中药能明显抑制B16细胞在 C57BL/6小鼠体内的生长。中药组与对照组瘤重分别为(5.01±1.16)g 与(7.27±1.43)g，二者间差异有统计学意义 (P<0.01) 。从肿瘤生长指数看，其抑制作用在实验初期更加明显，随着肿瘤不断生长，抑制强度渐趋减弱，而二组瘤体积差别则日益明显。另外，对照组12 只荷瘤小鼠中，10 只发现有淋巴结转移，转移率83.3%。其中1 只瘤体较大，长满整个腋窝，已无法分辨淋巴结，但对侧腋窝有一阳性淋巴结，其余个体分别有 1～4个淋巴结阳性。中药组有 4 例发生淋巴结转移，转移率 33.3%，转移淋巴结的个数 1～3个。侵入淋巴结的肿瘤细胞并不聚集成癌巢，且迅速分化成熟，合成大量的黑色素颗粒，不合成黑色素的幼稚细胞极少见。而在瘤体内，却常有大片的幼稚细胞存在。[0033] 其次，对照组 12 只小鼠均未见肝、脑转移；肺转移 3 例，转移率 25.0%，转移灶极小，不超过一个高倍视野。脾转移9例( 包括上述 3例肺转移) ，转移率 75.0%，其中 4 例肉眼可见脾背侧段变黑，而形态未见明显改变。镜下转移灶的分布无明显规律，似沿脾

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说 明 书

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小梁分布者居多，且细胞体积较大，深入到脾实质中的瘤细胞体积小，成熟度高。脾被膜下转移不明显，可能与其结构致密有关。从转移的例数和转移灶的大小看，脾转移的发生先于肺转移出现。中药组仅发现 3 例镜下可见的脾转移，转移率 25.0%，未发现明显的肺转移。中药组与对照组相比，血行转移及淋巴转移率均明显降低(P< 0.05) 。

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