病理术中冰冻切片特殊组织的制片技巧及应用研究

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病理术中冰冻切片特殊组织的制片技巧及应用研究

郑玉琴，沈西华

（新疆石河子大学医学院第一附属医院，新疆 石河子 832008）

【摘要】目的 探究病理术中冰冻切片特殊组织的制片技巧及应用。方法 选择我院2017年1月～2017年12月外科手术快速冰冻的1200例标本为研究对象，在取材、切片及染色等环节进行详细分析，从中发现冰冻切片制作中存在的问题，以便为讨论冰冻切片特殊组织的制片技巧及应用研究提供参考依据。结果 不同的组织标本具有不同冰冻切片的制片方法，观察清楚镜下的组织形态结构，符合术中快速冰冻的诊断要求。结论 由于不同组织种类的构成成分比例存在差异，因此在实际工作中要按照组织的特殊性质选择适合的制片方法，以此取得理想的制片效果。

【关键词】冰冻切片；特殊组织；制片技巧；应用

【中图分类号】R361+.2 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-8242.2019.34.169.01

随着病理术中冰冻切片在临床手术病理诊断中的广泛应用，其得到了众多临床医师的认可和肯定。但对病理医师掌握的冰冻切片诊断技术提出了更高的要求，要求医师在短时间内快速鉴别出送检组织的良、恶性，以此为患者进一步治疗的手术方法提供参考依据。病理术中快速冰冻切片具有时间紧迫、材料限制、要求明确等特点[1]，其质量和制片技巧会严重影响到病理诊断的准确性，并且术中快速诊断面临的风险更高。因此病理人员需要掌握熟练的制片技巧，从而制作出高质量的冰冻切片。现将试验结果报道如下。

液、钙化及各种异物等；较薄的囊壁应该注意组织的包埋方向，切片后及时固定，染色液定期检查更换，保证生产日期新鲜，不超过保质期使用。注意这些影响因素能够满足诊断需要。

3 讨 论

病理术中冰冻切片特殊组织的制片技巧从乳腺、甲状腺、脑、肝、肾等来分析。甲状腺是病理中常见的冰冻标本之一，关键是获得满意的切片，切片要点是保证包膜的完整性，避免病变因素，观察切面是否存在小的结节。获取后尽快放置到固定液中停留大约30 s，染色水洗过程中动作轻柔，避免细胞内的胶质脱落。脑组织及肝肾等，含水量大，操作失误容易产生冰晶，采取速冻的方法，在包埋时垫高底部的细小组织，预防切片机错位而损坏，提前在样本上放置包埋剂，晾干后固定避免脱片。乳腺冰冻切片是我科最常做的，但是术中冰冻快速诊断客观上存在假阳性、假阴性和延迟诊断等问题，需要引起临床人员的高度重视。乳腺切缘组织冰冻时间长，温度会降至-30~40℃范围内，冰冻切片机可以同时冰冻多个标本，但是脂肪组织需要冰冻的时间长，因此脂肪含量高的组织标本提前冰冻。切片过程中手摇轮均匀用力，力量柔和，防卷板在使用时要注意保持和刀锋适当的距离，不使用防卷板的用软毛刷按压OCT边缘组织下缘，防止切片卷曲、粘连便于伸展， 附贴切片动作要轻巧、防止切片皱褶。可增加切片厚度6~8 μm，甚至10 μm。针对切缘为全脂肪的可以印片，如有腺体就只需要把腺体切全，脂肪忽略不计。

综上所述，由于不同组织种类的构成成分比例存在差异，因此在实际工作中要按照组织的特殊性质选择适合的制片方法，以此取得理想的制片效果。

1 材料与方法

1.1 一般材料

选择我院2017年1月～2017年12月外科手术快速冰冻的1200例标本为研究对象，涉及到各个系统组织，例如乳腺、甲状腺、脑、肝、肾等，运用ThermoNX50恒温冰冻机切片。

1.2 方法首先准备阶段，设定合适的箱体温度和冰冻时间，将制片样品放入冰冻机内预冷，提前准备好固定液、染色剂等物品。其次取材过程中注意送检组织和取材器材避免沾水，取材组织大小适中，以1.5×1.5×0.2～0.3 cm适宜，深修组织至最大面，细修并匀速切片。最后固定、染色，设置适合的医院切片室温度，使用95%乙醇液固定切片30秒～1分钟，使用苏木均匀浸染1 min～2 min，使用1%盐酸乙醇分化2～3秒，用自来水返蓝，用水溶性伊红10 s～20 s，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片[2]。

2 结 果

冷冻温度、时间及切片方法等因素都有影响，切片组织不同，标本质量差异明显。因此根据组织选择合适的方法制片，观察镜下组织形态结构完整、细胞染色均匀清晰、细胞形态和常规切片差异较小。

（1）温度和时间影响冰冻切片较大，由于组织标本的形态和构成成分都有差别，因此对冰冻切片所产生的要求不同，冰冻切片的实现条件不同。经过实践探究发现，乳腺和脂肪温度最低，远远低于脑、肝、肾及甲状腺等箱体温度。

（2）其它因素 注意保持取材的原生态，是否沾染黏

参考文献

[1] 刘 敏,罗彦丽,唐 娟.病理术中冰冻切片特殊组织的制片技巧

及应用体会[J].南通大学学报(医学版),2016,36(3):225-227.[2] 杨伟平,吴文乔,邹宗楷,等.快速网状纤维染色在术中快

速冷冻切片病理诊断中的应用[J].临床与实验病理学杂志,2016,32(10):1181-1182.

[3] 李孜孜,周 璇.术中快速冷冻切片制作相关问题探讨[J].中国实

用医药,2015(1):219-221.

本文编辑：吴 卫